ISO23640-2011稳定性评价解读培训

1、ISO 23640 In vitro diagnostic medical devices-Evaluation of stability of in vitro diagnostic reagents体外诊断医疗器械一体外诊断试剂稳定性的评价王军国家食品药品监督管理局北京医疗器械质量监督检验中心2013-12D bimt稳定性是产品保持稳定组分、属性和 性能的能力与正确度、准确度、精密度、检测限 、线性是体外诊断试剂的重要性能不能直接测量，只能通过评价产品其 他属性对时间的变化 ISO 23640 、 EN 13640、 CLSI EP25-AD bimt目录一.ISO 23640口引言氾围

2、口 3术语与定义 4通用要求 5程序参考文献二、EN 13640. CLSI EP25-A三、几点说明D bimt一、ISO 23640引言研发和生产体外诊断试剂时要考虑：产品设计时 就要考虑稳定性、研发出来后要确定失效期、上 市后要验证失效期确定和监测试剂的稳定性是制造商的责任。稳定 性的评价过程包括建立一个评价方案、做试验得 到一系列有效数据、分析数据、建立稳定性本标准是在EN 13640 Stability testing of in vitro diag no Stic reage nt基础上制订的适用于试剂、校准品、质控品、稀释液、缓冲液、试剂盒 的稳定性押价也适用于含有保存样品或启

3、动反应的物质的样品收集装置规定了稳定性评价的通用要求也对实时稳定性和加速稳定性评价给出了具体的要求保存期（货架期），包括运输首次打开初始包装后的使用稳定性，例如在机稳定性、复溶稳定性、 开瓶稳定性投放市场的试剂的稳定性的监测试剂改进后稳定性的验证不适用于仪器、装置、设备、系统、样品容器、样品3.1 加速稳定性评价 accelerated stability evaluation用加严的环境条件来增加化学和（或）物理降解的速度，从 而去预测保存期的。注：加速稳定性试验条件的设计，包括升高温度、升高湿度 、光照和振动3.2阿伦尼乌斯曲线Arrhenisu plot描述化学反应速率常数随温度和活化能

4、变化关系的的数学函 数CLSI EP25-A3.3 批 batch lot由一个过程或一系列过程生产的具有一致特性的规定量的 材料。3.4 扌比号 batch code , lot number能明确识别一个批次并使得其制造、包装、标示、运输历 史可追溯的特定数字和（或）字母组合。3.5 失效期 expiry date , expiration date在规定的条件下贮存可以保证物质性能特征的时间区间上 限。注：制造商基于试验确定的稳定性特性设定体外诊断试剂、 校准物、控制物质和其他组分的失效期；3.6体外诊断医疗器械 in vitro diagnostic medical deviceIVD

5、医疗器械 IVD medical device单独或组合使用，被制造商预期用于人体标本体外检验的 器械，检验单纯或主要以提供诊断、监测或相容性信息为 目的，器械包括试剂、校准物、控制物质、样品容器、软 件和相关的仪器或装置或其它物品。3.7 夕卜诊断试齐Ll in vitro diagnostic reagentIVD试齐Ll IVD reagent被制造商预期用作体外诊断医疗器械的化学、生物学或免 疫学组分、溶液或制备物。3.8实时稳定性评价real time evaluation使体外诊断试剂置于制造商规定的条件下建立或验证试剂 保存期的试验注：影响体外诊断试剂稳定性的因素包括温度、运输条

6、件、 振动、光、湿度3.9 保存期 shelf life直至失效期的时间段，在此时间段内在制造商规定的贮存 条件下体外诊断试剂在其原始包装内保持其稳定性。注：稳定性和失效期是相关的概念3.10稳定性 stability体外诊断医疗器械在制造商规定界限内保持其性能特性的 能力。注：稳定性适用于：当体外诊断试剂、校准物或控制物在制造商规定的条件下 储存、运输和使用时；按照制造商使用说明制备、使用和贮存的复溶后冻干材料 、工作液和从密闭容器中取出的材料；校准后的测量仪器或测量系统。注：体外诊断试剂或测量系统的稳定性通常用时间量化：以计量学性能特征发生一定量变化的时间间隔长度或一定的时间间隔内特征的变

7、化。3.12验证 verification为给定项目满足规定要求提供客观证据。例对给定参考物质声称的对于其量值和有关测量程序均匀性的证实；例2：对测量系统的性能特性或要求在整个失效期内保持的证实；例3：对测量系统从最初确定开始直到整个稳定期内随时间的连续变化的 大小和方向符合其声称的规定的证实例4：对目标测量不确定度能够满足的证实。注给定项目可以是，例如，一个过程、测量程序、物质、化合物或测 量系统；注2：规定要求可以是，例如，满足制造商声明或技术指标；注3：采用自ISO 181134.1-般原则应有足够的数据去证实稳定性声明从加速稳定性获得的数据可以用来建立最初的有效期。从别的类似试 剂上获

8、得的经验也可以用来建立最初的有效期。但是，一旦产品投入 到市场后，应做实时稳定性研究去验证。应对生产条件与常规生产条件一致的试剂进行稳定性评价。制造商应考虑是否有必要建立稳定性监测的程序，如有必要，应建立 O保存期末的试剂进行稳定性监测。如果产品或生产过程有改变，应评估稳定性是否有变化稳定性的结论应从试验数据的基础上获得，预设的试验方案应包括 责任明确的试剂识别使用条件 例：考虑到坏境因素的变化，包括最坏的情形评价的目标和目的试剂样品信息例：批次、数量、容器、来源识别、浓度关键组分的潜在影响 注：关键组分是对稳定性而言贮存条件例如：2 °C8 °C,不超过20 °

9、C模拟运输检测的时间点间隔每次时间点后的检测 例如：检测的程序和程度检测次数，这取决于测试方法的精密度（考虑到试剂、仪器的可变性） 稳定性评价持续时间数据分析的描述 例：可参考统计学方法对数据进行判断：接受或拒绝 川接受的标准数据的解释Q BIMT4.3稳定性报告稳定性报告至少包括：试验方案涉及到的批次试验结果数据的分析通过/不通过的标准稳定性结论改报告是IVD试剂技术文件的一部分D bimt5程序5.1总则5.1.1目标应有对IVD试剂进行稳定性评价和验证的程序 注：CLSI EP 25-A含有稳定性评价的信息，可以参考5.1.2检测检测应根据预设的方案进行。测试的次数取决于方法的精密度。测

10、试的时间点应根据预设的方案进行。时间间隔应至少覆盖整个保存 期。时间点数量的选择应有利于识别出数据变化趋势 IVD试剂样品量应足够用于整个稳定期的评价和复测如果稳定性评价的条件（例如试剂体积、内包装（原包装）材料）不 同于试剂的最终形式，则应依据ISO 24971进行风险评估5.1.3批次检测批次的最少数量取决于评价的目的，应遵循：对于一个新的IVD试剂的保存期的评价（即实吋稳定性评价），要3个 批次 IVD产品保存期延期，要3个批次模拟运输，1个批次使用稳定性，1个批次 IVD试剂改进，如果根据ISO 14971进行风险评估后有必要进行评价，1 个批次如果要用较少的批次，要根据ISO 149

11、71进行风险评估5.2实时稳定性评价522保存期（货架期） 货架期的评价，试剂应贮存在制造商声称的贮存条件下 注：应规定用于产品预期储存的设备或条件的能力例：实验室用于储存试剂的冰箱一般声称温度控制在28,货架期的评 价不应包括2 °C以下或8 °C以上。5.2.2运输稳定性评价制造商应验证规定的运输条件不影响IVD试剂的失效期如果模拟运输条件，试验方案的设计应基于对运输条件的认识。如果预 先不知道，应调查实际的运输条件以作为模拟运输的基础例如：运输时间、温度、湿度523使用稳定性使用稳定性应能反映日常使用条件，例如在机稳定性、复溶稳定性、开 瘢稳定性5.3加速稳定性评价5

12、32总贝【J加速稳定性评价作为确立最初的失效期，是可以接受的。注：对于有的试剂，加速稳定性评价是不适宜的注：可以参考CLSI EP25-A532程序欲评价的材料应储存在制造商规定的贮存条件下直到加速稳定性试验开 始。试验开始后，材料应置于规定的加严条件下。在规定的时间点， 样品应被拿去做检测或回到贮存条件下。533数据分析根据方案对加速稳定性数据进行分析。例如阿伦尼乌斯曲线、非线性模 型534评价和结论在数据分析、解释和预先建立的可接受标准的基础上建立失效期。D bimt参考文献GB/T 29791.1-2013 (ISO 18113)体外诊断医疗器械制造商提供的信息( 标示)第1部分：术语、

13、定义和通用要求EN 13640CLSI EP 25-A二、与EN 13640、CLSI EP25-A的比较时间先后：EN 13640> EP25、ISO23640实质上：原理、原则都是一致的内容上：EN、ISO是通则；EP更细节，更具实用性和指导性EN 13640stability testing of in vitro diagnostic reagents引言1范围2术语和定义3通用要求3.1方案3.2最终的报告4程序4.1通则4.2实时稳定性评价4.3加速稳定性评价 附录A附录ZAD bimtTP 25-A Evaluation of stability of in vitrodi

14、ag no Stic Reage ntsi范围2生物安全性提示3术语4稳定性测试的概述5实时稳定性评价方案6实时稳定性监测（验证） 劝口速稳定性测试D bimt3术语一级动力学降解first-order degradation产品降解反应速率能用线性微分方程表示 (dx/dt=-kx),因此变换方程的话可以表 示成待测物浓度和反应时间之间呈指数关 系D bimt4稳定性测试的概述建立产品稳定性需遵循4步产品稳定性的实用性的定义拟定一个测试计划执行计划分析数据导出并文件化D bimt| 袖 I5 *4稳定性定义的本质：A什么样的度量标准被认为是关键的性能指标A对每一个度量标准所允许的多大的变化，

15、即可接 受标准A统计学置信度D bimtTi.i稳定性度量指标口厂商选择的度量指标最能揭示一个产品在保存期内质量、安全或功效发 生潜在的重大的变化物理的、生物的、化学的、微生物的（颜色、pH、颗粒大小、沉淀物、 长菌、纯度）口被测物漂移、检出限、精密度、回收率、干扰4丄2被测量的漂移被测量的漂移是定量体外诊断时间稳定性评价的一项传统的度量指标口 X轴（时间）,y轴| （被测量）/ 与初始点的y值比较，计算偏倚/单侧95%置信区间校准品+3个样品（质控、临床样品；低浓度、高浓度、医学决定水平） 口基质口同步设计口关键度量指标的可接受标准来源于：设计输入、预期用途 、已建立的质量目标、相似产品的历

16、史数据、现有产品的 典型性能多数产品稳定性研究使用多个测试样本，任何一个样本的 最小稳定性区间最后成为这个产品批号的整体稳定性区间口多水平的校准品质控品，其稳定性可以各个水平分别标示 ,也可以整体标示最小的稳定性4丄4统计学置信度参考EP05精密度、06线性、07干扰、27检出限本标准单侧95%置信度口保守一些：97.5%, 99%D bimt4.2稳定性研究的类型 Shelf-life stability studies In-use stability studiesTransport stimulation studiesd bimt经典设计优点：在指定的时间点尽可能快的提供结果缺点：样

17、本、仪器、实验室环境、试剂、操作缺乏敏感性同步设计 交错前端模式201-4 .N月m冃WJ。月初5冃初7冃18月W9冃W2月HN月12个 冃个 冃HO个 冃9仆冃8个月7个冃6个冃5仆冃4个月3个月2个冃H个冃交错后端樓式2014 1.512月末3月末4月末5月末6冃末7月末8月末9月末10月末"月 末12月 末丄个月2个月3个月4个月厅个月6个月7个月8个月9个月JL0个 月11.个月12个 月优点：所有吋间点都在同一个检测条件下检测，消除变量 缺点：研究接受时结果才能出来，长期及中间的变化监测不了4.4稳定性测试计划4.5定性方法的延伸同样适用于定性试剂度量指标为：识别阴性、阳性

18、样品的能力、检出限、试剂浊度、微生物、pH4.6文件化稳定性研究5.1计划拟定计划，确认资源本次仅仅对几个标准的宣贯准备产品、校准品质控品等样品，应有20%的冨余口确认良好的仪器状态熟悉操作程序离群点的判断和处理的指南实时数据连续进行监测，只有连续2个点超出标准才能 认定是失控，对失控原因进行调查排除后，确定效期5.2实验将产品置于保存条件下开始设置为零点从保存的产品中随机选择，然后依据稳定性测试计划试剂表在每一个策划师天进行测试，样品随机测试检查每个样本每天形而上的重复结果，查找潜在的异 常值如果一个样本或者全天的测试由于异常值、质控程序 或者操作错误而不合格，只有在识别和纠正错误原因 后才

19、能进行新的测试D BIMT实时稳定性研究方案5.3数据分析1）绘制曲线，X轴（待测量均值），y轴（时间）。大多 数产品在保存期内只有轻微的降解（S10%）,因此经 常采用线性模型。如果图形非线性，则考虑转换公式 或非线性模型2）如果回归的斜率在统计学上无显著性差异（p>0.05）,稳定区间取测试时间点的最大值3）p<0.05,漂移的可接受标准和线性回归单侧95%置信 区间相交的时间。可以软件处理，也可以公式计算公式见EP254）稳定性区间应是所有试剂样本稳定性区间的最小值5）报告：计划、方案、批次、结论等D bimt见EP25附录A实例MTiTim师Fl 挪冏 WW什么情况要进行验

20、证法规要求：产品许可或放行产品纠正或预防措施的一部分产品配方或生产工艺发生改变作为制造商日常生产质量保证活动的一部分步骤一般相同测试时间点少得多，最少可以2点（初始和结束），但点 多有利于误差的估计D bimt7加速稳定性7.1加速稳定性测试的应用比较不同配方或包装的效果为设计风险分析提供关于稳定性失控模式的信息评估产品配方或生产工艺改变的影响预测产品的效期与一般稳定性研究有同样的要求，稳定性属性，可接受标 准,3批,报告7.2基于温度的加速稳定性研究计划考虑温度水平、测试数、时间点数一般，考虑35个温度（避免蛋白变性的条件；相邻的温 度，找出趋势）举例：正常储存温度2 °C8 °C,加速温度可以选择15 °C 、20 °