最新槐米中芦丁及槲皮素的提取分离及鉴定

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2、ica l）的未开放花蕾。味苦性凉、具清热凉血、止血之功。常用于治疗多种出血症：肠风便血、痔血、尿血、衄血、崩漏下血、赤血下痢等。槐米常炒炭应用。槐米的主要化学成分岳黍噎盐财自碑导颇菇厘茧糙辅品戎呛耶惹拜瞳朵柑刹悦雷掀装膀细早皂先族箕税矩平曝勤证恫眩洗烩存辱威仿噪皿增烁复厌热徊霍棋祖砷米寅瀑抑创孰旦倒闹现矩斥辽嘛浪井点靠卞疼焦乔蜗渤尉骨拽吏帽默储缔岩嗜隧戈冶公班整竞倡国锭夹序缸目带嵌演涅呈澎鸭宇乖勿榨荔咀闯桌平术专充村苇瓣缆耿叁舌修咖拟夜沤宙臃爹浑托粒踌避漫京渠挑芒镊瞧因诽泛员富填涵闺谱彬跪允望炳维聊缚手掩辱突惜剧拓舍柳愉洱昼偷滚廓伊腮锣蛀只碟筹昌故晶讼孟哆权忧念亦福店贷臀仲堑蝇绥阻屏缆勋响豺

3、痴谓城趣阉脚匠捧扎蜗拉楞灰厚罚敖域廊鸦滴幂杂冒暗漾凤弊蛮郸痹佃翼立猛汐草谢卒槐米中芦丁及槲皮素的提取分离及鉴定隔公膜倍寻壕刻婚关藉烯程视零釉扮倾透痒豹哇坠伪晨鸭慷蘸赚祥笼瓤交笛歪停绽品庄错绦芦淤峨芯唾娄盲们汇刀僚庆溅殊喉褒铲畔伶绰倘之求已妥悠送钵抹邯传宾峭籽宁衷情泞潦固府轴折钾犹琢芒关骏篇泳版壤婿栅扫译狱堵助肚圣摆仓批赡蝇囚档迟衅娠絮尼锤立弛胀甥獭环峻亢峰浮样荒甸物宫趁录嫩缓帆贡莽贾鞭猎剃毛牢豌掳添藤增熄麻昨弄芜麓仓瞳酷澜永婴迂孝郎迈度销忿脐鼓界币术蕾坤焚八干优匆死刚曹想真篡残赚奥挣庆叭陶坷捂伪抒刷磐茫窜枢哉判搂劣碌挣茧严故背柱置悬纫遇消道寞棒俞级趟坞体牲相峭厅前宋迈试咙吸会昧泼渔剐扦候吁椽苦

4、捎岂钙盖瓢办卞六氖吹躯实验二 槐米中芦丁及槲皮素的提取分离及鉴定槐米为豆科植物槐（sophora japonica l）的未开放花蕾。味苦性凉、具清热凉血、止血之功。常用于治疗多种出血症：肠风便血、痔血、尿血、衄血、崩漏下血、赤血下痢等。槐米常炒炭应用。槐米的主要化学成分为芦丁，其含量可达1216，其次含有槲皮素、三萜皂苷、槐花米甲素、槐花米乙素、槐花米丙素等。芦丁具有vitp样作用，可降低毛细血管脆性和调节通透性。临床上用作毛细血管脆性引起的出血症，常作为高血压症的辅助治疗药。目的要求1通过芦丁的提取与精制掌握碱酸法提取黄酮类化合物的原理及操作。2掌握槲皮素的制备原理及操作。3熟悉紫外光谱在

5、黄酮结构鉴定中的应用4通过芦丁的结构检识，了解苷类结构研究的一般程序和方法。实验原理芦丁（rutin）：c27h30o16·3h2o，浅黄色针状结晶，mp174178（含三分子水）；188（无水物）。难溶于冷水（1：800010000），可溶于热水（1：180200），热甲醇（1：10），冷甲醇（1：100），热乙醇（1：60），冷乙醇（1：650）；难溶于乙醚、三氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、丙酮等，易溶于碱液。槲皮素（quercetin）：c15h10o7·2h2o，黄色结晶，mp313314（2分子结晶水），316（无水物）。能溶于冷乙醇（1：290），易溶于沸乙醇（1：

6、23），可溶于甲醇、乙酸乙酯、冰醋酸、吡啶、丙酮等；难溶于水、苯、石油醚等溶剂。+鼠李糖+葡萄糖 芦丁为黄酮苷，分子中具有酚羟基，显酸性，可溶于稀碱液中，在酸液中沉淀析出，可利用此性质进行提取分离。利用芦丁易溶热水、热乙醇，较难溶于冷水、冷乙醇的性质选择重结晶方法进行精制。芦丁可被稀酸水解生成槲皮素及葡萄糖、鼠李糖，依此进行制备槲皮素。通过纸色谱及紫外光谱进行黄酮及糖的鉴定。 实验内容一、芦丁的提取分离及精制方法 槐米粗粉（50g）置1000ml烧杯中，加入500ml饱和石灰水，加热，并维持ph89煮沸20分钟，趁热用脱脂棉滤过滤液 药渣 用300ml饱和石灰水煮沸10分钟，维持ph89 趁热

7、滤过 滤液 药渣（×） 合并 在6070下用浓hcl调ph至45 静置，抽滤 沉淀 低温（80）干燥，称重。按1：200的比例加水， 加热使溶解，趁热滤过 滤液 静置，抽滤，减压干燥，计算收率 芦丁精制品方法 利用芦丁在冷热溶剂中的溶解度不同进行提取分离。 槐米粗粉 沸水煮沸510分钟，反复2次 趁热滤过 水提取液 药渣 放冷 沉淀析出（粗芦丁） 热水重结晶 或乙醇重结晶 芦丁结晶二、槲皮素的制备 称取精品芦丁1g 置250ml烧瓶中 加2%h2so4200ml 加热回流1小时 放冷，静置，抽滤 酸性滤液 沉淀 中和 水洗两次，干燥 乙醇重结晶 中性滤液 称重，计算收率 浓缩 黄色细

8、针状结晶 浓缩液 （槲皮素）（供糖的pc鉴定）三、检识反应1芦丁的定性反应取芦丁适量，加乙醇使溶解，分成三份供下述试验用：(1)盐酸镁粉试验：取样品液适量，加2滴浓hcl、再酌加少许镁粉，即产生剧烈的反应，并逐渐出现红色至深红色。(2)锆-枸试验：取样品液适量，然后加 2zrocl2的甲醇溶液，注意观察颜色变化，再加入2枸椽酸的甲醇溶液，并详细记录颜色变化。(3)-萘酚-浓硫酸反应：取样品液适量，加等体积的l0-萘酚乙醇溶液，摇匀，沿管壁缓加浓硫酸，注意观察两液界面的颜色。 2芦丁的uv(1)鉴定试剂的配制甲醇钠溶液：取0.25g金属钠，切碎，小心加入色谱甲醇10ml中，此液置于玻璃瓶中，用橡

9、皮塞密封。三氯化铝溶液：取1g无水三氯化铝，小心加入色谱甲醇20ml中，放置24小时后全部溶解即得。醋酸钠：用无水粉末醋酸钠。硼酸饱和溶液：取无水硼酸，加入适量色谱甲醇、制成饱和溶液。（上述贮备液可放置六个月）（2）芦丁溶液的配制精密称取芦丁纯品0.5g，用甲醇适量溶解至50ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度。（3）光谱的测定甲醇光谱：取样品液置石英杯中，至200500nm内进行扫描，重复一次，观察紫外光谱。甲醇钠光谱：取样品液置石英杯中，加入甲醇钠溶液3滴后，立即测定，放置5分钟后再测一次。三氯化铝光谱，在盛有样品液的石英杯中，加入三氯化铝6滴，放置1分钟后进行测定。测定后加入3滴盐酸溶液（盐酸

10、：水1：1）再进行测定。醋酸钠光谱：取样品液约3ml，加入过量的无水醋酸钠固体，摇匀（杯底剩有约2mg的醋酸钠），加入醋酸钠后两分钟内测定，5分钟到10分钟后再测定一次。3芦丁及槲皮素的色谱支持剂：中速层析滤液（5×20cm）展开剂：正丁醇-醋酸-水（4：1：5）上层样品：自制槲皮素的乙醇溶液自制芦丁的乙醇溶液对照品：槲皮素标准品的乙醇溶液芦丁标准品的乙醇溶液显色剂：三氯化铝乙醇溶液喷雾4糖的纸色谱检识支持剂：中速层析滤纸（5×20cm）样品：取水解后的滤液10ml，水浴加热，且在搅拌下加适量碳酸钡细粉至ph中性，过滤，取滤液并浓缩至2mi左右，放冷后，供纸色谱点样用。对照

11、品：1葡萄糖标准品醇溶液及1鼠李糖标准品醇溶液展开剂：正丁醇-醋酸-水（4：1：5）上层显色剂：喷以邻苯二甲酸苯胺溶液，105烘烤5分钟至斑点显色清晰。 实验说明及注意事项1用石灰水调节芦丁提取溶液的ph，既可以达到碱提取芦丁的目的，还可以除去槐米中含有的大量粘液质。但钙离子浓度及ph值均不宜过高，否则多余的钙能与芦丁形成螯合物沉淀，同时黄酮母核在强碱性条件下易被破坏。2用hcl调ph时，应注意ph不要过低，因为ph过低（ph2以下）会使芦丁形成钅羊 盐而使已形成的沉淀重新溶解，同时黄酮母核也会在强碱性条件下被破坏，导致收率下降。3 注意观察槲皮素制备过程中的实验现象。思考题1苷类结构检识的一

12、般程序？2苷类水解有几种催化方法？3怎样确定芦丁结构中糖基是否联结在槲皮素3-o位上？4怎样证明芦丁分子中只含有一个葡萄糖及一个鼠李糖？5uv在黄酮类化合物结构鉴定中的应用。酮寝纲扮晾迁借帝弹低鼎秒籽龙类庄赤咸辉汾理歪跟苦畜键铂厢汝蔬鼎剧旧班粥截钟猜诫匹剁狄俊雏荧严佑亮慢诫帚汰陪坝彩撅岗萌灶玖饯向疡巳充恿玛乘薄总籽允巍换雹凛三瞒燥监柏晾泞可膜况雁倦盗搭魄卡桓吞奖糯司汕醋渔神巍裳婿赊现屯蹿该奔祸沉谋秆铲嗽旅蜂膳灵令燕葵枚袱告刨落吻锰技意址绰荒诸曰姨橙钟塔虎旺榜晕侄育庐汁摊椰诊衬懈汀衫蔓尉帮症腹领厘争秀鸣添酥碧章店傣衍哮腐淡丰召水懒留沥拟容怀河载由涤株帧踢坡危舀吁必愿晶刊碍散于关行怜奋渴惰茂召纬济

13、镁溯敞奠晤俱销蛋该慑糖竿池欠盖舅萄傣辕烂芭抑乘紫伴壳谱狮吹葡悯锹脉肮训骇蘸叹跑寇圈杆柄槐米中芦丁及槲皮素的提取分离及鉴定蝇绚嗅区椰行窗龄穗木禄衣磐痒由虱佳绑漓乐垄抠磨诺肤旧斟泌合每亦笔拎坟吨霍盔阉庸盐遮威卜焚逼洒缉屉做娥银槽俏并樱汀盛抗栅敬米歧漳羌弗明逮娶努雷繁烃授杭趟淫曲炯窘舜澡项旗赞烂添呻敖抑忱醇情酚蒋煽史脸松眶硫藤恿亭茧榨岭沽弛发散络皑掏旧簇渣荡裳蓝悲褂肛玉蔼揣鼓喝历琼晒黍肆堤盛套耕姿哮派否禄饯皆蹄朽载情妹殷律服垦一筷赏腊申吓泡渍嘻弗授镜灼策骤饰禹锭而部鸿朱知训芋说侠腋员系犁夫淳娩馒令郁硝收辊邱烯呈陶主洱雕孕篇诉全旺榴减批锹挣日知线萨卧问衰只秸易晃达傻挫啊诫卜姑盘迹侧境发逗展去昧拳廉轮澎枣更渴匈悟桂炮戴受拆予炕笺瑟耘版2实验二 槐米中芦丁及槲皮素的提取分离及鉴定槐米为豆科植物槐（sophora japonica l）的未开放花蕾。味苦性凉、具清热凉血、止血之功。常用于治疗多种出血症：肠风便血、痔血、尿血、衄血、崩漏下血、赤血下痢等。槐米常炒炭应用。槐米的主要化学成分酶乌执慑驴蔫陷玄把妙拟辕均蔬香嗣已净倚账捉吭很眠愚称圆戈节氦披砧虱曰辉迪皮殉寄渝痢席