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文档简介

1、第2部分 重要问答题总结1.细胞学说的内容有哪些? The content of the cell theory have? 一切动植物都由细胞发育而来,即生物是由细胞和细胞产物所组成。 所有细胞在结构和组成上基本相似。 生物体是通过其细胞的活动反映其功能的。 新细胞由已存在的细胞分裂而来; 生物的疾病是因为其细胞机能失常导致的。2.早期主要有哪些试验证实了DNA是遗传物质?1944,Avery 肺炎球菌转化小鼠试验;1952,Hershey噬菌体侵染细菌实验。4.通常所说的分子生物学的三条基本原则是什么?举例说明之。Usually say of molecular biology of th

2、ree basic principles is what? The examples. 构成生物体的各类有机大分子的单体在不同的生物中都是相同的。 生物体内一切有机大分子的建成都遵循共同的规则。 某一生物体所拥有的核酸及蛋白质分子决定了它的属性。5.现代分子生物学的主要研究领域有哪些?列举不少于三条。Modern molecular biology major research fields have? List of not less than three. DNA重组技术 基因表达调控研究 生物大分子的结构和功能 基因组、功能基因组与生物信息学研究6.简述DNA的化学组成。This che

3、mical composition of DNA.DNA由单体核苷酸首尾相接,以3,5-磷酸二酯键链接而成。每个核苷酸由脱氧核苷和磷酸组成,而脱氧核苷由脱氧核糖和碱基ATCG组成。7.染色体具有哪些作为遗传物质载体的特征?Chromosome, which have the characteristics of genetic material as a carrier?DNA分子结构应具有多样性和相对稳定性并能准确地自我复制。8.列表对比原核细胞和真核细胞的异同。造成两者基因表达极大差异的主要是哪些方面?List contrast prokaryotes and eukaryotes sim

4、ilarities and differences. Cause the great difference of gene expression is mainly what aspects? 造成两者基因表达极大差异的主要是细胞基本生活方式的不同。原核生物一般为单细胞生物,对营养状况和环境因素反应迅速,以转录调节为主。真核生物以多细胞生物为主,以激素调节和发育调节为主要手段,有严格的时空限制,调节范围宽广。9.分析染色体的化学组成。The chemical composition of chromosome analysi真核生物的染色体由DNA、组蛋白、非组蛋白和少量RNA组成10.简要回

5、答原核生物DNA的主要特征Brief answer prokaryotes the main characteristics of DNA。原核生物中一般只有一条染色体,且大都带有单拷贝基因,只有很少基因以多拷贝形式存在;整个染色体DNA几乎全部由功能基因与调控序列所组成;几乎每个基因序列都与它编码的蛋白质序列呈线性对应状态11.什麽是核小体?简述其形成过程。What is nuclear small body? Briefly introduces the forming process.核小体是染色体的一种基本结构单位,它由DNA和组蛋白(histone)构成。由4种组蛋白H2A、H2B、

6、H3和H4, 每一种组蛋白各两个分子,形成一个组蛋白八聚体,约200 bp的DNA分子盘绕在组蛋白八聚体构成的核心结构外面,形成了一个核小体。12.简述真核生物染色体的组成以及组装过程。Eukaryotic chromosomes were made and assembly process 每200bpDNA和组蛋白(H2A、H2B、H3、H4各两分子和H1一分子)形成核小体(10nm),压缩比7; 核小体串联成的染色体细丝盘绕成螺线管(30nm),每一螺旋含6个核小体,压缩比6; 螺线管进一步压缩为超螺旋圆筒(4000nm),形成中期染色质,压缩比40; 进一步压缩为染色体单体,压缩比5。

7、13.简述核小体模型的结构要点。This model of nucleosome structure points 每个核小体单位包括约200bp的DNA、一个组蛋白核心和一个H1。 由H2A、H2B、H3、H4各两分子形成八聚体,构成盘状核心颗粒; H3、H4形成4聚体,位于颗粒中央; H2A、H2B二聚体分别位于两侧。 DNA分子以左手螺旋缠绕在核心颗粒表面,每圈80bp,共1.75圈,约146bp,两端被H1锁合, H1 结合20bp DNA. 相邻核心颗粒之间为一段60bp的连接线DNA(linker DNA),典型长度60bp。 组蛋白与DNA是非特异性结合,核小体具有自主装性质。1

8、4.组蛋白具有哪些基本特征?这些特征与以后的基因表达之间是否存在某种潜在的联系?请阐述你的看法。What are the basic characteristics of group protein has? These characteristics and later between gene expression whether there are some potential links? Please state your opinion. A组蛋白基本特性如下: 进化上的极端保守性。 无组织特异性。到目前为止,仅发现鸟类、鱼类及两栖类红细胞染色体不含H1而带有H5,精细胞染色体的组

9、蛋白是鱼精蛋白。 肽链上氨基酸分布的不对称性。碱性氨基酸集中分布在N端的半条链上。例如,N端的半条链上净电荷为+16,C端只有+3,大部分疏水基团都分布在C端。 组蛋白的修饰作用。包括甲基化、乙基化、磷酸化及ADP核糖基化等。 富含赖氨酸的组蛋白H5。鸟类、两栖类、鱼类红细胞分离的H5均有种的特异性。B组蛋白基本特性与基因表达之间潜在的联系:组蛋白带正电荷,含精氨酸,赖氨酸,属碱性蛋白,其含量恒定,在真核细胞中组蛋白共有5种,分为两类:一类是高度保守的核心组蛋白(core histone)包括H2A、H2B、H3、H4四种;另一类是可变的连接组蛋白(linker histone)即H1。15.

10、真核生物DNA序列按照重复度可以分为哪几类?分别有什么样的特征?它们在整个基因组中分别充当什麽样的角色?Eukaryotic DNA sequence according to the degree of repetition can be divided into which a few kinds? What are the characteristics? They are in the whole genome as what kind of role 不重复序列:拷贝数低,以结构基因为主。 中度重复序列:拷贝数在1010000之间,串联重复,多为rRNA和tRNA基因或组蛋白基因,往

11、往分散在不重复序列间。 高度重复序列:拷贝数极高并串联重复,碱基序列一般不长。16.何谓C-值反常现象?它说明什么问题?What is a C - value anomalous phenomenon? It shows that what is the problemC值指一种生物单倍体基因组DNA的总量,一般随生物进化而增加,但也存在某些低等生物的C值比高等生物大,即C值反常现象。说明真核生物基因组中含大量非编码序列。17.原核生物基因组有何特征?列举并简要说明。Prokaryotes genome what features? List and briefly基因组通常由单一闭环双链DN

12、A 分子组成;基因组DNA 只有一个复制起点;基因组所含基因数量较多,而且形成操纵子结构;基因组编码序列一般不重叠;基因是连续的,无内含子;编码序列约占基因组的50%,比例高于真核生物基因组,但低于病毒基因组;非编码序列主要是一些调控序列;多拷贝基因很少;基因组中存在称为转座子的可移动序列;在DNA 分子中存在各种特异序列。18.如何定义DNA的一二三级结构?分别有何特征?How to define the DNA of the two tertiary structure? How does this feature?DNA一级结构是指4种核苷酸的链接和排列顺序。有线性和环状之分。 DNA二

13、级结构是指两条多核苷酸链反向平行盘绕所生成的双螺旋结构。有左旋和右旋之分。 DNA三级结构即超螺旋结构是指DNA双螺旋进一步盘旋形成的特定空间结构。有负超螺旋和正超螺旋之分。19.常见的DNA的构象有哪些?其中Watson-Crick所提出的经典模型是哪个?哪些是左旋?哪些是右旋?Common DNA conformation have? The Watson - Crick proposed classical model is which? What is left handed? What is right?常见的DNA构象有A、B、C、Z型。其中Watson-Crick所提出的经典模型

14、是B型。其中Z型左旋,其余皆右旋。20.什么是Z-DNA?Z-DNA在基因表达调控中起什么作用?What is the Z - DNA? Z - DNA in gene expression regulation what roleZ-DNA指左手螺旋DNA。在邻近调控系统中,与调节区相邻的转录区被ZDNA抑制,只有当ZDNA转变为BDAN后转录才能活化,而在远距离调控中,ZDNA可通过改变负超螺旋水平,决定聚合酶能否与模板链结合而调节转录起始的。21.试述DNA二级结构的特点(以B型DNA双螺旋模型为例说明)Describe the characteristics of the second

15、ary structure of DNA (type B DNA double helix model for an example).。(1) 两股反向平行的DNA 链绕成同轴右手双螺旋,双螺旋表面有大沟和小沟。(2) 脱氧核糖和磷酸通过3',5'-磷酸二酯键相连,构成DNA 主链,位于双螺旋的外表面,糖基平面与螺旋轴平行;碱基则位于双螺旋的内部,碱基平面与螺旋轴垂直。(3) 两股DNA 链通过Watson-Crick 碱基对结合,即A 与T 通过两个氢键结合,G 与C通过三个氢键结合,称为碱基互补原则。这样,一股DNA 的碱基序列决定了另一股DNA的碱基序列,两股DNA 链

16、互相称为互补链。(4) 双螺旋直径为2nm。相邻碱基的堆砌距离为0.34nm,旋转夹角为36°。据此,每一螺旋含10bp,螺距为3.4nm。不过,在溶液状态下,每一螺旋含10.5bp,螺距为3.6nm。22.拓扑异构酶I、II分别在DNA高级结构的调整中起到了什麽样的作用?它们分别是如何其作用的?Topoisomerase I, II respectively in DNA advanced structural adjustment play what role? They are how to its function?DNA的拓扑异构体之间的转变是通过拓扑异构酶(topoiso

17、merase)来实现的。拓扑异构酶I主要消除负超螺旋,作用一次超螺旋交叉数变化+1;拓扑异构酶II主要引入负超螺旋,作用一次L变化-2。TOPO I催化DNA的单链断裂-再接过程,作用不需ATP;TOPO II催化DNA的双链断裂-再接过程,作用需要ATP提供能量。23.简述复制的起始和引发体形成的过程?该过程中都设计到了哪些蛋白质因子的作用?This copy of the initial and the cause of the formation of the body? The process of design in which the role of protein factor?

18、E.coli DNA复制的起始主要指对其复制起始区(OriC)的识别、以及引发体的形成。OriC包括4个9bp重复序列、3个13bp重复序列,此外还有11个拷贝的甲基化位点序列-GATC。具体步骤如下: a. 结合有ATP的DnaA蛋白四聚体在HU蛋白、整合宿主因子(IHF)的帮助下,识别并结合OriC的9bp重复序列,这种结合具有协同性。协同作用能使更多的DnaA蛋白(2040个)在较短的时间内结合到附近的DNA上。HU是细菌内最丰富的DNA结合蛋白,它与IHF享有共同的性质和相似的结构。但与IHF不同的是,HU与DNA结合是非特异性的,而IHF与DNA特异性的位点结合,特别是OriC。HU

19、能调节IHF与OriC位点的结合,取决于HU和IHF之间的相对浓度,HU可能激活或者抑制IHF与OriC的结合。b. DnaA蛋白之间自组装成蛋白核心,DNA则环绕其上形成类似核小体的结构。c. DnaA蛋白所具有的ATP酶活性水解结合的ATP,以此驱动13bp重复序列内富含AT碱基对的序列解链,形成长约45bp的开放起始复合物。d. 在DnaC蛋白、DnaT蛋白的帮助下,个DnaB蛋白被招募到解链区,形成预引发体(preprisosome)。此过程也需要消耗ATP。e. 在DnaB蛋白的催化下,OriC内的解链区域不断扩大,形成个明显的复制叉。随着单链区域的扩大,SSB开始与单链区结合。f.

20、 个DnaB蛋白各自朝相反的方向催化个复制叉的解链,DnaA蛋白随之被取代下来。g. 在PriA、PriB和PriC蛋白的帮助下,DnaG蛋白(引发酶)被招募到复制叉与DnaB蛋白结合在一起。h. DnaG:DnaB蛋白复合物沿着DNA模板链,先后为前导链和后随链合成RNA引物。24.详细叙述DNA复制的过程。Detail the process of DNA replication见课本具体来说包括起始延伸和终止三个阶段。在DNA复制过程中,首先是原DNA双螺旋的两条多核苷酸链之间的氢键断裂,双链解开并分为两股单链。然后,每条单链DNA各自作为模板,以三磷酸脱氧核糖核苷(dNTP)为原料,按

21、照碱基配对规律(A与T配对,G与C配对),合成新的互补链。这样形成的两个子代DNA分子与原来的亲代DNA分子的核苷酸顺序是完全相同的。在此过程中,每个子代DNA分子的双链,一条链来自亲代DNA,而另一条链则是新合成的。这种复制方式称为半保留复制。由于DNA在代谢上的稳定性和复制的忠实性,经过许多代的复制,DNA分子上的遗传信息仍可准确地传给子代。25.复制过程中,在DNA复制叉上进行了哪些基本活动?涉及哪些酶和蛋白质参与?它们在复制中的功能是什么?The cloning process, in DNA replication forks on the what are the basic ac

22、tivities? In which enzymes and proteins involved in? They are in the replica function is? DnaA蛋白结合复制起点。 DnaB、C等蛋白组装引发前体,然后和引发酶组装引发体。 拓扑异构酶解开负超螺旋。 DNA解链酶(DnaB)解开DNA双螺旋。 SSB蛋白结合稳定单链。 引发酶合成引物。 DNA聚合酶合成新链,切除引物,补齐缺口。 连接酶补齐冈崎片段。 Tus蛋白终止DNA复制。 26.列表比较原核生物和真核生物复制的差异。The list is prokaryotes and eukaryotes co

23、py differences. 真核生物每条染色质上可以有多处复制起始点,原核生物只有一个。 真核生物的染色体全部复制完后才能重新复制,原核生物在一次复制完成前可开始新的复制。 两者使用的DNA聚合酶种类不同。真核生物使用DNA pol、和,原核生物使用DNA pol I、II、III、IV和V。 DNA复制的过程不同。 复制的终止过程不同。 复制存在的空间问题的解决方式不同:原核生物DNA的复制时紧靠在中间体上进行的,而真核生物由于染色体存在骨架因而在骨架上直接进行。 其他区别。27.环状DNA的复制方式有哪些?举例说明Circular DNA replication mode have?

24、For example 型:大肠杆菌基因组 滚环型:噬菌体X174 D环型:动物线粒体基因组28.生物体DNA复制中如何解决末端复制?Biological DNA replication in the end how to solve the copy生物体线性DNA一般为双向等速复制,但存在RNA引物被切除后留下的缺口,最终导致末端缩短问题。若要解决线性DNA复制所遗留的,末端缩短问题,可以有以下策略:a.将线性DNA分子转变为环状或多聚体分子。比如噬菌体的线性基因组,通过末端突出的12bp的cos位点可转变为环状,很好的解决了末端问题。b.在DNA末端形成发夹式结构,是分子没有游离的末端。

25、草履虫的线性DNA就是一个典型的例子。c.在某种蛋白质(如末端蛋白)的介导下,在真正的末端上启动复制。29噬菌体DNA和腺病毒DNA的复制主要依赖于这一机制。d.末端是可变的,而不是精确确定的。真核生物染色体可能采用这种方式,在这种情况下,DNA末端的短重复序列的拷贝数改变(如端粒的复制)。29.DNA复制的调控主要体现在哪些方面?列举说明。DNA replication control mainly reflects in what aspects? That list.DNA复制的调控主要是对复制起始频率的调控。例如大肠杆菌染色体DNA复制起始过程需要复制调节蛋白和复制起点的结合,如果复制

26、调节蛋白基因发生点突变将导致复制停止细胞死亡。30.大肠杆菌素质粒ColE1的复制起始是如何调控的?Escherichia coli quality grain ColE1 replication initial is how to control质粒ColE1的复制为单向复制,先合成500nt的RNA引物,然后先由DNA聚合酶合成,再由DNA聚合酶III代替DNA聚合酶继续合成。ColE1的复制由RNA负调控,而RNA是引物RNA的反义RNA,它的长度为100nt,与引物端的前100nt正好互补。当RNA与引物RNA互补结合以后,引物就不能形成引发复制所必需的三叶草状结构,从而导致引物失活。

27、而同时有一蛋白Rop可以促进两者的相互作用,故而Rop蛋白也可调控ColE1的复制,同为负调控因素。31.DNA的复制是如何终止的?DNA replication is how to end如图,E.coli染色体DNA的复制终止于终止区。终止区存在6个特殊的位点(Ter位点),它们能够显著降低复制叉的移动速度,其作用具有方向特异性,TerF、TerB和TerC作用于一个复制叉,TerE、TerD和TerA作用于另外一个复制叉。Ter位点富含GT,一种被称为“终止区利用物质”的蛋白质-Tus蛋白(terminator utilization substance)能特异性地与它们结合。Tus蛋白

28、能抑制DnaB蛋白的解链酶活性,当它与Ter位点结合以后便阻止了复制叉的前行。因此,当Tus蛋白与位于终止区两侧的Ter位点结合以后,便阻止另一侧的复制叉越过最后的Ter位点。如果一个复制叉先到达Ter位点,它便会减速,以便让另一个复制叉赶上,直至相遇。32.先导链与滞后链如何区分?两者各自是怎样合成的?Pilot chain and lag chain how to distinguish? How is each synthetic?先导链和滞后链是在DNA复制中进行划分的。先导链是子链中连续合成的那条DNA单链,而滞后链是不连续合成的那条DNA单链。先导链直接连续合成,滞后链通过冈崎片段

29、不连续合成。33.滞后链的复制为何需要引发体?Lag chain replication why need to cause body 先导链直接连续合成,滞后链通过冈崎片段不连续合成。34.分析比较三种大肠杆菌DNA聚合酶在性质功能上的异同。Comparative analysis of three kinds of e. coli DNA polymerase in nature the similarities and differences of the function DNA聚合酶即具有核酸外切酶活性,同时也有核酸外切酶活性,故而在DNA复制中主要用于切除冈崎片段5端的RNA引物,

30、并在DNA切除修复中起主要作用。 DNA聚合酶具有35核酸外切酶活性,故在DNA复制过程中起校正作用。 DNA聚合酶具有较高的聚合酶活性,故在DNA复制过程中起合成新链的作用。35.细胞通过哪些修复系统对DNA进行修复?各自有何特点?Cell through which repair system to repair DNA? What is their characteristics? 错配修复通过甲基化保护正确的母链,切除另一条链上错配的一段序列并重新以母链为模板合成。 碱基切除修复先切除突变碱基形成AP位点再移去包括AP位点在内的一段序列并重新合成。 核苷酸切除修复移去包括错误的核苷酸在

31、内的一段序列后重新合成。 直接修复通过直接的化学反应修复而不用切除DNA序列和重新合成 。 SOS修复在应急情况下对DNA进行修复,错误较高。 重组修复通过DNA重组对DNA进行修复,主要在同代互补子代DNA同源片段之间进行,不能彻底修复。36.简单转座子与复合转座子有何区别有何联系?两者的作用特征有何区别。Simple transposons and composite transposons have why to distinguish what is the connection? Both action characteristics have why to distinguish.

32、简单转座子即IS序列,只含有末端反向重复序列和转座酶基因。而是一类带有某些功能基因(抗药性基因或宿主基因)的转座子,其两翼往往是两个相同或高度同源的IS序列。由于都具有反向重复序列而具有相同的转座机制。但复合转座子中的IS序列结构不能独立转录。43.简述转座子的遗传学效应。This transposons genetic effect 1 引起插入突变 2 产生新的基因 3 产生染色体畸变 4 引起生物进化44.对于嘧啶二聚体的修复校正,有哪些途径?For pyrimidine dimer repair correction, what way? 两种途径:可以光复活修复,另外可以切除修复。5

33、3.列举RNA的种类和功能。List the types of RNA and function. mRNA 作为信使指导蛋白质合成 tRNA 作为蛋白质合成中氨基酸的转运工具 rRNA 作为核糖体的组分参与和糖体的组成内阁65.列出真核生物mRNA与原核生物mRNA的区别。List the mRNA eukaryotes and prokaryotes mRNA difference.原核生物mRNA的半衰期短,多以多顺反子形式存在,5端无帽子结构,3端没有或有较短的polyA尾巴。单在原核生物起始密码上游具有能与核糖体16SrRNA3端反向互补的序列,称SD序列。原核生物mRNA的起始密码

34、子有AUG、GUG和UUG三种。真核生物mRNA半衰期相对较长,多以单顺反子形式村子,5端有GTP倒扣形成的帽子结构,3端有较长的polyA尾巴。只有AUG一种起始密码子。66.概括说明因子对启动子调节的辅助功能。Outline factor to adjust the promoter of the auxiliary function.因子是RNA聚合酶的别构效应物,能增加聚合酶对启动子的亲和力,同时降低聚合酶对非启动子区的亲和力。由于同一个聚合酶可以和几种不同因子结合,故可利用选择不同的因子起始不同的基因转录。69.列举原核生物同真核生物转录的差异。List prokaryotes an

35、d eukaryotes transcription differences.1 原核生物转录只有一种RNA聚合酶,真核生物转录根据转录产物不同而由多种RNA聚合酶。2 原核生物的启动子具有极高的同源性,而真核生物的启动子差异较大3 原核生物的转录产物是多顺反子mRNA,而真核生物的转录产物是核不均一RNA,需转录后修饰加工。56.什么是转录起始前复合体? What is the transcription start before complex?在一系列转录因子辅助下RNA聚合酶和启动子结合的复合物。58.概括典型原核生物启动子的结构和功能,并解释什么是保守序列Summarized the

36、 typical prokaryotes promoter of the structure and function, and explain what is conserved sequence 启动子是RNA聚合酶结合和转录起始的特殊序列。典型的原核生物启动子大约40个核苷酸,并由两个重要的序列: 10区,pribnow box,TATA,和35区TTGACA,是RNA聚合酶的结合位点。 保守序列指所有启动子的该部位都有这一序列或十分相似的结构。73.举例说明单链核酸中形成茎环结构的重要性。Illustrate single nucleic acid formed in the impo

37、rtance of stem ring structure.例如,当转录产物结构中形成茎环结构时往往意味着转录的终止。64.真核生物启动子的基本结构包括哪些部分?分别有何功能?Eukaryotic promoters basic structure including which part? How does this function? 真核生物启动子包含核心启动子元件和上游启动子元件两部分。核心启动子元件即TATA box,其功能是使转录精确的起始。上游启动子元件包括CAAT box 和GC box,其功能是控制转录起始的频率。63.增强子是如何增强转录的?Enhancer is how

38、to strengthen the transcription?通过影响染色质DNA蛋白质结构或改变超螺旋密度而改变模板的整体结构,从而使得RNA聚合酶更容易与模板DAN结合,起始基因转录。71.添加PolyA尾巴的信号序列是什么?基因3末端转录终止位点上游1530bp处的保守序列AATAAA75. RNA的加工都包括哪些方面?各自有何意义?RNA processing includes what aspects? Each have he yiyi? 1 加 帽保护RNA免遭核酸酶破坏 2 加尾终止转录,提高RNA稳定性 3 剪接切除内含子以表达断裂基因 4 编辑调整遗传信息,对核酸进行修饰

39、化。 87.起始tRNA具有哪两种与其他 tRNA不同的特性? Initial tRNA has what two and other tRNA different characteristics?1 带有甲酰甲硫氨酸2 唯一一种同30S核糖体亚基mRNA复合物内的密码子AUG起反应的tRNA。94.简述真核与原核细胞中翻译起始的主要区别。主要区别来自mRNA的本质差异以及小亚基与mRNA起始密码子上游区结合的能力。原核细胞mRNA较不稳定且多是多顺反子,在IF3介导下与核糖体小亚基16SrRNA结合。真核细胞需要几种起始因子来帮助mRNA形成起始复合物。一旦结合则核糖体开始相下游搜索直到找到

40、第一个密码子。97.蛋白质有几种转运机制?各有什么特点?There are several kinds of transport mechanism of protein? The what are the characteristics? 蛋白质转运分翻译同步转运和翻译后转运两种基本机制。 1 蛋白质翻译同步转运机制主要是转运分泌蛋白。其基本特点是在翻译还没有结束、蛋白质还没有脱离核糖体时,蛋白质N端的信号肽指导蛋白质通过结合膜上受体而穿膜运输。 2 蛋白质翻译后转运机制主要是细胞器蛋白质。起基本特点是在翻译完成后靠分子伴侣进行正确折叠后与膜上受体结合并穿膜运输。92.核糖体上有哪些重要的活

41、性位点?各自有何功能?Ribosomes are there any important active site? What is their function?1 mRNA结合部位2 A位氨酰tRNA结合部位3 P位肽酰tRNA结合部位4 E位去氨酰tRNA结合部位5 转肽酶中心99.你是如何理解信号肽学说的?How do you understand the signal peptide theory该学说认为,当细胞合成分泌蛋白时,首先由信号密码翻译出一段肽链,叫信号肽,信号肽可被SRP识别并结合,此时蛋白质合成暂停。在SRP的中介作用下,核糖体结合在内质网膜上,新合成的肽链进入内质网腔

42、,SRP离去,此时蛋白质合成恢复进行,在内质网腔内,信号肽被切去,但与之相连的肽链继续进入内质网腔内,直到合成完整的多肽为止。100.蛋白质合成后加工都包括哪些方面?Protein synthesis post processing includes what aspects?删、增、修、切107 现代分子生物学的三大主要成就是什么?Modern molecular biology of the three main achievement is? 20世纪确定了遗传物质的携带者、即基因的分子载体是DNA而不是蛋白质. 50年代提出DNA分子的双螺旋模型和半保留复制机制,解决了基因的自我复制和

43、世代交替问题。 5060年代相继提出中心法则和操纵子学说,成功破译了遗传密码,阐明了遗传信息的流动与表达机制。108重组DNA技术的含义是什么?Recombinant DNA technology means? DNA重组技术又名基因工程,是指将不同的DNA片段(如某个基因或基因的一部分)按照人们的设计定向连接起来,在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达,产生影响受体细胞的新的遗传性状。严格地说,DNA重组技术并不完全等于基因工程,因为后者还包括其他可能使生物细胞基因组结构得到改造的体系。DNA重组技术是核酸化学、蛋白质化学、酶工程等学科及微生物学、遗传学、细胞学长期深入研究的结晶,而限制

44、性内切酶、连接酶及其他工具酶的发现与应用则是这一技术得以建立的关键。110什么是细菌转化?细菌转化的常用方法有那些?What is the bacterial transformation? The transformation of bacteria commonly used method have those所谓细菌转化,就是指一种细菌菌株由于扑获了来自于另外一种细菌菌株的DNA而导致形状特发生遗传该的生命过程。提供转化DNA的菌株叫做供体菌株,接受转化DNA细菌被称为受体菌株。目前常用的细菌转化方法有CaCl2法(化学转化法)和电转化法。111 什么是PCR技术?PCR的基本原理是什么

45、?What is the PCR technology? The basic principle of PCR isPCR即聚合酶链式反应,是一种在体外快速扩增特定目的基因或DNA序列的技术,故又称基因的体外扩增技术。它可以在试管中建立反应,经过数小时之后,就能将极微量的目的基因或DNA片断扩增数十万乃至千百万倍,无需经过繁琐费时的基因克隆程序,便可获得足够数到两精确的DNA拷贝。PCR的基本工作原理:以拟扩增的DNA分子为模板,以一对分别与模板5'末端和3'末端相互补的寡核苷酸片段为引物,在DNA聚合酶的作用下,按照半保留复制的机制沿着模板链延伸直至完成新的DNA合成,重复这

46、一过程,即可使目的DNA片段得到扩增。112什么是基因敲除技术?What is a knockout technology基因敲除技术又称基因打靶,指通过外源DNA与染色体DNA之间的同源重组,对染色体进行定点修饰和基因的改造的一种基因工程技术。它具有专一性强、染色体DNA可与目的基因共同稳定遗传等特点。113什么是基因文库?什么是cDNA文库?What is a gene library? What is the c - DNA library用DNA重组技术将某种生物的总DNA用特定的限制性内切酶切割成一个个片段,然后将这些片段随机地连接在某些质粒或其他载体上,再将它们转移到适当的宿主细胞

47、中,通过细胞的增殖而构成各个片段的无性繁殖系(克隆),当这些克隆多到可以包括某种生物的全部基因时,这一批克隆的总体就称为该种生物的基因文库。 把一个细胞中某以时刻所有mRNA为模板,反转录合成它们的互补DNA(cDNA)。然后所有的cDNA克隆至大量载体上导入大量细菌,而得到的一个cDNA集合体,就称为cDNA文库。114什么是基因芯片?What is gene chip?基因芯片(又称 DNA 芯片),系指将大量(通常每平方厘米点阵密度高于400)探针DNA分子固定于支持物上后与标记的样品分子进行杂交,通过检测每个探针DNA分子的杂交信号强度进而获取样品分子的数量和序列信息。120简述乳糖操

48、纵子的正负调控机制This lac operon positive and negative regulation mechanism乳糖操纵子的功能是在阻遏基因的负调控和cAMP-CRP系统的正调控两个独立的调控机制下实现的。 1 在乳糖浓度低时,阻遏基因的产物阻遏蛋白结合在操纵基因上所形成的构象使其下游的结构基因无法转录。在乳糖浓度高时,乳糖作为诱导分子结合阻遏蛋白改变其三维构象使之不能与操纵基因结合,从而激发结构基因的表达。 2 cAMP-CRP复合体系结合在操纵子的启动子区域上是操纵子转录的必需条件,与阻遏系统无关。当培养基中有葡萄糖存在时,葡萄糖通过抑制腺苷酸环化酶活性而降低cAMP

49、浓度来抑制结构基因的表达,达到优先利用葡萄糖的目的。121简述色氨酸操纵子的调控机制This tryptophan operon control mechanism色氨酸操纵子受到弱化机制和负控阻遏机制的双重作用。1在色氨酸高浓度时,色氨酸作为阻遏分子结合并促使其与操纵基因紧密结合,结构基因不能表达。当色氨酸浓度低时,阻遏蛋白失去色氨酸并从操纵基因上解离,则操纵子去阻遏。2 由于色氨酸操纵子前导序列中含有色氨酸密码子,当前导肽合成因为色氨酸浓度高而顺利进行时,trp mRNA处于终止子构象,其结构基因不表达。当前导肽合成因为色氨酸浓度低而停止时,trp mRNA形成抗终止子构象,其结构基因得到

50、表达。122正负调控有何区别? Positive and negative control have why to distinguish? 负调控时,调节基因的蛋白产物是基因活性的一种抑制剂;而在正调控时,调节基因的蛋白产物是基因活性的一种激活物。123区别可诱导和可阻遏的基因调控。Difference can be induced and repression gene regulation.1 可诱导的基因调控指操纵子只有在诱导物存在时才开放。诱导物常是操纵子表达产物的底物或底物的类似物。2 可阻遏的基因调控指操纵子会被阻遏物关闭。阻遏物常是由操纵子表达的代谢酶类催化的代谢途径的最终代谢

51、产物。129 RecA蛋白是怎样调节 SOS反应的? RecA protein is how to adjust SOS response? RecA蛋白识别损伤DNA,引起LexA蛋白的自身催化切割。LexA蛋白的失活可除去大批操纵子上的阻遏蛋白,使之表达参与DNA修复的蛋白质。130大肠杆菌色氨酸操纵子具有双重调控机制意义何在?Escherichia coli tryptophan operon has double meaning of regulation and control mechanism 弱化作用和负控阻遏对色氨酸操纵子的双重调控时大肠杆菌对环境中的色氨酸浓度能做出灵敏迅速

52、的反应。当色氨酸浓度较低时弱化子能快速的通过抗终止来增加结构基因的表达,而此时阻遏系统从有活性状态转变为无活性状态速度较慢;当色氨酸浓度高时通过阻遏系统抑制结构基因的表达,阻止非必需的前导mRNA合成,使调控更加经济。131半乳糖操纵子具有双启动子的生理意义是什么?Gal operon has double promoter physical meaning 大肠杆菌利用葡萄糖作为能源最为经济,但也需要操纵子表达产物之一半乳糖差向异构酶构建细菌细胞壁。半乳糖操纵子有S1、S2两个启动子可以启动其结构基因的表达。S1起始的转录受cAMP-CRP正控,只能在无葡萄糖时顺利进行;S2起始的转录则完全

53、依赖葡萄糖。故当外源葡萄糖浓度很高时,S1表现葡萄糖效应抑制结构基因表达但有不依赖cAMP-CRP的S2启动本底水平表达以满足构建细胞壁的需要。当外源葡萄糖浓度很低时,S2受到抑制但S1启动结构基因的高水平表达。通过双启动子机制调控可以合理经济地半乳糖操纵子的表达。132什么是魔斑核苷酸?魔斑核苷酸在原核生物基因表达调控过程中起到了什么作用?What is the spot nucleotide? The spot nucleotide in prokaryotes gene expression regulation process played a function?细菌遇到氨基酸全面缺乏

54、时产生一个应急反应以停止大量基因的表达。产生这一应急反应的信号是鸟苷四磷酸(ppGpp)和鸟苷五磷酸(pppGpp)。因PpGpp与pppGpp的作用不只是一个或几个操纵子,而是影响大批操纵子,故称为超级调控子。又因其电泳的迁移率和一般的核酸不同称为魔斑核苷酸。133在遗传信息传递过程中,哪些环节都可以对基因表达进行调节?In genetic information transfer process, which links can be adjusted to gene expression?在遗传信息传递过程中几乎所有的环节都可以对基因表达进行调节。一般有以下几个方面; 1 DNA水平上的

55、调控:包括染色体的活性构象和DNA复制水平上的调节 2 转录水平调控 3 转录后加工水平调控 4 翻译水平调控135比较说明原核生物与真核生物在基因表达水平上的异同。Compared prokaryotes and eukaryotes gene expression level in the similarities and differences 真核生物和原核生物在基因表达调控上的巨大差别是由两者基本生活方式不同所决定的。 原核生物主要通过转录调控以开启或关闭某些基因来适应环境条件尤其是营养水平的变化。真核生物基因调控范围更加宽广,并能在特定时间和特定细胞中激活特定的基因从而实现预定的、

56、有序的、不可逆转的分化、发育过程,并使生物的组织和器官保持正常功能。136何谓断裂基因( split gene)?何谓重叠基因( overlapping gene)?它们在生物进化与适应上有何意义? What is the fracture gene (split gene)? What is the overlap gene (overlapping gene)? They are in biological evolution and to adapt have he yiyi?重叠基因是一段能够携带多种不同蛋白质信息的DNA片段。原核生物多含重叠基因,可以保持其基因组结构的经济性,在一定的空间范围内尽可能多的表现生命功能。断裂基因是在DNA分子的结构基因内既含有能转录翻译的片段,也含有不转录翻译的片段。真核生物多含

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