重楼组织培养及快速繁殖开题报告

1、重楼组织培养及快速繁殖重楼组织培养及快速繁殖 开开 题题 报报 告告报 告 者：杨苏文杨苏文年 级： 医学生物技术医学生物技术2005级级实习单位：贵阳医学院医学生物技术教研室贵阳医学院医学生物技术教研室指导老师：刘红美博士刘红美博士 预期效果预期效果43重楼组织培养的研究方案重楼组织培养的研究方案2重楼的研究现状重楼的研究现状1重楼的属性及市场经济分析重楼的属性及市场经济分析野生重楼实物图野生重楼实物图一一重楼的属性及研究现状重楼的属性及研究现状1、重楼的属性、重楼的属性 重楼属百合科，是多年生的草本重楼属百合科，是多年生的草本植物。全世界该属植物约有植物。全世界该属植物约有20种种10变变

2、种和若干变型，分布于欧亚大陆的热种和若干变型，分布于欧亚大陆的热带至温带地区。带至温带地区。 我国主产于云南、贵我国主产于云南、贵州、四川、广西等地。州、四川、广西等地。 本属植物主要以根茎入药，它具本属植物主要以根茎入药，它具有清热解毒、消肿止痛、凉肝定惊、有清热解毒、消肿止痛、凉肝定惊、止血、抗肿瘤、抗生育、免疫调节等止血、抗肿瘤、抗生育、免疫调节等多方面的功效。多方面的功效。 一一重楼的属性及市场经济分析重楼的属性及市场经济分析一一重楼的属性及市场经济分析重楼的属性及市场经济分析 重楼形态叶通常七片重楼形态叶通常七片,轮生于茎顶轮生于茎顶,顶端着生一花顶端着生一花,故而得名七叶一枝花。分

3、故而得名七叶一枝花。分布于海拔布于海拔700-3200米的地米的地区，夏秋采挖。野生重楼区，夏秋采挖。野生重楼靠种子和根茎繁殖，种子靠种子和根茎繁殖，种子繁殖需繁殖需5-7年才能采挖。年才能采挖。 一一重楼的属性及市场经济分析重楼的属性及市场经济分析2、市场经济分析、市场经济分析 长期以来，人们对重楼的利用一直依靠天长期以来，人们对重楼的利用一直依靠天然野生资源，但是由于本属植物生长缓慢，每然野生资源，但是由于本属植物生长缓慢，每年生长量非常小，由于长期过度的掠夺式的采年生长量非常小，由于长期过度的掠夺式的采挖，每年的消耗远远超出野生重楼的生长量。挖，每年的消耗远远超出野生重楼的生长量。 据云

4、南白药集团据云南白药集团2008年调查资料显示，年调查资料显示，分布于我国境内的野生重楼分布于我国境内的野生重楼80 已被开采利已被开采利用，剩下的用，剩下的20按目前国内外市场的需求量按目前国内外市场的需求量测算，大约仅可用测算，大约仅可用35年。年。 一一重楼的属性及市场经济分析重楼的属性及市场经济分析常言道：物以稀为贵，黄金有价药无价。常言道：物以稀为贵，黄金有价药无价。故重楼价格节节攀升。故重楼价格节节攀升。19962003200120082006一般统货，170元/公斤一般统货，110元/公斤一般统货，38元/公斤一般统货，21元/公斤一般统货，25元/公斤96 01 03 06 0

5、8211103825170（元/公斤）（年）1996年年2008年重楼市场价格走势年重楼市场价格走势一一重楼的属性及市场经济分析重楼的属性及市场经济分析 在国内，不少知名企业所生产的药品中，主在国内，不少知名企业所生产的药品中，主药都包含有重楼。药都包含有重楼。 l云南白药集团的白药中，君药就是重楼云南白药集团的白药中，君药就是重楼l四川光大制药厂四川光大制药厂“非典非典”时名声大震的抗病毒时名声大震的抗病毒冲剂中也是重用重楼冲剂中也是重用重楼l江苏南通制药总厂出品的季德胜蛇药片，其中江苏南通制药总厂出品的季德胜蛇药片，其中用的主药七叶一枝花及为重楼用的主药七叶一枝花及为重楼 一一重楼的属性及

6、市场经济分析重楼的属性及市场经济分析 据了解，仅国内几家大型中成药制药厂对重楼据了解，仅国内几家大型中成药制药厂对重楼的年需求量就达的年需求量就达1500吨左右，医院和中药店配方需吨左右，医院和中药店配方需求量达求量达1000吨左右，而全国野生重楼年收购量不足吨左右，而全国野生重楼年收购量不足1500吨。造成重楼的供求矛盾在逐渐加剧。吨。造成重楼的供求矛盾在逐渐加剧。 几丁质酶在害虫防治中的应用几丁质酶在害虫防治中的应用三三重楼的研究现状重楼的研究现状二二 近几年，许多地方虽已开始重楼的人工栽培，近几年，许多地方虽已开始重楼的人工栽培，但重楼种子萌发时间长，出苗率低，而采用根茎直但重楼种子萌发

7、时间长，出苗率低，而采用根茎直接种植或根茎切段种植，也需要用大量的原料药。接种植或根茎切段种植，也需要用大量的原料药。因此，会加剧用种与原料药的矛盾。因此，会加剧用种与原料药的矛盾。 为了解决这些问题，人们在寻求新方案时，为了解决这些问题，人们在寻求新方案时，想到了运用植物组织培养的方法来生产重楼。这想到了运用植物组织培养的方法来生产重楼。这一技术的开发成功，将会为人工栽培提供大量的一技术的开发成功，将会为人工栽培提供大量的种苗，进而解决了资源保护和市场供需的问题。种苗，进而解决了资源保护和市场供需的问题。重楼的研究现状重楼的研究现状二二 目前，关于重楼组织培养的研究报道目前，关于重楼组织培养

8、的研究报道屈指可数，并且还没有一套完整的重楼组屈指可数，并且还没有一套完整的重楼组织培养至移栽存活的体系。因此，为了解织培养至移栽存活的体系。因此，为了解决资源保护和市场需求的问题，对于重楼决资源保护和市场需求的问题，对于重楼组织培养及快速繁殖的研究将刻不容缓。组织培养及快速繁殖的研究将刻不容缓。重楼的研究现状重楼的研究现状二二主要参考文献：主要参考文献：1 李群，葛方兰，王丽李群，葛方兰，王丽. 重楼属植物初代培养过程中无菌培重楼属植物初代培养过程中无菌培养物的建立养物的建立j. 四川师范大学学报：自然科学版，四川师范大学学报：自然科学版，2003，26（6）：）：624-626.2 李群，

9、陈丽萍，葛方兰李群，陈丽萍，葛方兰. 重楼属植物愈伤组织的诱导和培重楼属植物愈伤组织的诱导和培养养j. 四川师范大学学报（自然科学版），四川师范大学学报（自然科学版），2006 ，29（1）。）。3 杨丽云，陈翠，吕丽芬，袁理春杨丽云，陈翠，吕丽芬，袁理春. 云南重楼的组织培养与云南重楼的组织培养与植株再生植株再生j. 植物生理学通讯植物生理学通讯.2008，44（5）。）。4 刘旭，陈玉菡，吴中应，罗川刘旭，陈玉菡，吴中应，罗川. 重楼市场需求与价格分析重楼市场需求与价格分析.中国现代中药中国现代中药.2007，9（6）5侯玉平，胡晓立等侯玉平，胡晓立等. 滇重楼切块繁殖不定芽发生的组织学滇

10、重楼切块繁殖不定芽发生的组织学研究研究.云南大学学报（自然科学版）云南大学学报（自然科学版）.2004，26（6）.重楼组织培养的研究方案重楼组织培养的研究方案三三1、内容简要、内容简要1.1本实验以重楼的顶芽、叶、茎、根茎、根为本实验以重楼的顶芽、叶、茎、根茎、根为主要外植体，通过调控不同的激素配比来筛选出主要外植体，通过调控不同的激素配比来筛选出最佳培养基类型（愈伤组织诱导、不定芽的诱导、最佳培养基类型（愈伤组织诱导、不定芽的诱导、增值及生根培养基）。增值及生根培养基）。1.2将瓶内生根的再生植株，通过驯化，移栽到将瓶内生根的再生植株，通过驯化，移栽到自然条件下的栽培基质中，获得优质健壮的

11、种苗。自然条件下的栽培基质中，获得优质健壮的种苗。重楼组织培养的研究方案重楼组织培养的研究方案三三重楼组织培养的研究方案重楼组织培养的研究方案三三重楼组织培养的研究方案重楼组织培养的研究方案三三2、研究方法、研究方法 主要是依托植物组织培养技术，利用植物细主要是依托植物组织培养技术，利用植物细胞的全能性，对野生重楼的无性繁殖，获得大量胞的全能性，对野生重楼的无性繁殖，获得大量的优良种苗。的优良种苗。3、研究步骤、研究步骤3.1 无菌体系的建立无菌体系的建立; 3.2 诱导愈伤组织培养基的筛选诱导愈伤组织培养基的筛选;3.3 增殖培养基的筛选增殖培养基的筛选;3.4 生根培养基的筛选生根培养基的

12、筛选;3.5 驯化移栽驯化移栽;重楼组织培养的研究方案重楼组织培养的研究方案三三4、技术路线、技术路线外植体灭菌无菌外植体愈伤组织诱导增殖不定芽诱导生根驯化移栽成熟种苗重楼组织培养的研究方案重楼组织培养的研究方案三三5、可能出现的技术问题及解决方案、可能出现的技术问题及解决方案（1）外植体灭菌困难。）外植体灭菌困难。解决方法：解决方法： 可先用可先用200mg/l羧苄西林钠和头胞唑林钠进行抑羧苄西林钠和头胞唑林钠进行抑菌，再拿到超净工作台中进行灭菌处理。菌，再拿到超净工作台中进行灭菌处理。（2）愈伤组织难诱导，易出现褐化现象。）愈伤组织难诱导，易出现褐化现象。解决方法：解决方法：通过多种激素不

13、同搭配地方法进行筛选，从而通过多种激素不同搭配地方法进行筛选，从而选择出最佳的培养基。对于褐化现象，我们可以加入活性选择出最佳的培养基。对于褐化现象，我们可以加入活性炭等方法，降低褐化现象。炭等方法，降低褐化现象。（3）生根后，移栽不易存活。）生根后，移栽不易存活。解决方法：解决方法：通过组织培养的种苗要经过从异养到自养的过通过组织培养的种苗要经过从异养到自养的过渡阶段，如在此阶段注意种苗的保湿以及防止其感染微生渡阶段，如在此阶段注意种苗的保湿以及防止其感染微生物而腐烂，就能够成活。物而腐烂，就能够成活。重楼组织培养的研究方案重楼组织培养的研究方案三三6 预期结果：预期结果：6.1获得重楼诱导

14、愈伤组织、分化不定芽、诱获得重楼诱导愈伤组织、分化不定芽、诱导生根的最适培养基。导生根的最适培养基。6.2记录诱导愈伤组织的诱导率，增值倍数，记录诱导愈伤组织的诱导率，增值倍数，诱导生根的时间、数量、直径和长度。诱导生根的时间、数量、直径和长度。6.3获得驯化、移栽的存活率。获得驯化、移栽的存活率。6.4建立重楼无性快速繁殖体系。建立重楼无性快速繁殖体系。重楼组织培养的研究方案重楼组织培养的研究方案三三重楼组织培养的研究方案重楼组织培养的研究方案三三6 预期结果：预期结果：6.1 获得重楼诱导愈伤组织、分化不定芽、诱获得重楼诱导愈伤组织、分化不定芽、诱导生根的最适培养基。导生根的最适培养基。6

15、.2 记录诱导愈伤组织的诱导率，增值倍数，记录诱导愈伤组织的诱导率，增值倍数，诱导生根的时间、数量、直径和长度。诱导生根的时间、数量、直径和长度。6.3 获得驯化、移栽的存活率。获得驯化、移栽的存活率。6.4 建立重楼无性快速繁殖体系。建立重楼无性快速繁殖体系。7进度安排进度安排l2009年3月份2009年4月份：查阅相关文献， l2009年5月份：选择及采集外植体，建立无菌体系l2009年6月份2009年7月份：诱导愈伤组织培养基的筛选l2009年8月份2010年2月份：增殖和生根培养基的筛选l2010年3月份：驯化、移栽l2010年4月结题、准备毕业论文。 重楼组织培养的研究方案重楼组织培养的研究方案三三 运用组织培养和快速繁殖技