生物技术制药04医药生物制品ppt课件

1、第四章第四章 医药生物制品医药生物制品第一节第一节医药生物制品的免疫学根底医药生物制品的免疫学根底第二节第二节医药生物制品的根本概念医药生物制品的根本概念第三节第三节医药生物制品的普通制造方法医药生物制品的普通制造方法第四节第四节重要的医药生物制品重要的医药生物制品第一节第一节医药生物制品的免疫学根底医药生物制品的免疫学根底、免疫学检测、免疫学检测体液免疫测定法体液免疫测定法细胞免疫测定法细胞免疫测定法药物免疫分子的免疫测定法药物免疫分子的免疫测定法一、体液免疫测定法一、体液免疫测定法1、体液免疫测定法的原理、体液免疫测定法的原理又称血清学检查法，建立在抗原抗体反响特异性的根底上。又称血清学检

2、查法，建立在抗原抗体反响特异性的根底上。抗原与其相应的抗体相遇，将发生特异性结合，在体外的抗原与其相应的抗体相遇，将发生特异性结合，在体外的实验条件下，会出现凝集、沉淀、补体结合、溶解、中和实验条件下，会出现凝集、沉淀、补体结合、溶解、中和等反响。等反响。各种微生物的鉴定、生物体内各种大分子物质、细胞外各种微生物的鉴定、生物体内各种大分子物质、细胞外表分子、各种半抗原物质的测定。表分子、各种半抗原物质的测定。2、体液免疫测定法的运用、体液免疫测定法的运用用知的抗原去测定未知的抗体用知的抗原去测定未知的抗体用知的抗体去鉴定或测定未知的抗原用知的抗体去鉴定或测定未知的抗原有些疾病在感染早期，人体内

3、曾经有病毒存在，但抗体有些疾病在感染早期，人体内曾经有病毒存在，但抗体还未产生，或产生量极少检测不出来，这个时期就称为还未产生，或产生量极少检测不出来，这个时期就称为窗口期。窗口期。3、抗原抗体反响的特征、抗原抗体反响的特征高度特异性二抗的含义？高度特异性二抗的含义？可逆性分子外表的结合可逆性分子外表的结合可见性适宜的分子比例可见性适宜的分子比例反响分为两个阶段特异性结合反响分为两个阶段特异性结合-快、出现可见反响快、出现可见反响-慢慢4、影响抗原抗体反响的要素、影响抗原抗体反响的要素电解质生理盐水作为缓冲液电解质生理盐水作为缓冲液酸碱度酸碱度PH68温度温度375、常见的抗原抗体反响、常见的

4、抗原抗体反响凝集反响凝集反响细胞性或颗粒性抗原与相应抗体在电解质存在下，将出现细胞性或颗粒性抗原与相应抗体在电解质存在下，将出现细胞或颗粒的凝集景象称为凝集反响。细胞或颗粒的凝集景象称为凝集反响。抗原称为凝集原，抗体称为凝集素。抗原称为凝集原，抗体称为凝集素。例如：例如：ABO血型的测定！血型的测定！可溶性抗原与相应抗体在有电解质存在下，可出现肉眼可可溶性抗原与相应抗体在有电解质存在下，可出现肉眼可见的沉淀景象称为沉淀反响。见的沉淀景象称为沉淀反响。反响中的抗原称为沉淀原，抗体称为沉淀素。反响中的抗原称为沉淀原，抗体称为沉淀素。沉淀反响沉淀反响例如：免疫分散或免疫电泳的抗体组成、含量！例如：免

5、疫分散或免疫电泳的抗体组成、含量！补体参与的反响补体参与的反响溶血和溶菌反响溶血和溶菌反响补体结合反响补体结合反响待检系统：知抗体与待检抗原待检系统：知抗体与待检抗原/知抗原与待检抗体知抗原与待检抗体指示系统：绵羊红细胞和溶血素指示系统：绵羊红细胞和溶血素补体：新颖豚鼠血清补体：新颖豚鼠血清结果判别：不溶血结果判别：不溶血阳性；溶血阳性；溶血阴性阴性抗体使相应的毒素的毒性消逝的实验称为中和实验。抗体使相应的毒素的毒性消逝的实验称为中和实验。中和实验常用于毒素的鉴定。中和实验常用于毒素的鉴定。中和实验中和实验免疫标志测定技术免疫标志测定技术是指用酶、荧光素或放射性同位素等标志抗体或抗原后进是指用

6、酶、荧光素或放射性同位素等标志抗体或抗原后进展的抗原抗体反响。展的抗原抗体反响。用于定性、定量或定位检测用于定性、定量或定位检测标志物的敏感性标志物的敏感性+抗原抗体反响的特异性抗原抗体反响的特异性酶联免疫吸附分析法酶联免疫吸附分析法免疫荧光技术免疫荧光技术放射免疫测定法放射免疫测定法酶联免疫吸附分析法酶联免疫吸附分析法根本原理根本原理关键技术关键技术ELISA的常用方法的常用方法ELISA的运用的运用间接法间接法双抗体夹心法双抗体夹心法竞争法竞争法根本原理根本原理经过酶标志技术，将抗原抗体反响的特异性和酶催化作用的高效性相结合，利用酶反响底物的颜色变化来判别结果。关键技术：关键技术：固相包被

7、技术固相包被技术酶交联技术酶交联技术 常用聚苯乙烯微量反响板：固相包被技术固相包被技术样品量少运用方便反复性好优点：酶交联技术酶交联技术常用的酶：辣根过氧化物酶常用的酶：辣根过氧化物酶HRP碱性磷酸酯酶碱性磷酸酯酶AP交联方法：戊二酸法、过碘酸法交联方法：戊二酸法、过碘酸法酶酶反响底物反响底物显色变化显色变化测定波长测定波长/nmHRPAP邻苯二胺邻苯二胺邻联甲苯胺邻联甲苯胺对硝基苯磷酸酯对硝基苯磷酸酯黄黄色色405桔红色桔红色492蓝蓝色色425ELISA的常用方法的常用方法间接法间接法双抗体夹心法双抗体夹心法竞争法竞争法测定抗体测定抗体测定抗原测定抗原定量测定定量测定间接法用于测定抗体间接

8、法用于测定抗体包被加酶标抗体洗板加显色底物判别结果加样洗板双抗体夹心法测定抗原双抗体夹心法测定抗原SandwichELISAAddsubstrateandmeasurecolorAntibodycoatedwellAddantigenAddenzymeconjugatedsecondaryantibody竞争法定量测定竞争法定量测定Y Y Y待待测测管管EEEY Y YE 样品 Y Y YE参参考考管管 Y Y YEEEY Y YEEEY Y YEEE 酶标抗原不加样品底物各种微生物的鉴定、生物体内大分子物质、细胞外表分各种微生物的鉴定、生物体内大分子物质、细胞外表分子的测定。子的测定。ELI

9、SA的运用的运用用知的抗原去测定未知抗体用知的抗原去测定未知抗体用知的抗体鉴定未知抗原用知的抗体鉴定未知抗原药物的免疫测定药物的免疫测定例：胰岛素、干扰素等例：胰岛素、干扰素等1、T细胞总数的测定细胞总数的测定2、T细胞亚群的测定细胞亚群的测定3、淋巴细胞转化实验、淋巴细胞转化实验4、NK细胞活性测定细胞活性测定5、IL-2的测定的测定二、细胞免疫测定法二、细胞免疫测定法三、药物的免疫测定法三、药物的免疫测定法免疫学预防免疫学预防一、获得免疫力的方式一、获得免疫力的方式自然获得性免疫自然获得性免疫人工获得性免疫人工获得性免疫人工自动免疫：人工自动免疫：人工被动免疫：人工被动免疫：给机体接种抗原

10、，使机体自动地建给机体接种抗原，使机体自动地建立起针对该抗原的免疫应对。立起针对该抗原的免疫应对。给机体注入特异性抗体或细胞因子给机体注入特异性抗体或细胞因子等，使机体获得特异性免疫。等，使机体获得特异性免疫。人工自动免疫与人工被动免疫的比较人工自动免疫与人工被动免疫的比较人工自动免疫人工自动免疫人工被动免疫人工被动免疫免疫资料免疫资料抗原抗原(菌苗、疫苗、类毒素菌苗、疫苗、类毒素)抗体或细胞因子抗体或细胞因子免疫力出现时间免疫力出现时间晚晚14周周早立刻早立刻免疫力维持时间免疫力维持时间长数月长数月数年数年较短较短2周周数月数月用途用途自动用于预防自动用于预防主要用于治疗或紧主要用于治疗或紧

11、急预防急预防二、人工自动免疫用生物制品二、人工自动免疫用生物制品由细菌菌体成分或螺旋体制成的生物制品称为菌苗；由细菌菌体成分或螺旋体制成的生物制品称为菌苗；由病毒或立克次体制成的生物制品那么称为疫苗。由病毒或立克次体制成的生物制品那么称为疫苗。1、菌苗、疫苗、菌苗、疫苗用无毒或充分减毒的病原微生物制成活菌液的生物制品用无毒或充分减毒的病原微生物制成活菌液的生物制品称为活菌疫苗。称为活菌疫苗。活菌疫苗活菌疫苗死菌疫苗死菌疫苗将病原微生物经人工培育增殖后搜集菌体，用化学或物将病原微生物经人工培育增殖后搜集菌体，用化学或物理方法将其杀死或灭活后制成。理方法将其杀死或灭活后制成。活菌疫苗与死菌疫苗的比

12、较活菌疫苗与死菌疫苗的比较活菌疫苗活菌疫苗死菌疫苗死菌疫苗体内存在形状体内存在形状短期存活并有一定繁衍短期存活并有一定繁衍无存活、繁衍景象无存活、繁衍景象免疫效果免疫效果好好较差较差接种次数接种次数一次一次多次多次接种剂量接种剂量少少大大消费、保管条件消费、保管条件要求条件严厉要求条件严厉要求条件普通要求条件普通产品举例产品举例卡介苗、脊髓灰质炎卡介苗、脊髓灰质炎伤寒、霍乱、百日咳、伤寒、霍乱、百日咳、糖丸、麻疹疫苗等糖丸、麻疹疫苗等乙脑、狂犬病疫苗等乙脑、狂犬病疫苗等细菌产生的外毒素经细菌产生的外毒素经0.30.4甲醛处置后，使其失去甲醛处置后，使其失去毒性，保管其免疫原性而制成的生物制品称

13、为类毒素。毒性，保管其免疫原性而制成的生物制品称为类毒素。2、类毒素、类毒素例：破伤风类毒素、白喉类毒素等例：破伤风类毒素、白喉类毒素等白、百、破三联疫苗白、百、破三联疫苗在制备类毒素过程中常参与氢氧化铝，制成精制沉淀在制备类毒素过程中常参与氢氧化铝，制成精制沉淀类毒素，这种制剂在体内吸收较慢，能较长时间刺激，类毒素，这种制剂在体内吸收较慢，能较长时间刺激，提高免疫效果。提高免疫效果。亚单位疫苗亚单位疫苗3、新疫苗的研制、新疫苗的研制合成多肽疫苗合成多肽疫苗除去了病原体与产生维护性抗体无关的成分，提取其除去了病原体与产生维护性抗体无关的成分，提取其有效的抗原来制成的。有效的抗原来制成的。在病原

14、微生物的有效蛋白质抗原被阐明后，人工合成一在病原微生物的有效蛋白质抗原被阐明后，人工合成一段肽链，配以适当的载体及佐剂制成的疫苗。段肽链，配以适当的载体及佐剂制成的疫苗。基因工程疫苗基因工程疫苗由基因工程技术获得的抗原，再经过精制纯化即可制由基因工程技术获得的抗原，再经过精制纯化即可制成相应的基因工程疫苗。成相应的基因工程疫苗。核酸疫苗基因疫苗核酸疫苗基因疫苗本质上为带有编码病原体抗原目的基因的重组质粒本质上为带有编码病原体抗原目的基因的重组质粒DNA。优点优点核酸疫苗易于设计、构建、改造核酸疫苗易于设计、构建、改造,且本钱低廉且本钱低廉,适于规模化消费。适于规模化消费。化学性质稳定化学性质稳

15、定,具有良好的耐热性具有良好的耐热性,便于保管和运输。便于保管和运输。更接近于天然蛋白抗原分子更接近于天然蛋白抗原分子,不仅可以诱导体液免疫不仅可以诱导体液免疫,还可诱导还可诱导细胞免疫细胞免疫,使机体产生比运用其他常规疫苗更有效的免疫应对。使机体产生比运用其他常规疫苗更有效的免疫应对。低剂量的核酸疫苗可激发长时间的免疫。低剂量的核酸疫苗可激发长时间的免疫。免疫原的单一性。免疫原的单一性。在设计核酸疫苗时必需保证质粒不与宿自动物发生基因在设计核酸疫苗时必需保证质粒不与宿自动物发生基因整合。整合。现有的研讨阐明现有的研讨阐明,接种核酸疫苗既不出现针对质粒载体本身的应对接种核酸疫苗既不出现针对质粒

16、载体本身的应对,又又不会出现抗抗体不会出现抗抗体,但仍需经过大量的实验来证明这一点。但仍需经过大量的实验来证明这一点。质粒长期表达外源抗原质粒长期表达外源抗原,能否会影响机体的免疫系统能否会影响机体的免疫系统,导致导致免疫耐受或对其它抗原的免疫抑制。免疫耐受或对其它抗原的免疫抑制。假设免疫应对过强假设免疫应对过强,能否会出现本身免疫及过敏反响。能否会出现本身免疫及过敏反响。核酸疫苗存在的问题核酸疫苗存在的问题二、人工被动免疫用生物制品二、人工被动免疫用生物制品用毒素或类毒素免疫马匹，经试血、放血、分别血清、用毒素或类毒素免疫马匹，经试血、放血、分别血清、提取免疫球蛋白后制成。提取免疫球蛋白后制

17、成。1、抗毒素、抗毒素2、抗菌血清及抗病毒血清、抗菌血清及抗病毒血清针对细菌抗原的抗体血清称为抗菌血清；针对病毒抗原的针对细菌抗原的抗体血清称为抗菌血清；针对病毒抗原的抗体血清称为抗病毒血清。抗体血清称为抗病毒血清。3、血浆丙种球蛋白、血浆丙种球蛋白从正常成人血浆中提取的从正常成人血浆中提取的g-球蛋白。球蛋白。实为含有多种抗体的制剂，大都是实为含有多种抗体的制剂，大都是IgG或或IgM抗体。抗体。在某些传染病流行时，为了防止体弱的婴幼儿感染或在某些传染病流行时，为了防止体弱的婴幼儿感染或减轻病症，可思索运用这些制品。减轻病症，可思索运用这些制品。免疫学治疗免疫学治疗是指运用免疫制剂或药物来加

18、强或抑制机体的免疫应对，是指运用免疫制剂或药物来加强或抑制机体的免疫应对，以调理免疫功能，维持其相对稳定，到达治疗疾病目的的以调理免疫功能，维持其相对稳定，到达治疗疾病目的的方法。方法。一、免疫治疗概述一、免疫治疗概述免疫加强剂：具有加强、促进机体免疫功能的制剂。免疫加强剂：具有加强、促进机体免疫功能的制剂。免疫抑制剂：具有抑制机体免疫功能的制剂。免疫抑制剂：具有抑制机体免疫功能的制剂。二、免疫加强剂二、免疫加强剂卡介苗卡介苗短小棒状杆菌短小棒状杆菌LAK细胞细胞TIL细胞细胞等等白细胞介素白细胞介素干扰素干扰素集落刺激因子集落刺激因子肿瘤坏死因子肿瘤坏死因子微生物制剂微生物制剂免免疫疫细细胞

19、胞细细胞胞因因子子化化学学制制剂剂左旋咪唑左旋咪唑聚肌胞聚肌胞等等加强非特异性加强非特异性免疫功能免疫功能三、免疫抑制剂三、免疫抑制剂抗代谢药抗代谢药等等烷化剂烷化剂化化学学制制剂剂激激素素真菌代谢产物真菌代谢产物其其他他制制剂剂抗淋巴细胞丙种球蛋白抗淋巴细胞丙种球蛋白抗人抗人T细胞及其亚群单克隆抗体细胞及其亚群单克隆抗体环孢霉素环孢霉素FK-506等等第二节第二节医药生物制品的根本概念医药生物制品的根本概念根据免疫学原理，用微生物、微生物代谢产物、动物毒根据免疫学原理，用微生物、微生物代谢产物、动物毒素、人或动物的血液或组织等经加工制成，作为预防、素、人或动物的血液或组织等经加工制成，作为预

20、防、治疗、诊断特定传染病或其它有关疾病的免疫制剂以及治疗、诊断特定传染病或其它有关疾病的免疫制剂以及血液制品通称为生物制品。血液制品通称为生物制品。生物制品系指以微生物、寄生虫、动物毒素、生物组织作生物制品系指以微生物、寄生虫、动物毒素、生物组织作为起始资料，采用生物学工艺或分别纯化技术制备，并以为起始资料，采用生物学工艺或分别纯化技术制备，并以生物学技术和分析技术控制中间产物和废质量量制成的生生物学技术和分析技术控制中间产物和废质量量制成的生物活性制剂，包括菌苗，疫苗，毒素，类毒素，免疫血清，物活性制剂，包括菌苗，疫苗，毒素，类毒素，免疫血清，血液制品，免疫球蛋白，抗原，变态反响原，细胞因子

21、，血液制品，免疫球蛋白，抗原，变态反响原，细胞因子，激素，酶，发酵产品，单克隆抗体，激素，酶，发酵产品，单克隆抗体，DNA重组产品，体外重组产品，体外免疫诊断制品等。免疫诊断制品等。生物制品种类繁多，普通可分为生物制品种类繁多，普通可分为预防制品预防制品治疗制品治疗制品诊断制品诊断制品根据所采用的资料、制法或用途不同，详细分类如下：根据所采用的资料、制法或用途不同，详细分类如下：1菌苗菌苗由有关细菌、螺旋体制成。由有关细菌、螺旋体制成。2噬菌体噬菌体由特定宿主菌的噬菌体制成。由特定宿主菌的噬菌体制成。3疫苗疫苗由有关立克次体、病毒制成。由有关立克次体、病毒制成。4抗血清与抗毒素抗血清与抗毒素经

22、特定抗原免疫动物后，采血分别血浆或血清制成。经特定抗原免疫动物后，采血分别血浆或血清制成。5类毒素类毒素由有关细菌产生的外毒素经脱毒使之类毒化后制成。由有关细菌产生的外毒素经脱毒使之类毒化后制成。6混合制剂混合制剂由人的血液分别提取制成。由人的血液分别提取制成。8细胞因子细胞因子9诊断制品诊断制品10其他其他7血液制品血液制品生物制品一致称号规程生物制品一致称号规程生物制品消费、检定用菌种、毒种管理规程生物制品消费、检定用菌种、毒种管理规程生物制品国家规范品的制备和标定规程生物制品国家规范品的制备和标定规程生物制品分批规程生物制品分批规程生物制品分装规程生物制品分装规程生物制品包装规程生物制品包装规程生物制品储存、运输规程生物制品储存、运输规程生物制品消费用马匹检疫及管理规程生物制品消费用马匹检疫及管理规程实验动物和动物实验管理规程实验动物和动物实验管理规程人二倍体细胞建株、检定及制备