莨菪烷类抗胆碱药物的分析课件

1、莨菪烷类抗胆碱药物的分析1第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析制作人：沈阳药科大学 药学院 80k药物分析 陈丹丹 131080102莨菪烷类抗胆碱药物的分析2莨菪烷类药物的结构与性质鉴别试验特殊杂质与检查含量测定目录目录contents第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析3莨菪烷类药物的结构与性质第一节第一节contents第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析4一、典型药物一、典型药物莨菪烷生物碱是从茄科植物如颠茄、莨菪和白曼陀罗等中提取的具有对莨菪烷生物碱是从茄科植物如颠茄、莨菪和白曼陀罗等中提取的具有对m m受体阻断作用的生物碱。受体阻断作用的生物碱

2、。这类生物碱都是由莨菪醇与不同有机酸所成的酯。这类生物碱都是由莨菪醇与不同有机酸所成的酯。典型药物结构：典型药物结构：第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析硫酸阿托品硫酸阿托品（atropine sulfateatropine sulfate）莨菪烷类抗胆碱药物的分析5一、典型药物一、典型药物典型药物结构：典型药物结构：第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析氢溴酸后马托品氢溴酸后马托品（homatropine hydrobromidehomatropine hydrobromide）硫酸莨菪碱硫酸莨菪碱（hyoscyamine sulfatehyoscyamine sulfate）h2so4nh3ch22

3、h2oohooh莨菪烷类抗胆碱药物的分析6一、典型药物一、典型药物典型药物结构：典型药物结构：第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析氢溴酸山莨菪碱氢溴酸山莨菪碱（anisodamine hydrobromideanisodamine hydrobromide）氢溴酸东莨菪碱氢溴酸东莨菪碱（scopolamine hydrobromidescopolamine hydrobromide）3h2ohbrnh3choohohohbrnh3choohoh莨菪烷类抗胆碱药物的分析7一、典型药物一、典型药物典型药物结构：典型药物结构：第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析甲溴东莨菪碱甲溴东莨菪碱（methscopol

4、amin bromidemethscopolamin bromide）brnh3choohohoh3c丁溴东莨菪碱丁溴东莨菪碱（scopolamin butylbromidescopolamin butylbromide）brnh3choohohoh3c莨菪烷类抗胆碱药物的分析8二、主要理化性质二、主要理化性质第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析 水解性水解性 本类药物分子结构中具有酯的结构，易水解。本类药物分子结构中具有酯的结构，易水解。 以阿托品为例，水解生成莨菪醇以阿托品为例，水解生成莨菪醇()()和莨菪酸和莨菪酸()()，反应式如下：，反应式如下：ohoohnch3ohhnch3+hooc

5、oh阿托品 莨菪醇 莨菪酸莨菪烷类抗胆碱药物的分析9二、主要理化性质二、主要理化性质 碱性碱性 阿托品和东莨菪碱的结构中，五元脂环上含有阿托品和东莨菪碱的结构中，五元脂环上含有叔胺氮叔胺氮原子原子, ,具有较强的碱具有较强的碱性性, ,易与酸成盐。如阿托品的易与酸成盐。如阿托品的pkpkb1b1为为4.354.35。 旋光性旋光性 氢溴酸东莨菪碱结构中含有不对称碳原子，呈左旋体，比旋度为氢溴酸东莨菪碱结构中含有不对称碳原子，呈左旋体，比旋度为-24-24至至- -2727，而阿托品结构中虽然也含有不对称碳原子，但因外消旋化而为，而阿托品结构中虽然也含有不对称碳原子，但因外消旋化而为外消外消旋体

6、旋体，无旋光性无旋光性。利用此性质可。利用此性质可区别阿托品与东莨菪碱区别阿托品与东莨菪碱。第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析10鉴别试验第二节第二节contents第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析11一、一、vitalivitali鉴别反应鉴别反应vitalivitali鉴别反应系托烷生物碱类的特征反应。鉴别反应系托烷生物碱类的特征反应。原理：原理：第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析hoocoh+3hno3hoocohno2o2nno2+3h2okohc2h5ohhoocohno2o2nnohokohhoocohno2o2nnoko莨菪烷类抗胆碱药

7、物的分析12一、一、vitalivitali鉴别反应鉴别反应vitalivitali鉴别反应系托烷生物碱类的特征反应。鉴别反应系托烷生物碱类的特征反应。原理：原理：第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析托烷生物碱托烷生物碱水解水解莨菪酸莨菪酸发烟硝酸发烟硝酸 三硝基衍生物三硝基衍生物kohkohaqaq（c c2 2h h5 5ohoh）固体固体kohkoh有色的醌型产物（有色的醌型产物（深紫色深紫色）chpchp氢溴酸山莨菪碱的鉴别：氢溴酸山莨菪碱的鉴别： 取供试品约取供试品约10mg10mg，加，加发烟硝酸发烟硝酸5 5滴，置水浴上蒸干，得黄色的残渣，放冷，滴，置水浴上蒸干，得黄色的残渣，放冷，

8、加加乙醇乙醇2 23 3滴，加滴，加固体氢氧化钾固体氢氧化钾一小粒，即显一小粒，即显深紫色深紫色。莨菪烷类抗胆碱药物的分析13二、与硫酸二、与硫酸- -重铬酸钾反应重铬酸钾反应药物水解后生成莨菪酸，可与药物水解后生成莨菪酸，可与硫酸硫酸- -重铬酸钾重铬酸钾在在加热加热的条件下，发生的条件下，发生氧化氧化反应反应，生成苯甲醛而逸出，生成苯甲醛而逸出苦杏仁的臭味苦杏仁的臭味。反应式如下：。反应式如下：第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析hoocohh2oh2so4hoocch22o2cho+2co2h2o莨菪烷类抗胆碱药物的分析14三、与生物碱显色剂或沉淀剂反应三、与生物碱显色剂或沉淀剂反应 生物碱

9、在生物碱在酸性溶液酸性溶液中与中与重金属盐或大分子酸重金属盐或大分子酸生成生成难溶性盐、复盐或配合难溶性盐、复盐或配合物沉淀物沉淀。不同沉淀剂与生物碱反应的。不同沉淀剂与生物碱反应的灵敏度灵敏度不同。不同。第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析生物碱沉淀试剂生物碱沉淀试剂反应条件及结果反应条件及结果碘化铋钾试液碘化铋钾试液橙色或棕红色沉淀橙色或棕红色沉淀碘化钾碘试液碘化钾碘试液棕色或棕褐色沉淀棕色或棕褐色沉淀碘化汞钾试液碘化汞钾试液白色或淡黄色沉淀白色或淡黄色沉淀三硝基苯酚试液三硝基苯酚试液结晶性沉淀并有特定熔点结晶性沉淀并有特定熔点硅乌酸试液硅乌酸试液白色或淡黄色或黄棕色沉淀白色或淡黄色或黄棕色沉

10、淀磷乌酸试液磷乌酸试液淡黄色沉淀淡黄色沉淀莨菪烷类抗胆碱药物的分析15三、与生物碱显色剂或沉淀剂反应三、与生物碱显色剂或沉淀剂反应 生物碱在生物碱在酸性溶液酸性溶液中与中与重金属盐或大分子酸重金属盐或大分子酸生成生成难溶性盐、复盐或配合难溶性盐、复盐或配合物沉淀物沉淀。不同沉淀剂与生物碱反应的。不同沉淀剂与生物碱反应的灵敏度灵敏度不同。不同。第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析chpchp氢溴酸东莨菪碱的鉴别：氢溴酸东莨菪碱的鉴别： 取本品约取本品约10mg10mg，加水，加水1ml1ml溶解后，置分液漏斗中，加氨试液使成溶解后，置分液漏斗中，加氨试液使成碱性碱性后，加后，加氯仿氯仿5ml5ml，

11、摇匀，分取氯仿液，置水浴上蒸干，残渣加，摇匀，分取氯仿液，置水浴上蒸干，残渣加二氯化汞的乙醇溶液二氯化汞的乙醇溶液（取二氯化汞（取二氯化汞2g2g，加，加60%60%乙醇使成乙醇使成100ml100ml）1.5ml1.5ml，即生成白色沉淀（与阿托品，即生成白色沉淀（与阿托品及后马托品的区别）。及后马托品的区别）。莨菪烷类抗胆碱药物的分析16三、光谱鉴别法三、光谱鉴别法紫外光谱法紫外光谱法 一般通过比较药物的一般通过比较药物的maxmax、minmin或吸收光谱的一致性进行鉴别，若不止或吸收光谱的一致性进行鉴别，若不止一个峰（谷），也可比较其吸光度或吸光系数的比值来鉴别。一个峰（谷），也可比较

12、其吸光度或吸光系数的比值来鉴别。 chpchp丁溴东莨菪碱的鉴别：丁溴东莨菪碱的鉴别： 取本品，加取本品，加0.01m0.01m盐酸溶液并稀释制成每盐酸溶液并稀释制成每1ml1ml中含中含1mg1mg的溶液，测定其紫外的溶液，测定其紫外吸收光谱，在吸收光谱，在252nm252nm、257nm257nm与与264nm264nm波长处有最大吸收。波长处有最大吸收。红外光谱法红外光谱法 chpchp收载的收载的原料药原料药一般都采用红外光谱法进行鉴别。一般都采用红外光谱法进行鉴别。第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析17五、色谱法五、色谱法 一般用于一般用于已知生物碱已知生物碱的

13、鉴别，主要有的鉴别，主要有tlctlc、hplchplc、gcgc、pcpc等，等，tlctlc法最为常用。法最为常用。 注意：注意： 1 1）用硅胶吸附剂时，需在流动相或固定相中加碱，使生物碱游离或中和硅）用硅胶吸附剂时，需在流动相或固定相中加碱，使生物碱游离或中和硅胶表面的弱酸性，以防拖尾。胶表面的弱酸性，以防拖尾。 2 2）单体生物碱可用其化学对照品为阳性对照物；中药中的生物碱宜用化学）单体生物碱可用其化学对照品为阳性对照物；中药中的生物碱宜用化学对照品和对照药材同时对照。对照品和对照药材同时对照。 3 3）用保留值或相对保留值定性，以供试品溶液与对照品溶液主峰保留时间）用保留值或相对保

14、留值定性，以供试品溶液与对照品溶液主峰保留时间的一致性作为鉴别依据。的一致性作为鉴别依据。 第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析18六、硫酸盐和溴化物的反应六、硫酸盐和溴化物的反应为了改善莨菪烷类生物碱药物的水溶性和稳定性，它们大都制成硫酸盐或为了改善莨菪烷类生物碱药物的水溶性和稳定性，它们大都制成硫酸盐或氢溴酸盐。所以，它们的水溶液则分别显硫酸盐或溴化物的鉴别反应。氢溴酸盐。所以，它们的水溶液则分别显硫酸盐或溴化物的鉴别反应。第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析chpchp氢溴酸东莨菪碱的鉴别：氢溴酸东莨菪碱的鉴别： 1 1）取供试品溶液，加稀硝酸使成酸性，滴加硝酸银试液，即

15、生成淡黄色）取供试品溶液，加稀硝酸使成酸性，滴加硝酸银试液，即生成淡黄色凝乳状沉淀，分离，沉淀能在氨试液中微溶，但在硝酸中几乎不溶；凝乳状沉淀，分离，沉淀能在氨试液中微溶，但在硝酸中几乎不溶； 2 2）取供试品溶液，滴加氯试液，溴即游离，加氯仿振摇，氯仿层显黄色）取供试品溶液，滴加氯试液，溴即游离，加氯仿振摇，氯仿层显黄色或红棕色。或红棕色。莨菪烷类抗胆碱药物的分析19特殊杂质与检查第三节第三节contents第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析20一、氢溴酸东莨菪碱中有关物质的检查一、氢溴酸东莨菪碱中有关物质的检查 氢溴酸东莨菪碱是氢溴酸东莨菪碱是从茄科植物颠茄、莨菪、白

16、曼陀罗中提取得到的莨菪碱的从茄科植物颠茄、莨菪、白曼陀罗中提取得到的莨菪碱的氢溴酸盐。我国是从氢溴酸盐。我国是从茄科植物曼陀罗的干燥品（洋金花）中提取东莨菪碱后茄科植物曼陀罗的干燥品（洋金花）中提取东莨菪碱后制成氢溴酸盐。制成氢溴酸盐。第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析洋金花粗粉洋金花粗粉乙醇乙醇/ /渗漉渗漉渗漉液渗漉液减压蒸馏减压蒸馏浸膏浸膏h h2 2soso4 4/ /提取提取酸性提取液酸性提取液nana2 2coco3 3, chcl, chcl3 3/ /提取提取总生物碱总生物碱nana2 2coco3 3, chcl, chcl3 3/ /分离分离东莨菪碱东莨菪碱hbr/hbr/成

17、盐成盐氢溴酸东莨菪碱（粗品）氢溴酸东莨菪碱（粗品）75% c75% c2 2h h5 5oh/oh/精制精制成品成品生产和贮藏过程中可能引入的有关物质可通过生产和贮藏过程中可能引入的有关物质可通过酸度酸度、其他生物碱其他生物碱和和易氧化物易氧化物检查进行控制。检查进行控制。莨菪烷类抗胆碱药物的分析21一、氢溴酸东莨菪碱中有关物质的检查一、氢溴酸东莨菪碱中有关物质的检查 酸度酸度 东莨菪碱的碱性很弱，对石蕊试纸几乎不显碱性反应。东莨菪碱的碱性很弱，对石蕊试纸几乎不显碱性反应。氢溴酸东莨菪碱为强氢溴酸东莨菪碱为强酸弱碱盐，通过其酸弱碱盐，通过其5%5%的水溶液的水溶液phph为为4.0-5.54.

18、0-5.5可控制酸性杂质。可控制酸性杂质。 易氧化物易氧化物 主要检查生产过程中可能引入的杂质主要检查生产过程中可能引入的杂质阿扑东莨菪碱（脱水东莨菪碱）及其它阿扑东莨菪碱（脱水东莨菪碱）及其它含有不饱和双键的有机物质。它们的紫外吸收最大波长红移，可使高锰酸钾含有不饱和双键的有机物质。它们的紫外吸收最大波长红移，可使高锰酸钾溶液褪色。溶液褪色。 chpchp氢溴酸东莨菪碱易氧化物的检查：氢溴酸东莨菪碱易氧化物的检查： 取本品取本品0.15g0.15g，加水，加水5ml5ml溶解后，在溶解后，在15-2015-20加高锰酸钾滴定液（加高锰酸钾滴定液（0.02m0.02m）0.05ml0.05ml

19、，10min10min内红色不得完全消失。内红色不得完全消失。第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析22一、氢溴酸东莨菪碱中有关物质的检查一、氢溴酸东莨菪碱中有关物质的检查 其他生物碱其他生物碱 本品水溶液加入本品水溶液加入氨水试液氨水试液不得发生混浊。当有其它生物碱存在时，则易产生不得发生混浊。当有其它生物碱存在时，则易产生混浊混浊。 chpchp氢溴酸东莨菪碱其他生物碱的检查：氢溴酸东莨菪碱其他生物碱的检查： 取本品取本品0.10g0.10g，加水，加水2ml2ml溶解后，分成两等份：一份中加氨试液溶解后，分成两等份：一份中加氨试液2-3d2-3d，不得发，不得发生浑浊；

20、另一份中加氢氧化钾试液数滴，只许发生瞬即消失的类白色浑浊。生浑浊；另一份中加氢氧化钾试液数滴，只许发生瞬即消失的类白色浑浊。第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析存在其他生物碱存在其他生物碱合格合格本品水溶液本品水溶液+ +氨试液氨试液混浊混浊不混浊不混浊莨菪烷类抗胆碱药物的分析23二、硫酸阿托品中有关物质的检查二、硫酸阿托品中有关物质的检查 硫酸阿托品为硫酸阿托品为消旋体消旋体，无旋光性无旋光性，而，而莨菪碱为左旋体莨菪碱为左旋体，可以利用旋光性对莨，可以利用旋光性对莨菪碱杂质进行检查。菪碱杂质进行检查。 chpchp用用hplchplc法检查其中有关物质，通过峰面积的比值及保留时间来控制杂质法检

21、查其中有关物质，通过峰面积的比值及保留时间来控制杂质限度。限度。 chpchp硫酸阿托品中莨菪碱的检查：硫酸阿托品中莨菪碱的检查： 取本品按干燥品计算，加水溶解并制成没取本品按干燥品计算，加水溶解并制成没1ml1ml中含中含0.5mg0.5mg的溶液，照旋光度测的溶液，照旋光度测定法测定，旋光度不得过定法测定，旋光度不得过-40-40。第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析24含量测定第三节第三节contents第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析25非水滴定法非水滴定法酸性染料比色法酸性染料比色法高效液相色谱法高效液相色谱法莨菪烷类抗胆碱药物的药理活性均

22、较强，临床使用剂量较小，莨菪烷类抗胆碱药物的药理活性均较强，临床使用剂量较小，因此测定方法要因此测定方法要专属专属、灵敏灵敏。第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析26一、酸性染料比色法一、酸性染料比色法此法是针对生物碱药物，在一定的此法是针对生物碱药物，在一定的phph条件下，可与某些酸性染料结合而呈色，条件下，可与某些酸性染料结合而呈色，进而可用分光光度法进行测量。此法样品用量少，灵敏度高。特别适用于少进而可用分光光度法进行测量。此法样品用量少，灵敏度高。特别适用于少量供试品、尤其是小剂量药物制剂的定量分析。有一定专属性和准确度。量供试品、尤其是小剂量药物制剂的定量分析。

23、有一定专属性和准确度。基本原理基本原理： 在适当在适当phph的水溶液中，碱性药物（的水溶液中，碱性药物（b b）可与氢离子结合成阳离子（）可与氢离子结合成阳离子（bhbh+ +），而），而一些酸性染料（一些酸性染料（如磺酸酞类指示剂等），如溴甲酚绿、溴麝香草酚蓝、溴甲如磺酸酞类指示剂等），如溴甲酚绿、溴麝香草酚蓝、溴甲酚紫、溴酚蓝等，可解离成阴离子（酚紫、溴酚蓝等，可解离成阴离子（inin- -）；两种离子定量地结合，即生成具）；两种离子定量地结合，即生成具有吸收光谱明显红移的有色离子对（有吸收光谱明显红移的有色离子对（bhbh+ +inin- -），且可以被有机溶剂定量萃取，），且可以被有

24、机溶剂定量萃取，通过测定有机相中有色离子对的特征波长处的吸光度，即可进行碱性药物的通过测定有机相中有色离子对的特征波长处的吸光度，即可进行碱性药物的含量测定。含量测定。第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析27一、酸性染料比色法一、酸性染料比色法反应示意式：反应示意式：第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析也可将呈色的有机相经碱化（如加入醇制氢氧化钠），使与有机碱结合的酸也可将呈色的有机相经碱化（如加入醇制氢氧化钠），使与有机碱结合的酸性染料释放出来，测定其吸光度，在计算出碱性药物的含量。性染料释放出来，测定其吸光度，在计算出碱性药物的含量。莨菪烷类抗胆碱药物的分析28一、酸性染料

25、比色法一、酸性染料比色法影响因素影响因素：1 1）水相最佳）水相最佳phph的选择的选择 只有选择合适的只有选择合适的phph，使有机碱性药物均成阳离子，使有机碱性药物均成阳离子（bhbh+ +），而同一），而同一phph条件下条件下酸性染料电离足够的阴离子酸性染料电离足够的阴离子（inin- -），碱性药物才能定量生成离子对，并完全），碱性药物才能定量生成离子对，并完全溶于有机溶剂中，而过量的燃料完全保留在水相中，才能保证定量的测定。溶于有机溶剂中，而过量的燃料完全保留在水相中，才能保证定量的测定。第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析 phph过低过低抑制酸性染料的解离、使酸性阴离子浓度过低抑制

26、酸性染料的解离、使酸性阴离子浓度过低影响离子对的形成影响离子对的形成； phph过过高高，有机药物呈游离态，也，有机药物呈游离态，也抑制离子对的形成抑制离子对的形成，因此须有一个最佳，因此须有一个最佳phph值存在，使离子对生成最有利。值存在，使离子对生成最有利。 其选择方法一般根据其选择方法一般根据药物与染料的药物与染料的pkpk值值及水相与有机相的及水相与有机相的分配系数分配系数而定。而定。莨菪烷类抗胆碱药物的分析29一、酸性染料比色法一、酸性染料比色法影响因素影响因素：2 2）酸性染料及其浓度）酸性染料及其浓度 当用的酸性染料有溴麝香草酚蓝、溴甲酚绿、甲基橙等。当用的酸性染料有溴麝香草酚

27、蓝、溴甲酚绿、甲基橙等。第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析 定量结合，产物溶解性好；可稍过量。定量结合，产物溶解性好；可稍过量。 一般认为对测定结果影响不大，只要量足够大就可以；一般认为对测定结果影响不大，只要量足够大就可以； 但浓度过高的话就会形成严重的乳化层，且不易于除去，往往影响测定但浓度过高的话就会形成严重的乳化层，且不易于除去，往往影响测定结果。结果。莨菪烷类抗胆碱药物的分析30一、酸性染料比色法一、酸性染料比色法影响因素影响因素：3 3）有机溶剂的选择）有机溶剂的选择 当用的酸性染料有溴麝香草酚蓝、溴甲酚绿、甲基橙等。当用的酸性染料有溴麝香草酚蓝、溴甲酚绿、甲基橙等。4 4）水分的影

28、响）水分的影响 影响结果，脱水剂或滤纸除去水分影响结果，脱水剂或滤纸除去水分5 5）酸性染料中的有色杂质）酸性染料中的有色杂质 影响结果，先用萃取溶剂萃取除去影响结果，先用萃取溶剂萃取除去第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析提取效率高，提取效率高，氯仿最理想；氯仿最理想；一般应选择对有机碱药物与酸性染料形成离子对萃取效率高、能与离子一般应选择对有机碱药物与酸性染料形成离子对萃取效率高、能与离子对形成氢键、不与或极少与水混溶的有机溶剂作为萃取溶剂。对形成氢键、不与或极少与水混溶的有机溶剂作为萃取溶剂。莨菪烷类抗胆碱药物的分析31二、非水溶液滴定法二、非水溶液滴定法第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析 非水溶液滴定法是在非水溶剂中进行的酸碱滴定测定法。主要用来测非水溶液滴定法是在非水溶剂中进行的酸碱滴定测定法。主要用来测定有机碱及其氢卤酸