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文档简介

1、高中课本中涉及离心技术比较离心技术：是利用旋转运动产生的离心力,根据物质的沉降系数或浮力密度的差别进行物质的分析、分离、浓缩和提纯的一种技术。 功能：Ø分离、纯化样品;Ø对已纯化的样品进行结构和性质的分析。主要分两种类型：制备性离心技术和分析性离心技术一、制备性离心技术：是以分离纯化生化物质、细胞、亚细胞粒子为目的离心技术。1、差速离心法（差速沉降离心法）cellhomogenate细胞匀浆pelletcontains颗粒包含nucleicytoskeletons细胞骨架 mitochondriallysosomes peroxisomes线粒体溶酶体过氧化物酶体micro

2、somessmall vesicles 微粒小囊泡ribosomesviruses large macromolecules核糖体病毒大分子fractionation高中课本涉及的细胞器的获取分离通过差速离心法获得。2、密度梯度离心法（密度梯度区带离心法）此法可以用于dna复制分离、病毒颗粒的分离等。二、分析性超速离心技术：与制备性超速离心不同的是：分析性超速离心主要是为了研究生物大分子的沉降特性和结构，而不是专门收集某一特定组份。因此它使用了特殊的转子和检测手段，以便连续监视物质在一个离心场中的沉降过程。分析性超速离心的应用： 测定生物大分子的相对分子重量测定相对分子重量主要有三种方法：沉降

3、速度、沉降平衡和接近沉降平衡。其中应用最广的是沉降速度，超速离心在高速中进行，这个速度使得任意分布的粒子通过溶剂从旋转的中心辐射地向外移动，在清除了粒子的那部分溶剂和尚含有沉降物的那部分溶剂之间形成一个明显的界面，该界面随时间的移动而移动，这就是粒子沉降速度的一个指标，然后用照相记录，即可求出粒子的沉降系数。生物大分子的纯度估计静分析性超速离心已广泛地应用于研究dna 制剂、病毒和蛋白质的纯度。用沉降速度的技术来分析沉降界面是测定制剂均质性的最常用方法之一，出现单一清晰的界面一般认为是均质的，如有杂质则在主峰的一侧或二侧出现小峰。分析生物大分子中的构象变化分析性超速离心已成功地用于检测大分子构象的变化，例如dna 可能以单股或双股出现，其中每一股在本质上可能是线性的，也可能是环状的，如果遇到某种因素（温度或有机溶剂）dna 分子可能发生一些构象上的变化，这些变化也许可逆、也许不可逆，这些构象上的变化可以通过检查样品在沉降

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