结核病-tspot

1、结核病的诊疗结核病的诊疗全球结核病的流行全球结核病的流行n每每1 1秒秒新发一名病例新发一名病例n每每1515秒秒有一人死于结核有一人死于结核n每年接近每年接近1 1人口感染结人口感染结核核n每年新出现病人每年新出现病人800-800-10001000万万n每年死亡每年死亡200-300200-300万万n1/31/3人口（人口（2020亿）亿）已被或已被或曾被感染；曾被感染；全球全球2009年结核病发病率年结核病发病率我国结核病疫情我国结核病疫情WHOWHO（20102010年）年）n我国结核病发病人数130万（发病率96/10万）n涂阳发病人数58万（涂阳发病率45/10万）不同机构对肺结

2、核患者发现的贡献不同机构对肺结核患者发现的贡献(2009)2009年全球结核病疫情年全球结核病疫情第五次全国结核病流行病学抽样调查第五次全国结核病流行病学抽样调查n15岁及以上肺结核患病率：459/10万n传染性肺结核患病率： 66/10万TB/HIVTB/HIV双重感染者：31.2万TB/HIV病人：2.1万结核病人中检出艾滋病：0.8%艾滋病病人中检出结核：13%治疗转归治疗转归结核杆菌感染诊断活动性结核与潜伏感染活动性结核与潜伏感染接触活动性结核病患者暴露程度不足，结核杆菌被机体免疫力清除-没有症状,结核杆菌仍旧存在而不能被侦测 - X-光/ CT 扫描显示正常-没有抗体应答-诊断困难-

3、传统的结核感染检测只有 TST（PPD）机体被感染受机体免疫力抑制没有临床症状终身处于感染状态潜伏感染有临床症状具有传染性-结核杆菌可以通过涂片、培养检测出-胸部的 X-光或 CT 扫描显示异常 -肺外结核难以诊断 (特别是儿童)活动性结核5%5%再次激活原有的结核检测手段原有的结核检测手段一、实验室常规检测技术细菌学诊断 涂片、培养免疫学诊断 抗原、抗体胶体金分子生物学诊断 PCR二、其它检测技术PPD（TST）实验影像学检查1.病理学诊断结核分支杆菌的进化演变，使得现有的结结核分支杆菌的进化演变，使得现有的结核检测手段仍然不能满足临床的要求，具核检测手段仍然不能满足临床的要求，具体表现如下

4、体表现如下:n假阴性：免疫力低下或HIV人群，新生儿、老弱人群，药物影响n假阳性：BCG接种人群，其它分支杆菌感染，交叉污染n肺外的结核感染无法明确诊断n抗痨治疗疗效无法评价n无法排筛结核感染，造成生物制剂或移植手术治疗后病患免疫力下降，引发结核，形成医疗事故WHO关于血清学检测声明关于血清学检测声明2011年7月20日，世界卫生组织（WHO）正式声明，要求禁止将血清学检测方法（抗原，抗体，蛋白芯片等）用于肺结核和肺外结核的诊断。WHO warns against the use of inaccurate commercial serological tests for pulmonary

5、and extra-pulmonary TB. A substandard test with unreliable results TB can be wrongly diagnosed A serological test for diagnosing active TB disease is bad practice Problems of misdiagnosis The inaccurate serological tests are costly Selling substandard tests with unreliable resultsPPD-干扰素释放试验（干扰素释放试验

6、（Interferon Gamma Interferon Gamma Release AssaysRelease Assays，IGRAsIGRAs）n原理原理：淋巴细胞受到结核杆菌特异抗原刺激后释放的IFN-。n结核杆菌特异抗原：早期分泌靶抗原6 （EAST-6）和培养分泌蛋白 （CFP-10）n不受卡介苗接种影响。用于结核感染诊断 n2010年美国FDA批准：QFT-GIT（QuantiFERON-TB Gold In-Tube test）和T-SPOT 试验（the T-SPOT.TB test）- -干扰素释放实验（干扰素释放实验（IGRAs)IGRAs)被商化，被商化，用于结核感染的

7、检测用于结核感染的检测干扰素检测阴性干扰素检测阳性TB抗原多肽T细胞活化T细胞 干扰素方法学比较方法学比较TST Vs T-SPOT.TST Vs T-SPOT.TBTBn假阳性卡介苗接种环境分枝杆菌n假阴性免疫力状况年龄（新生儿、老年人）药物 特异性不受卡介苗接种影响不受环境分枝杆菌影响 灵敏度基本不受免疫力状况影响肺外结核检出率高药物、年龄- -干扰素释放实验干扰素释放实验（IGRAs)IGRAs)在欧美国家在欧美国家得到全面推广，并被写入诊疗指南得到全面推广，并被写入诊疗指南美国（CDC和儿科学会）；加拿大 （加拿大结核病委员会）；巴西（卫生部）英国（国家卫生和临床协会）；法国（国家卫生

8、局）；西班牙（西班牙肺病和胸部手术协会）；德国（德国抗结核病中央委员会）； 意大利；瑞士（瑞士肺科协会）；荷兰（实用结核病控制委员会）；丹麦（丹麦肺部医学会）；挪威（挪威公共卫生协会）；芬兰（国家卫生和福利协会）；爱尔兰（国家结核病咨询委员会）；葡萄牙；捷克共和国； 斯洛伐克； 波兰； 保加利亚；克罗地亚澳大利亚（国家结核病咨询委员会、传染病协会和澳大利亚风湿病协会）；沙特阿拉伯；南朝鲜；日本（日本结核病预防协会） WHO 和 ECDC T-SPOT.TB T-SPOT.TB 的高特异性与灵敏度，给的高特异性与灵敏度，给到临床准确、快速的诊断结果到临床准确、快速的诊断结果 特异性美国FDA临床

9、研究数据：特异性97.1%(297/306)国内临床研究数据：特异性94.1%(478/508) 灵敏度美国FDA临床研究数据：灵敏度95.6%(175/183)国内临床研究数据：特异性95.3%(624/655)T-SPOT TBWT TB -IGRA生产厂家英国oxford immunotec北京万泰许可证CE、FDA、SFDASFDA原理检测产生IFN- 细胞的比例检测上清中IFN- 的含量细胞分离白细胞分离不需特定操作环境细胞培养室及细胞培养箱普通实验室，普通恒温箱技术需求细胞分离/培养WTispot检测普通Elisa检验检测性能*灵敏度：灵敏度：85%-97%85%-97%特异性：8

10、6% -100%灵敏度：82%-93%特异性：特异性：94%-100%94%-100%复星复星VS万泰万泰T-SPOT.T-SPOT.TBTB在肺结核治疗中结果分析在肺结核治疗中结果分析结核治疗效果评估Ribeiro S, Dooley K, et alRibeiro S, Dooley K, et al. . BMC Infect Dis, 2009 BMC Infect Dis, 2009 方法：在肺结核治疗中，用T-SPOT.TB方法评估治疗效果。在治疗开始前，治疗16周和24周后，分别计数ESAT-6和CFP-10刺激产生的斑点数。图1. 所有研究对象ESAT-6, CFP-10和总R

11、D1在治疗前，16周后和24周后的平均斑点数（n=58）在24周完整疗程后，ESAT-6, CFP-10和总RD1产生的平均SFCs分别从42.7, 41.2和83.8降到23.3, 23.2和46.5 。T-SPOT.TB试验中检测的由RD1特异T细胞产生的-干扰素与肺结核患者在治疗中的结核杆菌量直接相关。T-SPOT.TBT-SPOT.TB 技术被用于结核感染的筛查，技术被用于结核感染的筛查，结核病辅助诊断，疗效评价等结核病辅助诊断，疗效评价等1、结核病辅助诊断/疗效评价“菌阴”结核病患者的辅助诊断肺外结核的鉴别诊断抗痨治疗的疗效评价2、免疫力低下/受抑制患者的结核诊断/感染筛查使用生物制

12、剂/免疫抑制剂患者的结核感染筛查HIV感染者/肾透析患者/器官移植患者3、儿童结核病的辅助诊断4、结核密切接触者/高危人群的结核感染筛查结核病患者的家属/医务工作者/监狱囚犯5、接触追踪T-SPOT.TBT-SPOT.TB检测的临床意义与缺点检测的临床意义与缺点T-SPOTT-SPOT.TB .TB 的临床应用的临床应用儿童结核诊断血液科，神经内科，骨科等肺外结核诊断血透，移植前的结核筛查HIV并发结核IBD，克罗恩病与结核分辨呼吸与结核诊断及疗效跟踪风湿免疫用药前排筛结核发热感染结核排筛结核 引发不孕试管婴儿手术前结核筛查科室应用科室应用n传染/感染科临床开展的代表性医院：上海华山医院等2-

13、3周以上的不明原因发热病人的结核感染排筛诊断阴性结果95%以上可排除结核感染诊断阳性结果证明结核感染，要确认是否是疑似病变部位有暴露性结核则需要根据临床症状，接触史以及胸片等其它手段综合判定发热感染结核排筛n风湿免疫科临床开展的代表性医院：上海仁济医院等生物制剂/免疫抑制剂使用前的结核筛查肺结核与肺间质病的鉴别诊断结脑”和“狼脑”的鉴别诊断写入由全国风湿病学权威署名的英夫利西单抗治疗前结核预防与管理专家建议风湿免疫用药前排筛结核科室应用科室应用n呼吸科/结核科临床开展的代表性医院：上海肺科医院等呼吸系统疾病与结核鉴别诊断胸水/心包积液鉴别诊断肺外结核辅助诊断2-3周以上的不明原因发热病人的结核

14、感染排筛呼吸与结核科室应用科室应用n消化科腹水待查肠结核的鉴别诊断发热待查生物制剂治疗前结核筛查（克罗恩病，炎症性肠病）IBD，克罗恩病与结核分辨科室应用科室应用n儿科儿童肺结核的辅助诊断儿童肺外结核的鉴别诊断n卡介苗（ BCG ）接种PPD结果不准确n儿童肺结核干咳不排痰，其它方法几乎无法诊断n肺外结核多儿童结核诊断科室应用科室应用n移植，HIV感染者并发结核临床开展的代表性医院：上海公共卫生中心等在移植手术前排筛结核，以避免术后病患免疫力下降后引发暴露性结核，引起医患纠纷。HIV病人容易并发结核病。上海华山医院在2008年中华感染病杂志就已发表过“酶联免疫斑点法在诊断艾滋病合并结核病”IBD，克罗恩病与结核分辨科室应用科室应用n其它科室神经内科，结核性脑膜炎的辅助诊断肾内科，肾结核的鉴别诊断，血透患者的结核筛查内分泌科，糖尿病患者的结核筛查血液科，