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1、根瘤根瘤存在于能引起植物形成冠瘿瘤的农杆菌中,诱导双子叶冠瘿瘤形成,又称肿瘤诱导质粒(tumor inducing plasmid)。 Ti质粒第1页/共10页第2页/共10页3改造后的Ti质粒载体模式leftrightMCSAMProriVirselect第3页/共10页第一步第一步:植物受伤植物受伤植物受伤后能分泌酚类化合物(如乙酰丁香植物受伤后能分泌酚类化合物(如乙酰丁香酮、酮、 羟基乙酰丁香酮),诱导羟基乙酰丁香酮),诱导Ti质粒上的质粒上的毒性基因表达。毒性基因表达。 农杆菌的感染和生存第二步第二步 感染植物感染植物农杆菌吸附于植物的表面伤口部位(常在茎的农杆菌吸附于植物的表面伤口部
2、位(常在茎的基部)。基部)。第4页/共10页第三步第三步 毒性基因(毒性基因(vir)表达)表达T-DNA上的产物催化产生过量的生长素和上的产物催化产生过量的生长素和细胞分裂素,形成植物冠瘿瘤。细胞分裂素,形成植物冠瘿瘤。virA、virG、virD、virB第四步第四步 T-DNA转移转移第五步第五步 诱导冠瘿瘤诱导冠瘿瘤T-DNA被被vir基因产物切下来,并运送到植物细胞基因产物切下来,并运送到植物细胞核里,整合到植物基因组中。核里,整合到植物基因组中。第六步第六步 土壤农杆菌代谢冠瘿碱。土壤农杆菌代谢冠瘿碱。第5页/共10页 包括原生质体共培养、悬浮细胞共培养和愈伤组织共培养。3 3、活体接种法、活体接种法农杆菌转化的方法农杆菌转化的方法 第6页/共10页1.共培养法The co-integration method 第7页/共10页农杆菌共培养侵染愈伤组织分化生芽生根2.叶盘转化法第8页
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