甘油三酯测定

1、实验项目实验项目 甘油三酯的测定（甘油三酯的测定（72-172-1）3 3学时学时 一、实验目的一、实验目的掌握：血清甘油三酯（三酰甘油）测定的掌握：血清甘油三酯（三酰甘油）测定的原理、操作方法和临床意义。原理、操作方法和临床意义。二、实验原理二、实验原理甘油磷酸甘油甘油激酶磷酸甘油氧化酶磷酸二羟基丙酮 + H2O2H2O2 + 氨基安替比林 + 酚过氧化物酶红色醌类化合物 + H2O2、3、4. 用用72-1型分光光度计测出红色化合物吸光度，再利用公式型分光光度计测出红色化合物吸光度，再利用公式 求出甘油三酯含量。求出甘油三酯含量。三、实验器材与试剂三、实验器材与试剂（1 1）试管）试管 3

2、 3支支 （2 2）水浴箱）水浴箱 1 1台台 （3 3）试管架）试管架 1 1个个 （4 4）洗耳球）洗耳球 1 1个个（5 5）微量五档可调移液器微量五档可调移液器 2 2支支（6 6）刻度吸量管刻度吸量管（5ml5ml） 1 1支支 （7 7）72-172-1型分光光度计型分光光度计 1 1台台（一）实验器材（一）实验器材微量五档可微量五档可调移液器调移液器NoImage使用方法：使用方法：1.1.将将吸嘴套在移液器头上吸嘴套在移液器头上轻轻转动，以保证密封。轻轻转动，以保证密封。2.2.使用前应先将移液器使用前应先将移液器吸液和排液几次吸液和排液几次，润洗吸嘴润洗吸嘴和保持和保持 腔内

3、外气压一致。腔内外气压一致。3.3.选择量程选择量程。4.4.垂直地握住移液器，将按钮按到第一停止点，然后把垂直地握住移液器，将按钮按到第一停止点，然后把吸吸嘴浸入到嘴浸入到液液面下面下2 23mm3mm，再缓慢放松按钮，使之复位，等，再缓慢放松按钮，使之复位，等待待1 12 2秒后，从液体中取出，并避免碰撞任何物体。秒后，从液体中取出，并避免碰撞任何物体。5.5.将吸液嘴移至加样容器壁上，缓慢地把按钮按到第一停将吸液嘴移至加样容器壁上，缓慢地把按钮按到第一停止点，等待止点，等待1 12 2秒，再把按钮全部按下去，秒，再把按钮全部按下去，排排尽尽液液体后，吸液体后，吸液嘴应沿容器壁上滑动取出，

4、再放松按钮，使之复位，即完成。嘴应沿容器壁上滑动取出，再放松按钮，使之复位，即完成。6.6.最后，最后，打掉用过的吸液嘴，调回最大量程打掉用过的吸液嘴，调回最大量程，仪器放置好保存。，仪器放置好保存。72-172-1型分光光度计型分光光度计工作原理工作原理 物质对光的吸收具有选择性，不同的物质都有各物质对光的吸收具有选择性，不同的物质都有各自的吸收波长。在一定波长下，某物质的溶液对光的自的吸收波长。在一定波长下，某物质的溶液对光的吸收强弱（吸收强弱（吸光度吸光度A）与）与溶液的浓度溶液的浓度C和和液层的厚度液层的厚度L的乘积成正比，即遵循朗伯的乘积成正比，即遵循朗伯-比尔定律：比尔定律： A=

5、KCL (K为吸收系数，对同一物质来说为一常数为吸收系数，对同一物质来说为一常数)使用方法：使用方法：1.检查检查 ：指针位于：指针位于“0”。 2.打开电源，打开比色皿暗箱盖，打开电源，打开比色皿暗箱盖，预热预热20分钟分钟。3.加样：加样：夹毛面，擦干夹毛面，擦干。 4.放置好比色皿放置好比色皿，选择波长、调灵敏度。，选择波长、调灵敏度。5.反复反复调调0、调、调100至稳定至稳定。 6.合盖，合盖，读数，记录，取样，清洗，关闭仪器读数，记录，取样，清洗，关闭仪器。1 1、血清（、血清（样本）样本）2 2、蒸馏水、蒸馏水3 3、工作液、工作液 4 4、甘油三酯标准液（、甘油三酯标准液（标本

6、标本）：）：2.26 mmol/L2.26 mmol/L （二）实验试剂（二）实验试剂四、实验内容和操作过程四、实验内容和操作过程 1 1、取取3 3支干净试管，分别支干净试管，分别标明标明测定（测定（T T）、标准（）、标准（S S） 和空白管（和空白管（O O），然后按表加入试剂：），然后按表加入试剂：加入物加入物 测定管测定管T 标准管标准管S 空白管空白管O血清（血清（m ml l） 1515标准液（标准液（m ml l） 1515工作液（工作液（m ml l） 1.5 1.5 1.51.5 1.5 1.5 2 2、将样品混匀后，置于将样品混匀后，置于37水浴箱中水浴箱中水浴水浴 10

7、min。 3 3、用分光光度计在波长用分光光度计在波长546nm处处，以空白管以空白管O调零，分别读取两管吸光度值，记录测定管调零，分别读取两管吸光度值，记录测定管T、标标准管准管S的吸光度值的吸光度值AT、AS 。 计算公式：计算公式： 甘油三酯（甘油三酯（mmol/Lmmol/L）= = 标准液浓度（标准液浓度（2.26 mmol/L2.26 mmol/L） 测定管吸光度测定管吸光度AT标准管吸光度标准管吸光度AS五、实验结果计算及分析五、实验结果计算及分析 【结果分析】【结果分析】 经过计算得到的血清中甘油三酯浓度为经过计算得到的血清中甘油三酯浓度为多多少少，是否在人体的正常范围内，是否在人体的正常范围内（空腹甘油三酯空腹甘油三酯浓度为浓度为0.451.36mmol/L ）。六、临床意义六、临床意义TG升高：升高：1、随年龄增长有上升趋势，体重超标者。、随年龄增长有上升趋势，体重超标者。2、高脂血症、糖尿病、肾病综合症、动脉粥样硬化、高脂血症、糖尿病、肾病综合症、动脉粥样硬化、 甲状腺功能减退等。甲状腺功能减退等。3、先