JC整理细胞生物学复习完整版

1、细胞生物学第一章 历史与展望细胞生物学研究细胞的结构、功能和生活史。当代生物科学四大基础学科:细胞,分子,神经生物学和生态学1.细胞生物学的研究内容分三个层次：1）显微水平，光学显微镜下可见的结构。2）超微水平，电子显微镜下可见的结构。3）分子水平，细胞结构的分子组成，及其在生命活动中的作用。2.细胞的发现:1590年J. 和Z. Janssen父子制作第一台复式显微镜，放大倍数不超过10倍。1665年英国人Robert Hooke出版显微图谱。观察了软木，并首次用cells来描述“细胞”。1831年R. Brown在兰科植物表皮细胞内发现了细胞核。1836年GG. Valentin在动物神经

2、细胞中发现了细胞核与核仁。3.细胞学说 Cell Theory通常认为施莱登（MJ. Schleiden）和施旺（T. Schwann）正式提出了细胞学说。1838年Schleiden发表“植物发生论” ;Schwann提出了“细胞学说”（Cell Theory) ；1939年发表了“关于动植物结构和生长一致性的显微研究”。4.细胞超微结构研究:1932年德国人E. Ruska和M. Knoll发明透射电镜,Cytology发展为Cell Biology。5.分子细胞生物学时代:1953年，JD. Watson 和FHC. Crick提出DNA双螺旋模型。与Wilkins分享1962 年诺贝尔

3、生理学与医学奖 。1958 年Crick 提出分子遗传的“中心法则”。1961-1964年Nirenberg 等破译遗传密码。国家科技图书文献中心（NSTL） EBSCOhost外文全文数据库 Springer外文电子期刊第二章细胞生物学实验技术光学显微镜：以可见光（或紫外线）为光源。电子显微镜：以电子束为光源。1.光学显微镜:（1）普通光学显微镜: 构成： 照明系统 光学放大系统 机械装置（2）荧光显微镜（3）激光共聚焦扫描显微境 LCSM（4）暗视野显微镜（5）相差显微镜（6）偏光显微镜（7）微分干涉差显微镜（DIC）（8）倒置显微镜2.电子显微镜（1）透射电子显微镜TEM（2）扫描电子显

4、微镜（3）扫描隧道显微镜1）超薄切片：用于电镜观察的标本须制成厚度仅50nm的超薄切片，用超薄切片机制作。通常以锇酸和戊二醛固定样品，丙酮逐级脱水，环氧树脂包埋，以热膨胀或螺旋推进的方式切片，重金属（铀、铅）盐染色。2）负染技术：用重金属盐(如磷钨酸) 染色；吸去染料干燥后，样品凹陷处铺了一层重金属盐，而凸的出地方没有染料沉积，从而出现负染效果，分辨力可达1.5nm左右。3）冰冻蚀刻 freeze-etching：亦称冰冻断裂。标本置于干冰或液氮中冰冻。然后断开，升温后，冰升华，暴露断面结构。向断面喷涂一层蒸汽碳和铂。然后将组织溶掉，把碳和铂的膜剥下来，此膜即为复膜（replica）断面的三种

5、处理方法：蚀刻、不蚀刻、深度蚀刻3.显微操作技术:是在倒置显微镜下利用显微操作器进行细胞或早期胚胎操作的一种方法。包括细胞核移植、显微注射、嵌合体技术、胚胎移植以及显微切割等。第三章 细胞培养与细胞杂交1.细胞培养技术（cell culture）是指细胞的体外培养。即在无菌条件下，把动物和植物的细胞从有机体分离出来，在模拟体内的环境中，给以营养物质，使细胞不断生长，繁殖或传代，借以观察细胞生长，分裂以及细胞衰老，死亡等生命现象。 2.细胞株（cell strain）：从原代培养细胞群中筛选出的具有特定性质或标志的细胞群，能够繁殖50代左右，在培养过程中其特征始终保持。 3.

6、细胞系（cell line）：从肿瘤组织培养建立的细胞群或培养过程中发生突变或转化的细胞，在培养条件下可无限繁殖  4.克隆（clone）：亦称无性繁殖系或简称无性系。对细胞来说，克隆是指由同一个祖先细胞通过有丝分裂产生的遗传性状一致的细胞群。 5.动物细胞培养：细胞培养方式大致可分为两种:群体培养（mass culture）、克隆培养（clonal culture）群体培养：将含有一定数量细胞的悬液置于培养瓶中，让细胞贴壁生长，汇合后形成均匀的单细胞层。 6.细胞融合：通过培养和诱导，两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程称为细胞融（cell&#

7、160;fusion）或细胞杂交（cell hybridization）。 7.基因型相同的细胞融合成的杂交细胞称为同核体（homokaryon）；来自不同基因型的杂交细胞则称为异核体（heterokaryon）。 8.同种细胞在培养时2个靠在一起的细胞自发合并，称自发融合；异种间的细胞必须经诱导剂处理才能融合，称诱发融合。 9.诱导细胞融合的方法：生物方法（病毒）、化学方法（聚乙二醇PEG）、物理方法（电激和激光）。某些病毒如：仙台病毒、副流感病毒和新城疫鸡瘟病毒的被膜中有融合蛋白（fusion protein），可介导病毒同宿主细胞融合，也可介导细胞与细胞的融合，因此可

8、以用紫外线灭活的此类病毒诱导细胞融合。化学和物理方法可造成膜脂分子排列的改变，去掉作用因素之后，质膜恢复原有的有序结构，在恢复过程中便可诱导相接触的细胞发生融合。 第四章 生物化学与分子生物学技术1.细胞化学技术：组织化学或细胞化学染色（histochemical or cytochemical staining）是利用染色剂可同细胞的某种成分发生反应而着色的原理，对某种成分进行定性或定位研究的技术。利用这种方法对细胞的各种成分几乎都能显示，包括有无机物、醛、蛋白质、糖类、脂类、核酸、酶等。2.固定物理固定：血膜空气快速干燥、冷冻干燥。化学固定。3.显示方法：金属

9、沉淀法Schiff反应联苯胺反应脂溶染色法茚三酮反应4.免疫细胞化学（immunocytochemistry）是根据免疫学原理，利用抗体同特定抗原专一结合，对抗原进行定位测定的技术。抗原主要为大分子或与大分子相结合的小分子；抗体则是由浆细胞针对特定的抗原分泌的球蛋白。如果将抗体结合上标记物，再与组织中的抗原发生反应，即可在光镜或电镜下显示出该抗原存在于组织中的部位。 常用的标记物有荧光素和酶：免疫荧光法、酶标免疫法。 5.显微光谱分析技术:细胞中有一些成分具有特定的吸收光谱，核酸、蛋白质、细胞色素、维生素等都有自己特征性的吸收曲线。有的成分经组织化学染色后，对可见光有特定的吸收光谱。根据细胞成

10、分所具有的这种特性，可利用显微分光光度计对某些成分进行定位、定性，甚至定量测定。 6.放射自显影术:用于研究标记化合物在机体、组织和细胞中的分布、定位、排出以及合成、更新、作用机理、作用部位等等。原理：将放射性同位素标记的化合物导入生物体内，经过一段时间后，制取切片，涂上卤化银乳胶，经放射性曝光，使乳胶感光。这种技术与电镜样品处理，则为电镜放射自显影。 7.杂交技术：具有互补核苷酸序列的两条单链核苷酸分子片段，在适当条件下，通过氢键结合，形成DNA-DNA，DNA-RNA或RNA-RNA杂交的双链分子。这种技术可用来测定单链分子核苷酸序列间是否具有互补关系。（1）原位杂交（in situ hy

11、bridization）：用于检测染色体上的特殊DNA序列。最初是使用放射性DNA探针，后来又发明了免疫探针法。（2）Nouthern杂交：是体外分析特异DNA序列的方法，操作时先用限制性内切酶将核DNA或线粒体DNA切成DNA片段，经凝胶电泳分离后，转移到醋酸纤维薄膜上，再用探针杂交，通过放射自显影，即可辨认出与探针互补的特殊核苷序列将RNA转移到薄膜上，用探针杂交，则称为Northern杂交。8.PCR 技术PCR即：polymerase chain reaction。反应体系：样品DNA；引物（primer），约15-20个核苷酸；4种dNTP；Tag DNA聚合酶，最适作用温度7580

12、，短时间在95下不失活。缓冲体系和Mg2+。反应过程：变性：94；退火4565；延伸：72；重复 “变性退火延伸” 过程20-30次循环。9.离心技术是分离细胞器及各种大分子基本手段。转速为1025kr/min的离心机称为高速离心机。转速>25kr/min，离心力>89K者称为超速离心机。超速离心机的最高转速可达100000r/min，离心力超过500Kg。 （1）差速离心 Differential centrifugation特点：介质密度均一；速度由低向高，逐级离心。用途：分离大小相差悬殊的细胞和细胞器。沉降顺序：核线粒体溶酶体与过氧化物酶体内质网与高基体核蛋白体。可将细胞器初

13、步分离，常需进一步通过密度梯度离心再行分离纯化。 （2）密度梯度离心：用介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度，将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部，通过离心力场的作用使细胞和细胞成分分层、分离。类型：速度沉降、等密度沉降。常用介质：氯化铯、蔗糖、多聚蔗糖。分离活细胞的介质要求：1）能产生密度梯度，且密度高时，粘度不高；2）PH中性或易调为中性；3）浓度大时渗透压不大；4）对细胞无毒。10.流式细胞术：用途：对单个细胞进行快速定量分析与分选的一门技术包被细胞的液流称为鞘液，所用仪器称为流式细胞计11.细胞电泳：原理：在一定PH值下细胞表面带有净的正或负电荷，能在外加电场的作用下发生泳动。各种细

14、胞或处于不同生理状态的同种细胞荷电量有所不同，故在一定的电场中的泳动速度不同 。用途：检测细胞生理状态、分离不同种类的细胞。第五章 细胞（质）膜及表面结构1.质膜（plasma membrane）包在细胞外面所以又称细胞膜。围绕各种细胞器的膜，称为细胞内膜。质膜和内膜在起源、结构和化学组成的等方面具有相似性，故总称为生物膜（biomembrane）。生物膜是细胞进行生命活动的重要物质基础。质膜表面寡糖链形成细胞外被（cell coat）或糖萼（glycocalyx）。质膜下的表层溶胶中具有细胞骨架成分组成的网络结构，除对质膜有支持作用外，还与维持质膜的功能有关，所以这部分细胞骨架又称为膜骨架。

15、细胞外被、质膜和表层胞质溶胶构成细胞表面。2.膜脂主要包括磷脂、糖脂和胆固醇三种类型:（1）磷脂（2）鞘磷脂（sphingomyelin，SM）在脑和神经细胞膜中特别丰富。原核细胞、植物中没有鞘磷脂。（3）糖脂：最简单的糖脂是半乳糖脑苷脂，在髓鞘的多层膜中含量丰富；变化最多、最复杂的糖脂是神经节苷脂(p43)，神经节苷脂是神经元质膜中具有特征性的成分。（4）胆固醇：主要存在真核细胞膜上，其功能是提高双脂层的力学稳定性，调节双脂层流动性，降低水溶性物质的通透性。（5）脂质体（liposome）：是一种人工膜。人工脂质体可用于：转基因 制备的药物 研究生物膜的特性3.膜蛋白：是膜功能的主要体现者。

16、根据膜蛋白与脂分子的结合方式，可分为：整合蛋白（integral protein）/膜内在蛋白,外周蛋白（peripheral protein）,脂锚定蛋白（lipid-anchored protein）脂锚定蛋白可以分为两类：糖磷脂酰肌醇连接的蛋白;另一类脂锚定蛋白与插入质膜内小叶的长碳氢链结合。 4.质膜的流动镶嵌模型根据Fluid-mosaic model：细胞膜由流动的双脂层和嵌在其中的蛋白质组成。磷脂分子以疏水性尾部相对，极性头部朝向水相组成生物膜骨架；蛋白质或嵌在双脂层表面，或嵌在其内部，或横跨整个双脂层，表现出分布的不对称性。5.质膜的流动性：由膜脂和蛋白质的分子运动两个方面组成

17、。（1）膜脂分子的运动:侧向扩散运动：同一平面上相邻的脂分子交换位置。旋转运动：围绕与膜平面垂直的轴进行快速旋转。摆动运动：围绕与膜平面垂直的轴进行左右摆动。伸缩震荡运动：脂肪酸链进行伸缩震荡运动。翻转运动：膜脂分子从脂双层的一层翻转到另一层。旋转异构化运动：脂肪酸链围绕C-C键旋转。（2）影响膜脂流动性的因素胆固醇：胆固醇的含量增加会降低膜的流动性。脂肪酸链的饱和度：脂肪酸链所含双键越多越不饱和，使膜流动性增加。脂肪酸链的链长：长链脂肪酸相变温度高，膜流动性降低。卵磷脂/鞘磷脂：该比例高则膜流动性增加，是因为鞘磷脂粘度高于卵磷脂(5-6倍)。其他因素：温度、酸碱度、离子强度等。（3）膜蛋白的

18、分子运动：主要有侧向扩散和旋转扩散两种运动方式。6.膜流动性的生理意义：质膜的流动性是保证其正常功能的必要条件.当膜的流动性低于一定的阈值时,许多酶的活动和跨膜运输将停止,反之如果流动性过高,又会造成膜的溶解.利用细胞融合技术观察蛋白质运动. 7.膜的不对称性:质膜内外两层的组分和功能的差异，称为膜的不对称性。膜脂的不对称性：同一种脂分子在脂双层中呈不均匀分布。膜脂的不对称性还表现在膜表面具有胆固醇和鞘磷脂等形成的微结构域脂筏。复合糖的不对称性：糖脂和糖蛋白只分布于细胞膜的外表面。 膜蛋白的不对称性：每种膜蛋白分子在细胞膜上都具有特定的方向性和分布的区域性。8.脂筏lipid raft:富含胆

19、固醇和鞘磷脂的微结构域（microdomain）。9.细胞表面的特化结构如：膜骨架、鞭毛和纤毛、微绒毛及细胞的变形足等等，分别与细胞形态的维持、细胞运动、细胞的物质交换等功能有关。10.细胞外被:动物细胞表面的一层富含糖类物质的结构，称为细胞外被或糖萼作用：保护，细胞通信，并与细胞表面的抗原性有关。11.膜骨架-作用：维持质膜的形状并协助质膜完成多种生理功能。成熟的哺乳动物血红细胞没有核和内膜系统，是研究膜骨架的理想材料。红细胞经低渗处理，细胞破裂释放出内容物，留下一个保持原形的空壳，称为血影（ghost）。12.经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析，血影成分主要有：血影蛋白锚蛋白带三蛋白血型糖蛋

20、白13.质膜的特化结构:质膜常带有许多特化的附属结构。如：微绒毛、褶皱、纤毛、鞭毛等等第六章 细胞骨架1.真核细胞核有核骨架核纤层体系:广义包括细胞质骨架，细胞核骨架，细胞膜骨架和细胞外基质.狭义指细胞质骨架，指通过整个细胞质基质的微丝（microfilament）微管（microtubule）和中间纤维（intemediate filament）相互连接，构成的复杂的纤维网络结构.均由单体蛋白以较弱的非共价键结合在一起，构成纤维型多聚体微丝确定细胞表面特征，使细胞能够运动和收缩微管确定膜性细胞器的位置和作为膜泡运输的导轨中间纤维使细胞具有张力和抗剪切力 2.微丝 microfilament

21、, MF又称肌动蛋白纤维actin filament，是由球形具有极性的肌动蛋白（Gactin）单体形成的多聚体螺旋。3.微丝的装配溶液中ATP-肌动蛋白的浓度处于临界浓度时，ATP-肌动蛋白在(+)端添加，而从(-)端分离，表现出 “踏车”现象（tread milling）。细胞松弛素（cytochalasin）可切断微丝纤维，并结合在微丝末端抑制肌动蛋白加合到微丝纤维上，特异性的抑制微丝功能。鬼笔环肽（phalloidin）与微丝能够特异性的结合，使微丝纤维稳定而抑制其解聚功能。荧光标记的鬼笔环肽可特异性的显示微丝。 4.微丝结合蛋白分为以下类型：1.核化蛋白单体2.封端蛋白3.单体聚合蛋

22、白4.微丝解聚蛋白5.交联蛋白6.纤维切断蛋白7.膜结合蛋白8.隐蔽蛋白 5.肌肉的组成:由肌原纤维组成，肌原纤维包括粗肌丝和细肌丝，粗肌丝主要成分是肌球蛋白，细肌丝的主要成分是肌动蛋白、原肌球蛋白和肌钙蛋白。肌肉收缩的基本单位是肌小节（sarcomere）。肌小节是相邻两Z线间的单位.肌球蛋白（myosin）属于马达蛋白，趋向微丝的（+）极。（1）原肌球蛋白（tropomyosin.Tm）主要作用是加强和稳定肌动蛋白丝，抑制肌动蛋白与肌球蛋白结合。（2）肌钙蛋白（troponin,Tn）主要作用是调节肌肉收缩.（3）肌肉的收缩 6.微丝的功能:微丝除参与形成肌原纤维外还具有以下功能：1形成应

23、力纤维（stress fiber）：结构类似肌原纤维，使细胞具有抗剪切力。2形成微绒毛。3细胞的变形运动。 4. 胞质分裂；5. 顶体反应；6. 其他功能：抑制微丝的药物（细胞松弛素）可增强膜的流动、破坏胞质环流.7.微管Microtubule, MT:微管在胞质中形成网络结构，作为运输路轨并起支撑作用。微管是由微管蛋白组成的管状结构，对低温、高压和秋水仙素敏感。微管和微丝一样具有踏车行为。秋水仙素、长春花碱抑制微管装配。紫杉酚能促进微管的装配, 并使已形成的微管稳定。8.微管组织中心microtubule organizing center, MTOCs中心体由两个相互垂直的中心粒构成。周围

24、是一些无定形物质，叫做外中心粒物质（PCM）。中心粒由9组3联微管构成，具有召集PCM的作用。9.微管的功能:支架作用纤毛与鞭毛运动基粒和中心粒形成纺锤体10.中间纤维intermediate filaments，IF:IF是最稳定的细胞骨架成分，主要起支撑作用。IF在细胞中围绕着细胞核分布，成束成网，并扩展到细胞质膜，与质膜相连结。11.IF类 型:（1）角蛋白（2）结蛋白又称骨骼蛋白，存在于肌细胞中，主要功能是使肌纤维连在一起。（3）神经胶质纤维:起支撑作用。（4）波形纤维蛋白（5）神经元纤维蛋白12.IF特点： IF没有极性；无动态蛋白库；装配与温度和蛋白浓度无关；不需要ATP、GTP或

25、结合蛋白的辅助。13.IF的结合蛋白IFAP:一类在结构和功能上与中间纤维有密切联系，但其本身不是中间纤维结构组分的蛋白质。功能：使中间纤维交联成束、成网，把中间纤维交联到质膜或其它骨架成分上第七章 细胞增值及其调控1.由细胞分裂结束开始，经过物质积累过程，直到下一次细胞分裂结束所经历的循环过程，叫细胞周期。分为4个期：G1期S期G2期M期又称D期.2. 细胞同步化(synchronization)是指在自然过程中发生或经人为处理造成的细胞周期同步化.(1）自然同步化(2）人工同步化:1)选择同步化:有丝分裂选择法细胞沉降分离法2)诱导同步化:DNA合成阻断法中期阻断法3.减数分裂的类型:配子

26、减数分裂或称终端减数分裂:存在于一般动物中，是卵子和精子发生过程的一部分;合子减数分裂或始端减数分裂:存在于原生生物和真菌中孢子减数分裂或称中间减数分裂:存在于高等植物和一些藻类中4.减数分裂的特殊过程主要发生在前期I ，通常分为5个时期：细线期（leptotene ），偶线期（zygotene ），粗线期（pachytene），双线期（diplotene），终变期（diakinesis）。5.联会复合体(synaptonemal complex， SC）:SC由两条同源染色体沿纵轴形成，外观呈梯子状。SC帮助交换的完成，SC上有重组节(recombination nodules)，是交换发生

27、的部位。SC主要由碱性蛋白质和RNA组成，并含有少量DNA。SC形成合线期，成熟于粗线期，消失于双线期。在细线期或合线期加入DNA合成抑制剂，则抑制SC的形成。CDC2与细胞周期蛋白结合才具有激酶的活性，故名细胞周期蛋白依赖性激酶CDC2又被称为CDK1，可将特定蛋白磷酸化，促进细胞周期运行，又称作细胞周期引擎。如将核纤层蛋白磷酸化导致核纤层解体、核膜消失;将H1磷酸化导致染色体的凝缩等。6.细胞周期检验点ATM（ataxia telangiectasia-mutated gene）编码一个蛋白激酶，结合在损伤的DNA上，其信号通路有两条。激活Chk1（checkpoint kinase）,

28、使CDC25的Ser216磷酸化失去活性，抑制M-CDK的活性，中断细胞周期。激活Chk2，使P53被磷酸化而激活，然后P53作为转录因子，导致P21的表达，P21抑制G1-S期CDK的活性，中断细胞周期。第八章细胞核与染色体、核糖体1.细胞核结构：核被膜核仁染色质 核骨架。功能：遗传信息的储存场所，在这里进行基因复制、转录和转录初产物的加工过程，从而控制细胞的遗传和代谢活动 2.核被膜Nuclear envelope构成：内核膜（外核膜核周间隙（perinuclear space）或核周池核被膜是双层膜结构核被膜是双层膜结构3.核纤层是位于内核膜的内表面的纤维网络由核纤肽（lamin）构成，

29、核纤肽是一类中间纤维。作用：1.可支持核膜，保持核的形态和稳定性2.提供了染色质和核被膜之间的连接3.通过磷酸化和去磷酸化参与染色质和核的组装，核纤层在细胞分裂时呈现出周期性的变化4.核孔复合体Nuclear pore complex（NPC）：NPC主要由核孔蛋白（nucleoporin，Nup）构成，NPC主要由胞质环、核质环、辐和栓构成5.NPC的功能：核质交换的双向选择性通道；NPC是一个双功能、双向性的亲水性核质交换通道；双功能表现在它有两种运输方式：被动扩散和主动运输；双向性表现在既介导蛋白质的入核转运又介导PNA、核蛋白（RNP）的出核转运6.染色质DNA：（1）3种序列：单一序

30、列；中度重复序列（1015）；高度重复序列（>105）。（2）3种构像：B-DNA、Z-DNA、A-DNA。(3)3种基本元素：自主复制序列(ARS)，是DNA复制的起点。着丝粒序列(CEN) ，含卫星DNA。端粒序列(TEL)。酵母人工染色体(YAC )：含上述3种成分，用于转基因。7.非组蛋白功能：帮助DNA折叠；协助DNA复制；调节基因表达。8.核小体（nucleosome）:一种串珠状结构,由核心颗粒和连结线DNA两部分组成. 9.间期核中染色质可分为异染色质和常染色质。异染色质的特点：在间期核中处于凝缩状态，无转录活性、是遗传惰性区。在细胞周期中表现为晚复制、早凝缩（异固缩现象

31、）。分为两类：结构（恒定）异染色质、兼性（功能）异染色质10.巴氏小体（barr body）。雌性哺乳动物细胞中一条异固缩化的X染色体。人的胚胎发育到16天以后， 出现巴氏小体。11.着丝粒（centromere）和着丝点（kinetochore）是两个不同的概念，前者指中期染色单体相互联系在一起的特殊部位，后者指主缢痕处两个染色单体外侧与纺锤体微管连接的部位。12.着丝粒包含3个结构域:1、着丝点结构域位2、中央结构域3、配对结构域13.核型与带型:核型：即细胞分裂中期染色体特征的总和。包括染色体的数目、大小和形态特征等方面。带型：染色体经物理、化学因素处理后，再进行分化染色，使其呈现特定的

32、深浅不同带纹（band）的方法。分带技术可分为两类：一类是产生的染色带分布在整个染色体的长度上；另一类是局部性的显带14.核仁（nucleolus）主要功能是转录rRNA和组装核糖体单位。核仁在分裂前期消失，分裂末期又重新出现。核仁形态：纤维中心(fibrillar centers，FC)：致密纤维组分(dense fibrillar component，DFC)颗粒组分(granular component，GC) 15.核糖体的结构：含40%的蛋白质、60%的RNA，由两个亚单体构成。分为70S和80S两种类型。由大小两个亚基构成，只在以mRNA为模板合成蛋白质时才结合在一起，肽链合成终止

33、后，大小亚单位又解离。核糖体并不是单独工作的，而是由多个甚至几十个串连在一条mRNA分子上，称多聚核糖体。16.核骨架nucleoskeleton核基质（nuclear matrix ）或称核骨架，为真核细胞核内的网络结构，是指除核被膜、染色质、核纤层及核仁以外的核内网架体系。17.核基质的组成：非组蛋白性纤维蛋白，10多种次要蛋白质，包括肌动蛋白和波形蛋白，后者构成核骨架的外罩。核骨架碎片中还存在三种支架蛋白（scaffold proteins，SC、SC、SC)，SC则是DNA拓朴异构酶。少量RNA（占0.5%）和DNA(占0.8%，即：MAR) 。少量磷脂（1.6%）和糖类（0.9%）。

34、18.核骨架的功能：1. 为DNA的复制提供支架2. 是基因转录加工的场所有RNA聚合酶的结合位点，RNA的合成在核骨架上进行。3. 与染色体构建有关1.细胞连接 cell junction是细胞与细胞间或细胞与细胞外基质间的联结结构。分为三大类，即：封闭连接（occluding junction）、锚定连接（anchoring junction）和通讯连接（communicating junction）。 2.封闭连接：存在于脊椎动物的上皮细胞间。连接区域具有蛋白质焊接线，也称嵴线，由跨膜细胞粘附分子构成。主要作用：封闭相邻细胞间的接缝，防止溶液中的分子沿细胞间隙渗入体内，构成脑血屏障和睾血

35、屏障。3. 锚定连接：（1）粘合带与粘合斑：粘合带（adhesion belt） ：呈带状环绕细胞，位于紧密连接下方。相邻细胞间的粘合分子为E-钙粘素。质膜内侧有多种附着蛋白形成的致密斑。连接的细胞骨架成分为actin(肌动蛋白)。粘合斑（adhesion plaque）：位于细胞与细胞外基质间，粘附分子为integrin（整合蛋白）、胞内骨架成分也是actin。（2）桥粒与半桥粒：桥粒（desmosome）是相邻细胞间形成的纽扣状结构。通过质膜下的致密斑连接中间纤维。桥粒中间为钙粘素（desmoglein及desmocollin）。半桥粒（hemidesmosome）：位于上皮细胞基面与基膜

36、之间，连接蛋白为整合素。连接的细胞内骨架成分为角蛋白。4.通讯连接：（1）间隙连接 gap junction：存在于大多数动物组织。连接处有24nm的缝隙。基本单位称连接子（connexon），由6个相同或相似的跨膜蛋白亚单位环绕而成。注射染料证明间隙连接可允许分子量小于1.5KD的分子通过，但通透性是可调节的。（2）胞间连丝 plasmodesmata由穿过植物细胞壁的原生质构成中央有SER形成的连丝小管。功能上与动物细胞间的间隙连接类似。允许分子量小于800Da的分子通过，在相邻细胞间起通讯作用。通透性可调节。某些植物病毒能制造特殊的蛋白质，使胞间连丝的有效孔径扩大。5.化学突触 syna

37、pse ：是存在于可兴奋细胞间的一种连接方式，其作用是通过释放神经递质来传导兴奋。由突触前膜、突触后膜、突触间隙三部分组成。突触前神经元的突起末梢膨大呈球形，称突触小体。突触小体内有突触小泡，内含神经递质。 各 类 连 接 的 比 较6. 细胞粘附分子Cell Adhesion Molecule，CAMCAM介导细胞与细胞间及细胞与ECM间的相互作用。为糖蛋白、分为五类，分子结构由三部分组成：胞外区，N端部分，负责与配体识别；跨膜区，多为单次跨膜；胞质区，C端部分，与质膜下的骨架成分直接相连，或与胞内的信号分子相连。多数细胞粘附分子依赖二价阳离子，如Ca2，Mg2。7.细胞粘附分子的作用机制有

38、三种模式:亲同性粘附;亲异性粘附;通过胞外连接分子相互识别与结合。8.钙粘素cadherin作用：介导细胞连接：如E-钙粘素。参与细胞分化：决定胚胎细胞间的粘附，影响细胞分化。抑制细胞迁移.哺乳动物细胞表面的主要钙粘素分子9.选择素（selectin）属亲异性CAM；作用依赖于Ca2；参与白细胞与脉管内皮细胞之间的识别与粘合.第十章细胞外基质EXTRACELLULAR MATRIX /ECM1.ECM是细胞外大分子构成的网络。包括：胶原、非胶原糖蛋白、氨基聚糖与蛋白聚糖、弹性蛋白等。2.胶原Collagen组成：由原胶原交联而成，原胶原是三条肽链形成的三股螺旋，含有三种结构：螺旋区，非螺旋区及

39、球形结构域。功能：参与形成结缔组织，如骨、韧带、基膜、皮肤。3.纤粘连蛋白（FN）类型：血浆FN、细胞FN：多聚体，不溶，存在于ECM及细胞表面。功能：FN可将细胞连接到ECM上；FN上的RGD（Arg-Gly-Asp）序列可与细胞表面的整合素结合。人工合成的RGD三肽可抑制细胞在FN基质上粘附。4.层粘连蛋白 (LN)功能：参与构成基膜，是胚胎发育中出现最早的细胞外基质成分。氨基聚糖（GAG）GAG是重复二糖单位构成的无分枝长链多糖.可分为六种：透明质酸、硫酸软骨素、硫酸皮肤素、硫酸乙酰肝素、肝素、硫酸角质素。透明质酸(HA)是唯一不硫酸化的GAG。可结合大量水分子，赋予组织一定的抗压性。5

40、.蛋白聚糖 proteoglycan是氨基聚糖（除HA）与核心蛋白质的共价结合物。6.细胞外基质的生物学作用:影响细胞的存活、死亡:定着依赖性：如，上皮细胞一旦脱离了ECM则会发生anoikis（凋亡）。决定细胞的形状:不同细胞具有不同的细胞外基质，介导的细胞骨架组装的状况不同，从而表现出不同的形状。调节细胞的增殖:定着依赖性生长（anchorage dependent growth）。控制细胞的分化如成肌细胞在纤粘连蛋白上增殖并保持未分化的表型；而在层粘连蛋白上则停止增殖，进行分化，融合为肌管。参与细胞的迁移:细胞的迁移依赖于细胞的粘附与细胞骨架的组装。第十一章细胞分化与凋亡1.细胞分裂的不对称性和细胞间的相互作用是细胞分化的两个基本机制。全能性：一个细胞可分化为机体的所有细胞.干细胞多能干细胞单能干细胞（祖细胞）. 2.细胞间的相互作用:1)胚