实验绿叶中色素的提取和分离

1、实实 验验绿叶中色素的提取和分离绿叶中色素的提取和分离【实验原理【实验原理】1.1.提取：绿叶中的色素溶于有机溶剂提取：绿叶中的色素溶于有机溶剂无水无水乙醇乙醇而不溶于水，可用而不溶于水，可用无水乙醇无水乙醇提取色素。提取色素。2.2.分离：各种色素在分离：各种色素在层析液层析液中溶解度不同，中溶解度不同，溶解度高溶解度高的随的随层析液层析液在滤纸上扩散得快，在滤纸上扩散得快，反之则慢，从而使各种色素相互分离。反之则慢，从而使各种色素相互分离。【实验步骤【实验步骤】 提取色素：提取色素：称取称取5 g5 g绿叶，剪碎，放入研钵中，加入绿叶，剪碎，放入研钵中，加入 少量少量二氧化硅、碳酸钙二氧化

2、硅、碳酸钙和和10ml10ml无水乙醇无水乙醇 研磨研磨过滤过滤收集到试管内并塞严试收集到试管内并塞严试 管口管口制备滤纸条：制备滤纸条：将干燥的定性滤纸剪成略小于试管长将干燥的定性滤纸剪成略小于试管长 与直径的滤纸条，将滤纸条与直径的滤纸条，将滤纸条一端剪去一端剪去 两角两角，在距离剪角一端，在距离剪角一端1 cm1 cm处用处用铅笔铅笔 画一条细的横线画一条细的横线画滤液细线：用毛细吸管吸取少量的滤液，沿铅笔画滤液细线：用毛细吸管吸取少量的滤液，沿铅笔 线均匀地线均匀地画一条细线画一条细线，待滤液干后，待滤液干后， 再画一两次再画一两次分离色素：将适量的层析液倒入试管中，装置如图分离色素：

3、将适量的层析液倒入试管中，装置如图 所示所示滤液细线滤液细线层析液层析液观察结果：滤纸条上呈现四条颜色、宽度不同观察结果：滤纸条上呈现四条颜色、宽度不同 的色素带，如图所示的色素带，如图所示橙黄色橙黄色叶黄素叶黄素叶绿素叶绿素a a最多最多黄绿色黄绿色1.1.为什么需要选用新鲜绿色的叶片做实验材料？为什么需要选用新鲜绿色的叶片做实验材料？提示：提示：新鲜绿色的叶片中色素含量高，从而使滤液新鲜绿色的叶片中色素含量高，从而使滤液 中色素含量较高，实验效果明显。中色素含量较高，实验效果明显。2.2.为什么研磨时要迅速？为什么研磨时要加入少量为什么研磨时要迅速？为什么研磨时要加入少量的的cacocac

4、o3 3和和siosio2 2？提示：提示：(1)(1)叶绿素不稳定，易被破坏，因此研磨要迅叶绿素不稳定，易被破坏，因此研磨要迅 速、充分，以保证提取较多的色素。速、充分，以保证提取较多的色素。 (2) (2)二氧化硅破坏细胞结构，使研磨充分。二氧化硅破坏细胞结构，使研磨充分。 (3) (3)碳酸钙可防止研磨过程中色素被破坏碳酸钙可防止研磨过程中色素被破坏。3.3.色素提取液呈现淡绿色的原因可能有色素提取液呈现淡绿色的原因可能有哪些？哪些？提示：提示：(1)(1)叶片颜色太浅。叶片颜色太浅。(2)(2)绿叶不新绿叶不新鲜。鲜。(3)(3)研磨不充分。研磨不充分。(4)(4)未加碳酸钙或未加碳酸

5、钙或加入量太少。加入量太少。(5)(5)加入无水乙醇量太多。加入无水乙醇量太多。(6)(6)研磨时间过长，部分叶绿素被破坏。研磨时间过长，部分叶绿素被破坏。4.4.为什么在制作滤纸条时，需将一端的两为什么在制作滤纸条时，需将一端的两个角剪掉？个角剪掉？提示：提示：由于液面的不同位置表面张力不同，由于液面的不同位置表面张力不同，纸条接近液面时，其边缘表面的张力较大，纸条接近液面时，其边缘表面的张力较大，层析液沿滤纸边缘扩散过快，从而导致色层析液沿滤纸边缘扩散过快，从而导致色素带分离不整齐的现象。故需将插入层析素带分离不整齐的现象。故需将插入层析液的滤纸条一端剪去两个角。液的滤纸条一端剪去两个角。

6、5.5.为什么滤液细线要重复画，且线要细、直？为什么滤液细线要重复画，且线要细、直？提示：提示：重复画线是为了增加色素的浓度，使分离出的重复画线是为了增加色素的浓度，使分离出的色素带清晰分明。画线细、直是为了防止色素带之间色素带清晰分明。画线细、直是为了防止色素带之间出现重叠。出现重叠。6.6.层析时，为什么不能让滤液细线触及层析液？层析时，为什么不能让滤液细线触及层析液？提示：提示：滤纸条上的滤液细线触及滤纸条上的滤液细线触及( (或没入或没入) )层析液，会层析液，会使滤液中的色素溶解于层析液中，滤纸条上得不到色使滤液中的色素溶解于层析液中，滤纸条上得不到色素带，使实验失败。素带，使实验失败。7.7.滤纸条上色素带宽窄不同的原因有哪些？滤纸条上色素带宽窄不同的原因有哪些？提示：提示：不同种类的色素在绿叶中的含量