分光光度法测定新血宝胶囊中铁的含量

1、分光光度法测定新血宝胶囊中铁的含量 （湖北中医药大学药学院 药学（ 2）班 ）一、实验综述 摘要：以邻二氮菲为显色剂用分光光度法测定新血宝胶囊中铁的含量。研究表 明，在 pH=29 的溶液中，铁（）可用盐酸羟胺还原至铁（），生成的铁 （）与邻二氮菲生成稳定的橘红色络合物，其最大吸收波长为506nm,铁浓度在 0.3116.00mg/L 范围内与溶液 吸收光度呈良好的线性关系，线性回归方程为 A= 相关系数 r=，检出限为 mg/L，相对标准差 RSD=，表观摩尔吸收系数 = ?L （mol-1cm-1）关键词：邻二氮菲；分光光度法；铁 铁元素是人体内重要的元素之一。人体缺铁容易导致一些贫血症状

2、甚至一些疾 病，所以适当补铁对人体健康有着非常重要的意义。如果人体缺铁，可影响血红 蛋白、肌红蛋白的合成，使某些酶的活性降低，引起人体生理上的变化，从而导 致免疫力降低，智力降低和机体抵抗力下降等引起的各种疾病的产生。测定新血 宝胶囊中的铁含量对于人体的健康有着十分重要的意义。测定铁的含量由很多方 法。本文采用邻二氮菲分光光度法测定新血宝胶囊中铁的含量，该法具有操作简 单、灵敏度高等特点，结果令人满意。二、实验目的1. 了解分光光度法侧铁的选择2. 熟悉显色反应条件与测量条件的选择方法3. 熟悉实验设计的基本内容与方法4. 掌握分光光度法测定新血宝胶囊中铁的含量三、实验原理亚铁离子与邻二氮菲反

3、应生成橘红色络合物，其反应式为：四、实验仪器和试剂仪器： 721（722）分光光度计、 50ml容量瓶、刻度吸管（ 1ml、5ml），pH 精密试 纸。 实验试剂：铁标准储备液 （Fe2+=100.0 g/ml）. 0.15%邻二氮菲水溶液 （显色剂 ）. 10%盐酸羟胺溶液 （还原剂） 醋酸缓冲溶液 . 3mol/ml HCl. 1mol/ml NaOH.五、实验设计方案（一）测定波长的选择：在 50m L 容量瓶中，准确加入 0 40m L 铁标准溶液 （ I ） ，分别加入 1 m L 10 盐酸羟胺溶液，摇匀后放置 2m i n后，再加入 2m L 015邻二氮菲溶液、 5 m L10

4、m o l L 醋钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀。用 l c m 吸收池，以去离子水 为空白溶液作参比溶液，在不同波长 （ 从 440一 560nm ） 下测定一次吸光度。绘 制吸收曲线。表1/nm图1 由图 1 可以看出，随着波长的增加，吸光度值逐渐增加，在 nm处有最大吸收，此后随着波长的增加，吸光度值降低。因此选择 nm 为最佳吸收波长。（二）邻二氮菲的用量对吸光度的影响取6个 50 m L 容量瓶，各加 1 0- 3m ol L 标准铁溶液 2 m L 及1 m L 10N H 20H ·H C I 溶液，摇匀，放置 2m i n后，再分别加入 010 m L、0 30 m L

5、、 0 50 m L、10 m L、2 0 m L 及 4 0 m LO 15邻二氮菲溶液，和 5 m L l m ol L C H 3C O O N a 溶液，以去离子水稀释至标线，摇匀。在 722 型分光光 度计上用 l c m 吸收池，在选定的波长 nm ，测定溶液的吸光度 （ A ） 。绘制吸光度一显色剂用量曲线。根据实验数据绘制 A V 曲线/nm图2根据表 2 和图 2可知邻二氮菲的用量在 1.0, 4.0 范围时，溶液的吸光度最大且恒 定不变，故选 2.0m L 作为其最佳用量。（三）显色反应的时间取一个 50 m L 容量瓶，加入 2m L 10 qm o l L 标准铁溶液，

6、及 l m L 10 N H 20H ·H C I 溶液，摇匀放置 2m i n后，再加 2 m L 01 5邻二氮菲溶液， 5 m L1.0mol/L 醋酸钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀。在分光光度计上，在选定波长 nm 下，用 l c m 吸收池，以去离子水为空白溶液作参比溶液，测定吸光 度以后每隔半小时再测定一次。表 3 不同显色时间对溶液吸光度的影响根据实验数据绘制 At 曲线At/h图3根据实验结果，为了实现快速并且准确分析，本实验选择室温下最佳测定时间为 显色后 h。（四）溶液 pH 的选择取6 个 50m L 容量瓶，每个加入 2 m L 10- 3mol/L标准铁溶液，

7、及 l m L 10N H ：O H ·H C I 溶液，摇匀放置 2r a i n后，再加 2 m L 015邻二氮菲溶液，摇 匀。分别从滴定管中加入 10 m L 、12 m L 、14 m L、16m L、18 m L、20 m L 0 1m o l L N a O H 溶液，以去离子水稀释至标线，摇匀。在选定波长 nm下，用 1c m 吸收池。以去离子水为空白，测定各溶液的吸光。根据实验数据绘制 ApH 曲线ApH 图 4由图 4中可知，在 pH 值为范围内吸光度最大并基本恒定，故本实验取 pH 为作为最佳显色 pH 。所以我们就可以得出加入 mol LN aO H 溶液时为

8、最适宜用量。(五) 标准曲线的绘制取 5个 50m L容量瓶，用刻度移液管分别加入 000 m L 、040 m L、0 80 m L 、 1 20 m L 、 1 60 m L 、 1 80 m L ( I I ) 标准铁溶液注 <3 >( 含铁 100 ug m L) 。在分别加入 1m L 10N H 20 H H· C l 溶液，摇匀放置 2m i n后，再加 2 m L 015邻二氮菲溶液， 5 m L 1 0m o l L 醋酸钠溶液，以去离子水稀释至 刻度，摇匀。在分光光度计上，在选定波长 nm 下，用 l c m 吸收池，以去离子水为空白溶液作参比溶液，测

9、定各溶液吸光度。以含铁量为横坐标，相应吸 光度为纵坐标，绘制出工作曲线。表 5 标准曲线由标准铁溶液 ( I I ) 在波长nm 处测定吸光度，做标准曲线。数据见表 5 和图 5，其线性较好。回归方程为： A =， r =。根据实验数据，以含铁量为横坐标，相应吸光度为纵坐标，绘制曲线AC/ug/L用移液管量取 20mL新血宝样品溶液于 5 0 m L容量瓶中，加入 l m L 10N H ： O H ·H C l 溶液，摇匀放置 2min后，再加 2 m L015邻二氮菲溶液， 5m L 10m o l L 醋酸钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀。在分光光度计上，在选定波 长nm 下，用 l cm 吸收池，去离子水为空白溶液作参比溶液，放置 h后，测邻二氮菲的用量，图 4 不同显色时间对溶液吸光度的影响定吸光度。测得 吸光度为 A =，由回归方程为：A=， 得 C = ug/m L，则自来水中铁的含量ug/m L：六、实验结论： 本实验的最佳实验条件是： 最大吸收波长为 nm ， 显色剂最佳用量为 m L ； 选择在室温下 h 为最佳时间。 最适宜的 pH