血红蛋白及意义PPT课件

1、 亚铁血红素亚铁血红素 亚铁血红素亚铁血红素 珠蛋白珠蛋白 亚铁血红素亚铁血红素 亚铁血红素亚铁血红素（原卟啉、（原卟啉、FeFe2+2+） （原卟啉、原卟啉、FeFe2+2+）（原卟啉、（原卟啉、FeFe2+2+） （原卟啉、原卟啉、FeFe2+2+）（HemoglobinHemoglobin，HbHb或或HGBHGB）第1页/共21页 珠珠Pr N N Fe N N （O2） 亚铁血红素结构示意图亚铁血红素结构示意图第2页/共21页HbAHbA： 2 22 2 成人占成人占90%90%以上以上HbAHbA2 2： 2 22 2 成人约占成人约占2 23%3%HbF(HbF(胎儿胎儿Hb)H

2、b)：2 22 2 成人成人2%2%以下以下第3页/共21页HbOHbO2 2( (氧合血红蛋白氧合血红蛋白) )HbredHbred( (还原血红蛋白还原血红蛋白) )HbCOHbCO( (碳氧血红蛋白碳氧血红蛋白) )Hi Hi ( (高铁血红蛋白高铁血红蛋白) )SHbSHb( (硫化血红蛋白硫化血红蛋白) )主要成分主要成分少量少量与氧结合与氧结合空着空着与与COCO结合结合FeFe2 2FeFe3 3与与S S结合结合第4页/共21页氰化高铁血红蛋白测定法（氰化高铁血红蛋白测定法（HiCNHiCN法）法）碱羟高铁血红素法（碱羟高铁血红素法（AHD575AHD575法）法）十二烷基硫酸

3、钠血红蛋白法十二烷基硫酸钠血红蛋白法( (SDS-HbSDS-Hb法法) )沙利沙利( (Sahli)Sahli)法法 ( (县及县以上医院已淘汰县及县以上医院已淘汰) )第5页/共21页一一. 原理原理HbHbCNCN氧化氧化HiCNHiCN为棕红色，最大吸收峰为棕红色，最大吸收峰540540nmnm。根据标本的吸光度可知根据标本的吸光度可知HbHb浓度。浓度。HiCNHiCNHiHi(HiCN(HiCN法法) )注：注：硫化血红蛋白硫化血红蛋白( (SHb)SHb)不能被转化不能被转化第6页/共21页氰化钾氰化钾 0.05 0.05g g高铁氰化钾高铁氰化钾 0.2 0.2g g磷酸二氢钾

4、磷酸二氢钾 0.14 0.14g g非离子表面活性剂非离子表面活性剂 1.0 1.0mlml蒸馏水蒸馏水 加至加至10001000mlml二二. 试剂试剂HiCNHiCN转化液转化液( (文齐液文齐液) )调调pH7.0pH7.07.47.4，置置棕色玻璃瓶棕色玻璃瓶中密封保存。中密封保存。氧化氧化调节调节pHpH促溶促溶, ,防混浊防混浊(HiCN(HiCN法法) )提供提供CNCN- -第7页/共21页三三. 方法方法4.4.实际工作中，可用实际工作中，可用HiCNHiCN参考液，按生化方参考液，按生化方 法绘制标准曲线，或求出法绘制标准曲线，或求出K K值后计算。值后计算。 K KHbH

5、b（g g）/A/A 1.1. 5.05.0 mlml HbHb转化液血转化液血2020ul,ul,混匀混匀, ,静置静置5 5minmin。2.2.分光光度计比色，波长分光光度计比色，波长540540nmnm，以空白转化以空白转化 液调零，测定吸光度液调零，测定吸光度“A A”。3.3.如用符合如用符合WHOWHO标准的光度计，则可据标准的光度计，则可据“A A”直直 接计算接计算HbHb浓度。浓度。Hb(g/L)Hb(g/L)A A540540 /44000/440006445864458251251A A367.7367.7第8页/共21页氰化高铁血红蛋白标准曲线00.10.20.30.

6、40.50.60.050.0100.0150.0200.0250.0Hb(g/L)A540Hb(g/L) A 50 0.128 100 0.265 150 0.385 200 0.523K=Hb/A = 500/1.301 = 384.32Hb=K A第9页/共21页1.1.KCNKCN为剧毒药品为剧毒药品，防污染。，防污染。2.2.HbHb转化液不能存于塑料瓶中。转化液不能存于塑料瓶中。 否则否则CNCN- -下降，结果偏低。下降，结果偏低。3.3.分光光度计应校正后使用。分光光度计应校正后使用。4.4.标准曲线或标准曲线或K K值应值应定期校正定期校正。四四. 注意事项注意事项第10页/共

7、21页HiCNHiCN法法SDS-HbSDS-Hb法法优点：操作简单；结果稳定。优点：操作简单；结果稳定。缺点：氰化钾有剧毒；缺点：氰化钾有剧毒； 高白细胞或高球蛋白血症可致浑浊；高白细胞或高球蛋白血症可致浑浊； HbCOHbCO转化较慢。转化较慢。 推荐方法推荐方法优点：操作简单；结果稳定；无公害。优点：操作简单；结果稳定；无公害。缺点：摩尔消光系数未确定；缺点：摩尔消光系数未确定； SDS SDS本身质量差异较大；本身质量差异较大； 破坏白细胞。破坏白细胞。次选方法次选方法第11页/共21页如何采用如何采用SDS-HbSDS-Hb法进行血红法进行血红蛋白测定？蛋白测定？1.HiCN1.Hi

8、CN法标准曲线绘制法标准曲线绘制2.SDS-Hb2.SDS-Hb法标准工作曲线绘制法标准工作曲线绘制1)1)取取4 4份不同浓度抗凝血或溶血液用份不同浓度抗凝血或溶血液用HiCN HiCN 法测定吸光度，并求出其法测定吸光度，并求出其HbHb浓度。浓度。2)2)再用再用SDS-HbSDS-Hb法测定法测定4 4份标本的吸光度。份标本的吸光度。3)3)以以4 4份标本份标本HbHb浓度为横坐标，浓度为横坐标，SDS-HbSDS-Hb法测得法测得 的吸光度为纵坐标，绘制标准工作曲线。的吸光度为纵坐标，绘制标准工作曲线。3.SDS-Hb3.SDS-Hb法测定待测标本法测定待测标本第12页/共21页成

9、男：成男： 120 120160160g/Lg/L成女：成女： 110 110150150g/Lg/L新生儿：新生儿：170170200200g/Lg/L第13页/共21页一一. 年龄与性别的差异年龄与性别的差异二二. 精神因素精神因素激动激动、恐惧恐惧、冷水浴使冷水浴使三三. 剧烈体力运动和劳动剧烈体力运动和劳动 缺氧，使缺氧，使四四. 气压降低气压降低缺氧，使缺氧，使五五. 妊娠中、后期妊娠中、后期血液稀释，使血液稀释，使6个月个月2岁婴幼儿岁婴幼儿 造血原料不足造血原料不足，使使某些老人某些老人造血功能减退，使造血功能减退，使新生儿新生儿母体内相对缺氧，使母体内相对缺氧，使第14页/共2

10、1页第15页/共21页一一. 相对性增多相对性增多二二. 绝对性增多绝对性增多2 2. 继发性红细胞增多继发性红细胞增多1 1. 原发性红细胞增多原发性红细胞增多血液浓缩血液浓缩常见于：心血管疾病、肺部疾病、常见于：心血管疾病、肺部疾病、 异常血红蛋白病等异常血红蛋白病等常见于真性红细胞增多症等常见于真性红细胞增多症等第16页/共21页见于各种贫血见于各种贫血贫血的病因分类贫血的病因分类RBCRBC、HbHb和和HctHct低于参考值下限。低于参考值下限。 贫血：贫血：1.1.红细胞生成障碍红细胞生成障碍2.2.红细胞破坏过多红细胞破坏过多3.3.红细胞丢失过多红细胞丢失过多造血原料不足造血原

11、料不足骨髓造血功能减退骨髓造血功能减退见于各种溶贫见于各种溶贫见于各种出血见于各种出血第17页/共21页贫血时贫血时RBCRBC和和HbHb减少程度可不一致减少程度可不一致正色素性贫血：二者成比例减少正色素性贫血：二者成比例减少小细胞低色素性贫血：小细胞低色素性贫血：RBCRBC，HbHb大细胞性贫血：大细胞性贫血：RBCRBC，HbHb第18页/共21页1.1.说出氰化高铁血红蛋白测定法的原理。说出氰化高铁血红蛋白测定法的原理。 2.2.红细胞和血红蛋白在何种情况下增多？红细胞和血红蛋白在何种情况下增多？ 3.3.红细胞和血红蛋白浓度是否越高越健康？红细胞和血红蛋白浓度是否越高越健康？4.4.选择题选择题(1)HiCN(1)HiCN法中哪种血红蛋白不能被转化为法中哪种血红蛋白不能被转化为 氰化高铁血红蛋白氰化高铁血红蛋白 A A、HbOHbO2 2 B B、Hbred CHbred C、SHb SHb D D、HbCO EHbCO E、HbSHbS第19页/共21页(2)HiCN(2)HiCN法中哪种血红蛋白转化较慢法中哪种血红蛋白转化较慢 A A、HBA B