HPLC验证方案

1、设备/系统名称： 高效液相色谱仪设备/系统型号：Waters515泵、2487检测器方案编号：VM-QC-001-01仪器编号：R211-J Y-04方案制备姓名：日期：方案审核姓名：日期：2姓名：日期：方案审核/批准姓名：日期：姓名：日期：目录1 .目的 .42 .范围 .43 .组织与分工 .44.偏差解决.55.变更控制.56.确认内容.56.1安装确认.56.2运行确认.7欢迎下载3欢迎下载6.3性能确认.87.验证结果汇总及评价128 .验证周期.139 .设备确认总结报告.1410.附件.1410.1偏差记录.1510.2.偏差和解决报告 .1610.3.附录文件清单 .1711.

2、方案完成后审核/批准 .18目的为确认waters515HPLC+waters UV2487高效液相色谱系统测试数据准确可靠，性能稳定, 特制订本验证方案，对高效液相色谱仪进行验证。验证过程应严格按照本方案规定的内容进 行。范围2.1设备验证内容包括：安装确认、运行确认、性能确认。2.2该方案适用于本公司实验室高效液相色谱系统的验证。组织与分工3.1成员组成：部门姓名职务43.2分工由QC负责制订本验证方案。由QA负责确认本验证方案。由QC负责进行本验证方案的具体执行。由QC负责编写验证报告。681094a1000e-Numbered_99df69c5-c8c1-4de9-a0b7-55e5d

3、d9c职责划分：6d5-5d05-4bb5-b262-d8c9b8d1e944-Numbered_f4c2ab27-fe验证小组负责本验证方案的设计、批准及实施。6d5-5d05-4bb5-b262-d8c9b8d1e944-Numbered_f4c2ab27-feQC负责按本验证方案对受试仪器进行验证，并及时报告验证结果，提供验证原始数据。6d5-5d05-4bb5-b262-d8c9b8d1e944-Numbered_f4c2ab27-fe验证小组组长全面协调各项验证工作，负责报告验证结果、审核验证的评价与建议以及 相应的结论，并在验证过程中提供相关的技术支持。偏差解决偏差指的是任何的测试

4、失败，偏离规格，缺失文件，或重大偏离已建立的程序而导致 潜在的GMP符合性影响。对于一个偏差事件，偏差必须被审核并评估确定导致偏差的根源。 另外，根据设备的状态对偏差的影响进行分析。如必要，必须进行偏差原因的调查，将调查 结果包括在“偏差和解决报告”中，偏差的解决(如需要采取的纠正措施，或不采取任何纠 正措施但接受该偏差)和说明也包括在“偏差和解决报告”中，如需要纠正措施将会影响部 分确认，这些部分的确认测试将延迟至改正措施完成。偏差还需要完整的记录在“偏差记录” 中并在最终总结报告中讨论。所有的偏差报告和相关的文件必须包括在最终的确认文件中。变更控制所有的变更和修正将根据相应的变更程序进行。

5、如果需要进行变更，应对其作单独评估 以决定是否有必要进行再确认。验证内容6.1安装确认6.1.1仪器基本情况：设备名称液相色谱仪设备编号R211-JY-04型号Waters515+UV2487生产厂家美国waters公司操作软件浙江智达N2000安装位置精密仪器室检查人:复核人:欢迎下载日期:日期:欢迎下载56.1.2安装确认所需文件资料工程部在设备开箱验收后建立设备档案，整理使用手册等技术资料，归档保存资料档案：资料档案数量存放处Waters515泵使用说明书1工程部UV2487使用说明书1工程部AT-330柱温箱使用说明书1工程部浙江智达N2000工作站1质量部合格证1工程部检查人：日期:

6、复核人：日期:6.1.3设备的外观检查项目结果设备是否无损坏。设备部件是否无缺失。设备是否易于拆卸、清洗。设备安装、固定是否牢靠。设备工作环境是否符合说明书要求。设备安装位置是否恰当，是否留有足够的空间。电气接线连接是否正确，是否有可靠的接地保护。电缆 是否尢损坏。管路连接是否正确，管路和各连接处是否无泄露。检查人：日期:复核人：日期:6.1.4高效液相色谱仪主要部件名称型号编号液相色谱泵Waters515E04515 795M紫外检测器Waters uv2487E04487719M柱温箱AT-330检查人：日期:复核人：日期:欢迎下载66.1.5备注/备件核实备品/备件名称型号数量生产厂家色

7、谱柱4.6mm*200mm*0.5x m1支大连依利特氘灯LH-36X21个sonn tek针孔滤头0.45卩m*13mm*10个/包8包德国MEMBRANE小系滤膜0.45卩m *50nm*50张/盒6盒德国MEMBRANE检查人：日期:复核人：日期:6.1.6.设备安装环境检查确认设备的安装环境和地点符合仪器说明书要求。检查结果在下表记录。确认项目可接受标准确认结果项目结论设备安装检查1、电源:电压：22010%频率，50/60HZ可靠接地电压： 频率： 接地：符合不符合2、环境检杳温度：440C,湿度：20%- 95%温度：湿度：符合不符合结论：检查人：日期：复核人：日期：6.2运行确认

8、6.2.1按waters高效液相色谱仪操作规程进行操作，进行控制旋钮的测试。通电测试：接通仪器电源，将电源开关按向上，则指示灯亮。断电测试：关闭仪器电源，则指示灯灭。泵测试：增加流速时，显示屏显示压力上升，直至稳定，并有废液流出；降低流速速时, 显示屏显示压力上升，直至稳定。6.2.2测试结果，在下表记录。项目可接受标准结果结论waters咼效液相色谱仪操作规程应通过审核、批准符合不符合欢迎下载7通电测试接通仪器电源，将电源开关按向上，则 扌曰示灯亮。符合不符合断电测试关闭仪器电源，则指示灯灭。符合不符合泵测试增加流速时，显示屏显示压力上升，直 至稳定，并有废液流出；降低流速速时， 显示屏显示

9、压力上升，直至稳定。符合不符合结论:检查人:复核人:6.3性能确认631验证项目和技术要求检定项目可接受标准泵流量设定值误差泵流量设定值误差Ss2%;泵流量设定值误差流量稳定性误差SR土2%定性测量重复性（5次定量进样）RSDW1.5%.定量测量重复性（5次定量进样）RSDW1.5%UV检测器波长准确性示值误差土3nm基线漂移.5 X 10-3(AU/h)基线噪声5 X 10-3(AU)最小检测浓度（静态）4 X 10-7g/ml（萘的甲醇溶液）6.3.2确认使用的检定设备校正情况，结果在下表记录。序号名 称仪器编号规格校准日期有效期至11秒表2电子分析天平3容量瓶4温湿度表结论：检查人：日期

10、:复核人：日期:633试剂D-盐酸氨基葡萄糖、重铬酸钾、甲醇、硫酸等。日期:日期:欢迎下载86.4证方法及结果6.4.1泵流量设定值误差Ss、流量稳定性误差SR的检定。将仪器的输液系统、进样器、色谱柱和检测器连接好，以甲醇为流动相，按表1设定流量, 待流速稳定后，在流动相排出口用事先清洗称重过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时， 准确地收集10-25分钟，称量。按下式计算Ss和SR。表1流量设疋值ml/mi n0.51.01.5测量次数333收集流动相时间min251510允许误差Ss3%2%2%SR3%2%2%计算公式：Ss=(Fm-Fs)/Fs * 100%SR=(Fmax-Fmi n)/

11、F*100%式中Ss为流量设定值误差（%）Fm=（W2-W1）/p.t为流量实测值（ml/min）；W2容量瓶+流动相的重量（g）;W!容量瓶的重量（g）;Fs流量设疋值（ml/min）；P实验温度下流动相的密度（g/cm2）；t收集流动相的时间（min）；SR流量稳定性误差（%;Fmax同一组测量中流量最大值（ml/min）；Fmin同一组测量中流量最小值（ml/min）；F同一组测量的算术平均值（ml/min）；泵流量设定值误差Ss、流量稳定性误差SR的检定流量设疋值（ml/min）0.51.01.5流量实测值（ml/min）平均值流量设定值误差SS（%欢迎下载9平均值流量稳定性误差（%结

12、论：检定人：日期:复核人:642定性、定量测量重复性的验证将仪器联接好，使之处于正常工作状态，用进样阀的定量管注入稳定的待分析样品溶液（D-盐酸氨基葡萄糖），记录保留时间和峰面积，连续测量5次，计算相对标准偏差RSD色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以流动相A:流动相B（90/10）为流动相（流动相A为磷酸：辛烷磺酸钠：水=0.08ml:0.12g:99.8ml;流动相B为乙腈），检测波长为195nm测定法:取D-盐酸氨基葡萄糖对照品适量,精密称定,加蒸馏水溶解并定量稀释制成每1ml中 约含5mg的溶液;摇匀，取20卩l注入液相色谱仪，记录色谱图。定性、定量测量重复性的

13、检定进样次数保留时间峰面积平均峰面积标准偏差RSD%标准规定结论1RSDW1.5%2345结论：检定人：日期:复核人：日期:6.4.3紫外检测器性能643.1 UV检测器波长准确性方法：已知苯在233.9nm 238.9nm 243.3nm 248.5nm 254.5nm、260.6nm有特征吸收，故配置100mg/ml苯的乙醇溶液运行“Sample scan”程序。波长误差均应小于3nm波长准确性规定实测误差规定实测误差日期:欢迎下载10233.9nm248.5nm238.9nm254.5nm243.3nm260.6nm结论：检定人：日期:复核人：日期:6.4.3.2基线漂移和基线噪声的测定

14、将仪器的各部分连接好，紫外检测器波长调到254nm,流动相为100%甲醇，流速为1.0ml/min，纸速为5mm/min，吸收度范围选择最灵敏档，开机，待基线稳定后，记录基线3040分钟，计算基线漂移和噪声。基线漂移应w5X10-3(AU/h),基线噪声应w5X10-4(AU)。基线漂移和基线噪声的测定指标项目标准结果结论基线噪声(RIU)-4w5X10基线漂移(RIU/h)3w5X10-(RIU/h)结论：检定人：日期：复核人：日期：6.4.3.3最小检测浓度检定在静态条件下，用注射器注入4X10-7g/ml萘的甲醇溶液，样品峰高应大于或等于两倍基线燥 声峰高，按下式计算最小检测浓度。Ct=

15、2HNC/H式中：Ct:最小检测浓度(g/ml)HN:噪声峰高(记录仪格数或实测高度cm)C:样品浓度(g/ml)H:样品峰高（记录仪格数或实测高度cm） 结论：检定人：日期:欢迎下载11复核人：日期:验证结果汇总及评价验证条件验证项目认可标准结果电压：环境温度：C,相对湿度；输液系统泵流量设定值误差Ss2%;流量稳定性误差SR 2%定性测重复性误差（5次定量管进样）RSDC 1.5%定量测重复性误差（5次定量管进样）RSDC 1.5%UV检测器性能基线漂移w5X10-3(RIU/h);基线噪声=5X10-4(RIU)检测器波长准确性3nm最小检测浓度4X10-8g/ml结论检定人：日期：复核

16、人：日期：验证周期液相色谱仪的验证周期为两年，当更换部件或对仪器性能有怀疑时，应随时验证，并记录验证结果。设备验证总结报告10附件11.方案完成后审核/批准欢迎下载12设备验证总结报告设备名称设备编号执行总结：确认项目测试描述通过/失败有无偏差？安装确认文件核实通过 失败有 无主要部件核实通过失败有 无设备的外观检查通过失败有 无备件/改换部件核实通过失败有 无运行及性能 确认SOP的核实通过失败有 无关键仪表校验的核实通过失败有 无仪器运行及性能测试的核 实。通过失败有 无偏差总结：后续措施和负责人：结论：口 PASS 通过 FAIL 未通过报告人日期审核人日期欢迎下载131.偏差记录记录偏差报告号码并给出简短描述。当偏差解决后，在偏差结束栏签名并注日期偏差编号偏差描述偏差元成人/日期2.偏差和解决报告系