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文档简介
1、制备色谱分离技术制备色谱分离技术一.制备色谱简介色谱法利用不同物质在两项中具有不同分配系数通过两相不断的相对运动实现分离色谱的分类操作方式操作方式分析型分析型制备型制备型分析工具分离技术制备色谱制备色谱:是能分离纯化制备一定量样品 的色谱分离技术相间的吸附分配系数离子交换平衡值相间滞留时间不同实现分离得到所需产品色谱分离的重要性及应用制备型色谱制备型色谱 最近几年来引人注目的新型高效分离技 术,在生物,化工大分子的分离和纯化 领域中将发挥越来越重要的作用。广泛大孔吸附树脂离子交换色谱硅胶色谱色谱分离的重要性及应用重要性:在天然产物分离纯化过程中,色谱技术是最有效的方法。是因为色谱法具有常规分离
2、方法无法比拟的分离效果和分离速度。二:色谱分离的基本概念(1) 固定相(a相,staionary phase)固定相是色谱的一个基质基质待分离的化合物可逆吸附溶解交换二:色谱分离的基本概念固定相固体物质液体物质吸附剂凝胶离子交换剂固体在硅胶或纤维素上的溶液二:色谱分离的基本概念(2)流动相:(b相,mobile phase)流动相:推动固体相上待分离的物质朝一个方 向移动的液体。在制备色谱分离中一般称为洗脱剂。(3)分配系数:分配系数:是指在一定条件下,某组分在固定相和 流动相中含量(浓度)的比值,常用k表示。分配系数是色谱分离纯化物质的主要依据。二:色谱分离的基本概念mscck/scmc分配
3、系数式中 固体相中的浓度流动相中的浓度分配系数是决定其中几种物质采用色谱方法能否分离的先决条件差异越大,分离效果越理想二:色谱分离的基本概念分配系数主要与下列因素有关: 被分离的物质本身的性质 固定相和流动相的性质 色谱柱的温度,一般情况下温度与分配 系数成反比三:色谱分离的特点色谱法具有高超分离能力及效率,其特点如下:(1) 分离效率高 能在较短的时间分离出较复杂的样品。(2) 灵敏度高(3) 分析速度快一般在几分钟或十几分钟内可完成一个试样的分析。(4) 应用广泛可用于有机、无机、低分子、高分子等几乎所有化合物的分离测定。四:色谱的分类流动相和固定相的状态气相色谱气固色谱气液色谱液相色谱液
4、固色谱液液色谱超临界流体色谱四:色谱的分类超临界流体色谱用超临界流体(处于临界温度、临界压力以上的流体)作为流动相进行的色谱即为超临界流体色谱。由于超临界流体的特性使得溶质在超临界流体中具有较大的溶解度和扩散系数,从而促进了组分的分离,具有较高的分离度。五:大孔吸附树脂分离技术的应用大孔吸附树脂(macroporous adsorption resin)是20世纪60年代发展起来的一种新型非离子型高分子聚合物吸剂,具有大孔网状结构,其物理化学性质稳定,不溶于酸碱及各种有机溶剂。特点:吸附性能好,对有机成分选择性较高,机械强度高,价格低廉, 再生处理方便。应用:目前大孔吸附树脂色谱被广泛引用于天
5、然药物有效部位 及有效成分的分离和纯化。五:大孔吸附树脂分离技术的应用大孔吸附树脂柱色谱分离效果的影响因素大孔吸附树脂柱色谱分离效果的影响因素1.大孔吸附树脂性质的影响(1)大孔吸附树脂极性的影响根据被分离物质的极性大小来选择不同类型的树脂:极性大的化合物,适用于在中极性的树脂上分离极性小的化合物,适用于在非极性的树脂上分离五:大孔吸附树脂分离技术的应用例:黄岑黄酮具有多酚羟基结构和糖苷链,具有一定的极性和亲水性,有利于中极性树脂的吸附。它与烷基糖苷的结构有一定的相似性,所以对于烷基糖苷的分离,选择中极性树脂的吸附较好。通常树脂的极性和被分离物质的极性既不能相似,也不能相差太大极性相似注意吸附
6、力过强被分离物不能被洗脱下来极性相差大吸附力过小无法达到分离的目的五:大孔吸附树脂分离技术的应用(2)大孔吸附树脂比表面积的影响在树脂具有适当的孔径确保被分离物质良好扩散的条件下,比表面积越大吸附量就越大。相同条件下应选择比表面积较大的同类树脂。2.被分离物质的性质的影响(1)被分离物质极性大小的影响由于极性大小是一个相对的概念,应根据分子中极性基团(如羧基,羟基,羰基等)与非极性基团(如烷基等)的数目和大小来综合判断。(2)被分离物质分子大小的影响化合物的分子体积越大,疏水性增加,对非极性吸附树脂的吸附能力越强。分子体积大的化合物应选择大孔径树脂。五:大孔吸附树脂分离技术的应用应用实例:对皂苷类化合物的分离可行性分析: 皂苷由皂苷元与糖构成。 皂苷根据苷元连接糖链数目的不同,可分为单糖链 皂苷、双糖链皂苷 及三糖链皂苷。 皂苷的化学结构中,由于苷元具有不同程度的亲脂 性,糖链具有较强的亲水性,使皂苷成为一种表面 活性剂,水溶液振摇后能产生持久性的肥皂样泡沫。 一些富含皂苷的植物提取物被用于制造乳化剂、洗 洁剂 和发泡剂等。五:大孔吸附树脂分离技术的应用结论:与烷基多苷的结构与性质有一定的相似 性,所以对于烷基多苷的分离可以借鉴皂 苷的分离方法。大孔吸附树
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