动物细胞与组织培养课件

1、你还记得她吗？你还记得她吗？“奋奋斗之光斗之光”讲座中的南讲座中的南京女孩京女孩媛媛媛媛动动物物细细胞胞工工程程通常采用的通常采用的技 术 手 段技 术 手 段 动物细胞与组织培养动物细胞与组织培养细胞融合细胞融合体细胞克隆体细胞克隆单克隆抗体制备单克隆抗体制备细胞核移植细胞核移植动物细胞与组织培养动物细胞与组织培养资料一：资料一： 培养的动物细胞还可以用于培养的动物细胞还可以用于检测有毒物质检测有毒物质。许多致畸、致癌物质加入培养液后，培养细胞会许多致畸、致癌物质加入培养液后，培养细胞会发生染色体结构和数目的变异。根据变异细胞占发生染色体结构和数目的变异。根据变异细胞占全部培养细胞的百分数，

2、可以判断某种物质的毒全部培养细胞的百分数，可以判断某种物质的毒性。现在动物细胞培养已经成为检测有毒物质的性。现在动物细胞培养已经成为检测有毒物质的快速而灵敏的有效手段。快速而灵敏的有效手段。 资料二：资料二：人工关节人工关节软骨再生软骨再生1.1.第一次手第一次手术术: : 从从病人病人关节软骨关节软骨中未中未 受力的部分，取出一片受力的部分，取出一片约为约为葡萄葡萄干干大大小的健康小的健康软软骨骨组织组织。2.2.分分离山软离山软骨骨细胞细胞并经并经三星期的三星期的体体外外 培培养养，使，使细胞细胞数数增加增加约约10102020倍。倍。3.3.第二次手第二次手术术: : 清理清理软软骨受骨

3、受损损的部分，的部分，从从下方骨下方骨头头部位取出一片部位取出一片约与伤约与伤口口大大小相同的骨膜，小相同的骨膜，缝缝在在伤伤口上方，再口上方，再将将软软骨骨细胞细胞注射到骨膜下方。注射到骨膜下方。资料三：资料三：结果结果: : 经过复健经过复健一年一年后后即可即可恢复恢复正常的生活。正常的生活。一一、应用、应用(Why)(Why)大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、干扰素、单大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体）克隆抗体）培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，判断某种培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性物质的毒性用于生理、病理、药理等方面的研究，为治疗和预用于生

4、理、病理、药理等方面的研究，为治疗和预防疾病提供理论依据防疾病提供理论依据作为基因工程中的受体细胞作为基因工程中的受体细胞 什么（什么（WhatWhat）是动物细胞培养）是动物细胞培养 如何（如何（HowHow）进行动物细胞培养？）进行动物细胞培养？二、过程（二、过程（HowHow）幼龄动物幼龄动物取动物器官取动物器官和组织和组织剪碎组织剪碎组织胰蛋白酶处理胰蛋白酶处理单个细胞单个细胞细胞培细胞培养养请同学根据视频和图请同学根据视频和图2-102-10来描述细胞培养的基本过程：来描述细胞培养的基本过程：探究探究3 3、如何将动物组织分散成单个的细胞呢？如何将动物组织分散成单个的细胞呢？2 2、

5、动物细胞培养过程将组织分散成了单个细胞，这样做有什动物细胞培养过程将组织分散成了单个细胞，这样做有什么好处？么好处？4 4、胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什、胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什么成份？么成份？根据图根据图2-102-10中细胞培养过程，回答下列问题：中细胞培养过程，回答下列问题：5 5、细胞膜的主要成份是什么？胰蛋白酶能将其破坏吗？由此、细胞膜的主要成份是什么？胰蛋白酶能将其破坏吗？由此可见，可见，将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢？将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢？1 1、动物细胞培养取材时，一般是取胚胎组织或幼龄动物的组、动物

6、细胞培养取材时，一般是取胚胎组织或幼龄动物的组织或器官，请解释原因？织或器官，请解释原因？积极思考细胞贴壁过程细胞贴壁过程细胞接触抑制细胞接触抑制细胞接触抑制细胞接触抑制 细胞在贴壁生长过细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分裂，程中，随着细胞分裂，数量不断增加，最后形数量不断增加，最后形成一个单层，此时细胞成一个单层，此时细胞间相互接触，细胞分裂间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再和生长停止，数量不再增加。增加。6 6、培养瓶中的细胞培养到出现什么现象时就不再分裂、培养瓶中的细胞培养到出现什么现象时就不再分裂 增殖？增殖？7 7、细胞出现此现象后，如果此时细胞数量并未达到人们、细胞出现此现象后

7、，如果此时细胞数量并未达到人们的需求，应该怎样办？的需求，应该怎样办？分析分析积极思考原代培养：原代培养：传代培养：传代培养：从供体获取组织或细胞后的初次培养，一般从供体获取组织或细胞后的初次培养，一般把把第第1 1代代细胞的培养与传细胞的培养与传1010代以内代以内的细胞培养的细胞培养统称为原代培养。统称为原代培养。将原代培养的细胞分离稀释后转入到新的将原代培养的细胞分离稀释后转入到新的培养基中继续培养，称为传代培养。一般培养基中继续培养，称为传代培养。一般是是1010代以后传到代以后传到4040、5050代代。阅读书阅读书4949页第三段，然后回答问题页第三段，然后回答问题8 8、传代培养

8、的细胞都能一直传代下去吗？、传代培养的细胞都能一直传代下去吗？9 9、有些细胞为何能一直传代下去？、有些细胞为何能一直传代下去？1010、人们在进行药物测试、基因表达等实验研究时，、人们在进行药物测试、基因表达等实验研究时，希望保存哪类细胞？为什么？希望保存哪类细胞？为什么？分析分析归纳归纳过程过程取取 的组织、器官的组织、器官细胞悬浮液细胞悬浮液 酶酶 1010代细胞代细胞 培养培养40-5040-50代细胞代细胞 培养培养细胞株细胞株无限传代无限传代细胞系细胞系单个细胞单个细胞加加 液液遗传物质遗传物质 改变改变遗传物质遗传物质 改变改变动物胚胎或幼龄动动物胚胎或幼龄动物物胰蛋白胰蛋白培养

9、培养原代原代传代传代未未已已三、动物细胞培养概念（三、动物细胞培养概念（What） 动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织，将它分散成组织，将它分散成单个细胞单个细胞，然后，放在，然后，放在适宜适宜的的培养基中，让这些细胞培养基中，让这些细胞生长生长和和增殖增殖。动物细胞培养的原理动物细胞培养的原理探究探究对于多细胞生物来说，细胞都生活在内环对于多细胞生物来说，细胞都生活在内环境中，根据你所学的知识，认为体外培养境中，根据你所学的知识，认为体外培养细胞应该模拟内环境的哪些内容呢？细胞应该模拟内环境的哪些内容呢？4 4、无菌、无毒、无菌、无毒3 3、全部

10、的营养物质、全部的营养物质1 1、适宜的温度和、适宜的温度和PHPH值值2 2、必要的气体条件、必要的气体条件（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等）（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等）3737, pH:7.2-7.4pH:7.2-7.4O O2 2和和COCO2 2（95%95%空气和空气和5% CO5% CO2 2 ）四、条件：四、条件：五、五、培养基的类型培养基的类型: :1 1、天然培养基：、天然培养基：2 2、合成培养基：、合成培养基：营养价值高，成分复杂营养价值高，成分复杂成分明确，便于控制

11、试验条件成分明确，便于控制试验条件（必须加入动物血清）（必须加入动物血清）请同学们继续看图请同学们继续看图2-102-10，思考动物细胞培养和动物组，思考动物细胞培养和动物组织培养的主要区别？织培养的主要区别？动物细胞培养过程需要用动物细胞培养过程需要用胰蛋白酶胰蛋白酶，而动物组织培，而动物组织培养不需要。养不需要。动物细胞与组织培养的概念：动物细胞与组织培养的概念：指指体外体外模拟动物模拟动物体内环境体内环境，将动物细胞或，将动物细胞或组织在组织在无菌、温度适宜和营养充足无菌、温度适宜和营养充足的条件的条件下培养，使其继续下培养，使其继续生长、增殖生长、增殖并维持原有并维持原有结构和功能的技

12、术。结构和功能的技术。肿瘤组织或细胞肿瘤组织或细胞 正常组织或细胞正常组织或细胞 拓展拓展-动物细胞或组织培养的难易程度动物细胞或组织培养的难易程度幼体组织或细胞幼体组织或细胞 老龄组织或细胞老龄组织或细胞分化程度低的组织或细胞分化程度低的组织或细胞 分化程度高的组织或细胞分化程度高的组织或细胞能力提升能力提升结合之前所学分析如下问题：结合之前所学分析如下问题：1 1、在动物细胞培养时，能用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？、在动物细胞培养时，能用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？为什么？2 2、如果培养过程中，细胞发生微生物的污染原则上要如、如果培养过程中，细胞发生微生物的污染原则上要如何处理？何处理？

13、小结小结 动物细胞培养动物细胞培养应用应用过程过程概念概念条件条件培养基类型培养基类型 2 2、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是细胞是 （ ） A A细胞系细胞系 B B细胞株细胞株 C C原代细胞原代细胞 D D传代细胞传代细胞1 1、动物细胞工程技术的基础是、动物细胞工程技术的基础是 （ ） A.A.动物细胞融合动物细胞融合 B.B.单克隆抗体单克隆抗体 C.C.胚胎移植胚胎移植 D.D.动物细胞培养动物细胞培养A AD D课堂反馈练习课堂反馈练习3 3、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或

14、出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞是这样的组织细胞 （ ） A A、容易产生各种变异、容易产生各种变异 B B、具有更强的全能性、具有更强的全能性 C C、取材十分方便、取材十分方便 D D、分裂增殖的能力强、分裂增殖的能力强D D4 4、在动物细胞培养的有关叙述中正确的是：、在动物细胞培养的有关叙述中正确的是：（ ）A A、动物细胞培养的目的只是为了获得大量的细胞动物细胞培养的目的只是为了获得大量的细胞分泌蛋白分泌蛋白B B、动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散C C、细胞的癌变发生在原代

15、培养向传代培养的过渡细胞的癌变发生在原代培养向传代培养的过渡过程中过程中D D、培养至培养至5050代后传代细胞称为细胞株代后传代细胞称为细胞株B B5 5、一般说来，动物细胞体外培养需要满足以下条件（、一般说来，动物细胞体外培养需要满足以下条件（ ）无毒的环境无毒的环境 无菌的环境无菌的环境 合成培养基需要加合成培养基需要加入血清入血清 温度与动物体温相似温度与动物体温相似 需要需要O O2 2，不需要，不需要COCO2 2 COCO2 2能调节培养液能调节培养液PHPHA A、 B B、 C C、 D D、 D D6 6、动物细胞培养的特点、动物细胞培养的特点 （ ）细胞贴壁细胞贴壁 有丝

16、分裂有丝分裂 分散生长分散生长 接触抑制接触抑制 减数分裂减数分裂 原代培养一般传原代培养一般传1 11010代代A A、 B B、C C、 D D、A A7 7、下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据、下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此回答：此回答：（1 1）容器）容器A A中放置的是动物器官或组织。它一般取中放置的是动物器官或组织。它一般取自自_。（2 2）容器）容器A A中的动物器官或组织首先要进行的处理中的动物器官或组织首先要进行的处理是是 ，然后用，然后用 酶处理，这是为了酶处理，这是为了使细胞分散开来，这样做的目的是使细胞分散开来，这样做的目的是 。（3 3）培养首先在）培养首先在