公开课动物细胞培养ppt课件

1、12动物细胞工程常用的技术手段：动物细胞工程常用的技术手段：动物细胞培养、动物细胞培养、 动物细胞核移植、动物细胞核移植、动物细胞融合、动物细胞融合、 单克隆抗体单克隆抗体思考：思考：植物细胞工程常用的技术手段有哪些？植物细胞工程常用的技术手段有哪些？植物组织培养、植物组织培养、 植物体细胞杂交植物体细胞杂交强调：强调：动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。3 烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想病人来

2、讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人？一想如何来治疗该病人？ 取该患者的皮肤进行细胞培养取该患者的皮肤进行细胞培养, ,获得足量的细胞后再移植获得足量的细胞后再移植4学习目标：学习目标：【知识能力知识能力】 1 1、动物细胞培养的过程、条件及应用、动物细胞培养的过程、条件及应用 2 2、应用细胞的基础知识，分析细胞工程的理论基础、应用细胞的基础知识，分析细胞工程的理论基础【情感态度与价值观情感态度与价值观】 1 1、讨论细胞工程技术的社会意义、讨论细胞工程技术的社会意义 2 2、认同细胞学基础理论研究与技术开发之间的关系、认同细胞学基础理论研究与技术开发之间的关系一、动物细胞培养

3、一、动物细胞培养5 概念：从动物机体中取出相关组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养基中，概念：从动物机体中取出相关组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。让这些细胞生长和繁殖。 一、动物细胞培养一、动物细胞培养原理：是细胞增殖原理：是细胞增殖 （有丝分裂）（有丝分裂） 6一、动物细胞培养一、动物细胞培养阅读阅读P53-55“哺乳动物细胞培养技术哺乳动物细胞培养技术”并思考：并思考： 1、 动物细胞生长特点是什么？动物细胞生长特点是什么？ 2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材

4、料？ 3、为什么要对取出的动物组织进行处理，使细胞分散？、为什么要对取出的动物组织进行处理，使细胞分散？ 4、用胰蛋白酶对动物组织进行处理是因为细胞间的物质主要是什么？胰蛋白酶、用胰蛋白酶对动物组织进行处理是因为细胞间的物质主要是什么？胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？真的不会把细胞消化掉吗？为什么？ 5、动物细胞培养的条件有哪些？、动物细胞培养的条件有哪些？ 6、简述动物细胞培养的操作过程、简述动物细胞培养的操作过程71、动物细胞生长特点、动物细胞生长特点：细胞贴壁：细胞贴壁： 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。要求：要

5、求： 培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。 8接触抑制：细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分裂，数量不断增加，最后形成一个单接触抑制：细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再增加。层，此时细胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再增加。50代以后代以后失去接触抑制失去接触抑制接触抑制接触抑制动物细胞生长特点动物细胞生长特点部分细胞突变，获得不死性，向部分细胞突变，获得不死性，向癌细胞方向发展，糖蛋白减少，癌细胞方向发展，糖蛋白减少，失去接触抑制（如肿瘤细胞）。失去接触抑

6、制（如肿瘤细胞）。接触抑制接触抑制9102、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？动物胚胎或幼龄动物的组织、器官，它们的细胞分化程度低，增殖能力强，动物胚胎或幼龄动物的组织、器官，它们的细胞分化程度低，增殖能力强，分裂旺盛，容易培养。分裂旺盛，容易培养。一、动物细胞培养一、动物细胞培养11123、为什么要对取出的动物组织进行处理，使细胞分散？、为什么要对取出的动物组织进行处理，使细胞分散？ 分散的单个细胞容易摄取所需的营养，排出代谢废物。分散的单个细胞容易摄取所需的营养，排出代谢废物。一、动物细胞培养一、动物细

7、胞培养134、用胰蛋白酶对动物组织进行处理是因为细胞间的物质主要是什么？、用胰蛋白酶对动物组织进行处理是因为细胞间的物质主要是什么？胰蛋白酶真胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？的不会把细胞消化掉吗？为什么？ 细胞间的物质主要是蛋白质（胶原纤维）。细胞间的物质主要是蛋白质（胶原纤维）。一、动物细胞培养一、动物细胞培养胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外，长时间的作用也会消化细胞膜胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外，长时间的作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤作用，因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。蛋白，对细胞有损伤作用，因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。 14155、动物细胞培养条件、动物细

8、胞培养条件1 1、无菌、无毒的环境、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液）（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）2 2、营养、营养（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。）（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。）3 3、温度和、温度和PHPH 36.5+ 36.5+（- -）0.50.5度度, 7.2-7.4, 7.2-7.44 4、气体环境：、气体环境： O O2 2和和COCO2 2（95%95%空气和空气和5% CO5% CO2 2 ）保证细胞顺利的生长增殖一、动物细胞培养一、动物细胞培养16一、动物细胞培养一、动物细胞培养6、过程：、过程：动物胚胎或幼龄

9、动物的组织、器官动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液细胞悬浮液胰蛋白酶胰蛋白酶10代细胞代细胞原代培养原代培养50代细胞代细胞传代培养传代培养细胞株细胞株无限传代无限传代细胞系细胞系单个细胞单个细胞加培养液加培养液遗传物质未遗传物质未改变改变遗传物质已遗传物质已改变改变（分解弹性纤维）（分解弹性纤维）从机体取出后立即培养的细胞为从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。一般培养的第原代细胞。一般培养的第1 1代细胞代细胞与传与传1010代以内的细胞称为原代细代以内的细胞称为原代细胞培养。胞培养。将原代细胞从培养瓶中取出，配制将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个成细胞悬浮

10、液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，以上的培养瓶中继续培养，一般培一般培养的第养的第1111代细胞与传代细胞与传4040代或代或5050代代称称为传代培养。为传代培养。17植物组织培养和动物细胞培养的比较植物组织培养和动物细胞培养的比较比较项目比较项目植物组织培养植物组织培养动物细胞培养动物细胞培养原理原理细胞的全能性细胞的全能性细胞增殖细胞增殖培养基状态培养基状态固体培养基固体培养基液体培养基液体培养基培养基特有成分培养基特有成分蔗糖蔗糖 植物激素植物激素葡萄糖葡萄糖 动物血清动物血清培养结果培养结果植物体植物体细胞株、细胞系细胞株、细胞系培养目的培养目的快速繁殖、培育无病毒植株快速

11、繁殖、培育无病毒植株获得细胞或细胞分泌蛋白获得细胞或细胞分泌蛋白细胞的全能性细胞的全能性细胞增殖细胞增殖固体培养基固体培养基液体培养基液体培养基蔗糖蔗糖 植物激素植物激素葡萄糖葡萄糖 动物血清动物血清植物体植物体细胞株、细胞系细胞株、细胞系快速繁殖、快速繁殖、培育无病毒植株培育无病毒植株获得细胞获得细胞或细胞分泌蛋白或细胞分泌蛋白1819 1.用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是 A都需用培养箱都需用培养箱 B都须用液体培养基都须用液体培养基 C都要在无菌条件下进行都要在无菌条件下进行 D都可体现细胞的全能性都可体现细胞的全能

12、性C巩固练习：巩固练习：20 2、下列属于动物细胞培养与植物组织培养主要区别的是、下列属于动物细胞培养与植物组织培养主要区别的是 A.培养基成分不同培养基成分不同 B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行动物细胞培养不需要在无菌条件下进行 C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能 D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株A 3、动物细胞工程技术的基础是、动物细胞工程技术的基础是A.动物细胞融合动物细胞融合 B.单克隆抗体单克隆抗体 C.胚胎移植胚胎移植 D.动物细胞培养动物细胞培养D21 4、细胞株的特点

13、是、细胞株的特点是A遗传物质没有改变，可以无限传代遗传物质没有改变，可以无限传代B遗传物质发生改变，不可无限传代遗传物质发生改变，不可无限传代C遗传物质没有改变，不可无限传代遗传物质没有改变，不可无限传代D遗传物质发生改变，且有癌变特点，可以无限传代遗传物质发生改变，且有癌变特点，可以无限传代 5、在动物细胞培养中有部分细胞可能在培养条件下无限制地传代下去，这种传代细、在动物细胞培养中有部分细胞可能在培养条件下无限制地传代下去，这种传代细胞称之为胞称之为: A原代培养原代培养 B传代培养传代培养 C细胞株细胞株 D细胞系细胞系CD226 6、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的

14、幼龄动物的器官或组织，、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞其主要原因是这样的组织细胞 A.A.容易产生各种变异容易产生各种变异 B B.具有更强的全能性具有更强的全能性 C.C.取材十分方便取材十分方便 D D.分裂增殖的能力强分裂增殖的能力强D23回答下列有关动物细胞培养的问题：回答下列有关动物细胞培养的问题： 在动物细胞培养的过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面在动物细胞培养的过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面 时，细胞会时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的停止分裂增殖，这种现象称为细胞的 。此时，瓶壁上形成的细胞层数是。此时，瓶壁上形成的细胞层数是 ，要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是 。 随着细胞传代次数的增多，绝大