实验一、普通光学显微镜的使用及细菌形态的观察

1、二、显微镜的基本结构及油镜的工作原理普通光学显微镜基本构造放大倍数放大倍数= =物镜放大倍物镜放大倍数数目镜放目镜放大倍数大倍数 在显微镜的光学系统中，在显微镜的光学系统中，物镜的性能物镜的性能最最为关键，它直接影响着显微镜的分辨率。而在普为关键，它直接影响着显微镜的分辨率。而在普通光学显微镜配置的几种物镜中，油镜的放大倍通光学显微镜配置的几种物镜中，油镜的放大倍数最大，对微生物学研究最为重要。与其他物镜数最大，对微生物学研究最为重要。与其他物镜相比，油镜的使用比较特殊，需相比，油镜的使用比较特殊，需在载玻片和镜头在载玻片和镜头之间加滴镜油之间加滴镜油。二、显微镜的基本结构及油镜的工作原理低倍

2、镜的操作低倍镜的操作1. 1. 置显微镜于固定的桌上。置显微镜于固定的桌上。2. 2. 旋动转换器，将低倍镜移到镜筒下方与之对直。旋动转换器，将低倍镜移到镜筒下方与之对直。3. 3. 转动反光镜向着光源处，同时用眼对准目镜，仔细观转动反光镜向着光源处，同时用眼对准目镜，仔细观察，视野亮度均匀。察，视野亮度均匀。4. 4. 将标本放在载物台上，使观察的目的物置于圆孔的正将标本放在载物台上，使观察的目的物置于圆孔的正中央。中央。5. 5. 将粗调节器向下旋转，将粗调节器向下旋转，眼睛注视物镜眼睛注视物镜，以防物镜和载，以防物镜和载玻片相碰，当物镜的尖端距载玻片约玻片相碰，当物镜的尖端距载玻片约0.

3、5cm0.5cm处时停止旋转。处时停止旋转。6. 6. 左眼向目镜观察，调节粗、细调节器直至目的物清晰左眼向目镜观察，调节粗、细调节器直至目的物清晰为止。为止。高倍镜的操作高倍镜的操作1. 1. 使用高倍镜之前，先用低倍镜观察，将目的物移至视使用高倍镜之前，先用低倍镜观察，将目的物移至视野正中央。野正中央。2. 2. 旋动转换器换成高倍镜，调节细调节器直至目的物清旋动转换器换成高倍镜，调节细调节器直至目的物清晰；如果高倍镜触及载玻片应立即停止旋动，说明原来低晰；如果高倍镜触及载玻片应立即停止旋动，说明原来低倍镜没有调准焦距，应重调低倍镜，找到目的物。倍镜没有调准焦距，应重调低倍镜，找到目的物。

4、油镜的操作油镜的操作1. 1. 如果用高倍镜未能看清目的物，则可用油镜。应先用如果用高倍镜未能看清目的物，则可用油镜。应先用低倍镜和高倍镜检查标本片，将目的物移到视野正中。低倍镜和高倍镜检查标本片，将目的物移到视野正中。2.2.在载玻片上滴一滴香柏油，将油镜移至正中在载玻片上滴一滴香柏油，将油镜移至正中央，使油镜头浸没在油中，刚好贴近载玻片。用央，使油镜头浸没在油中，刚好贴近载玻片。用细调节器细调节器微微向上调即可。微微向上调即可。增加照明亮度增加照明亮度 油镜的放大倍数可达油镜的放大倍数可达100100 ，放大倍数这样大的镜头，放大倍数这样大的镜头，焦距很短，直径很小，但所需要的光照强度却最

5、大。焦距很短，直径很小，但所需要的光照强度却最大。 从承载标本的玻片透过来的光线，因介质密度不同从承载标本的玻片透过来的光线，因介质密度不同（从玻片进入空气，再进入镜头），有些光线会因折射或全（从玻片进入空气，再进入镜头），有些光线会因折射或全反射，不能进入镜头，致使在使用油镜时会因射入的光线较反射，不能进入镜头，致使在使用油镜时会因射入的光线较少，物像显现不清。所以为少，物像显现不清。所以为了不使通过的光线有所损失，了不使通过的光线有所损失，在使用油镜时需在油镜和玻在使用油镜时需在油镜和玻片之间加入与片之间加入与玻璃的折射率玻璃的折射率相仿的镜油（通常使用香柏相仿的镜油（通常使用香柏油，其折

6、射率油，其折射率n =1.52n =1.52）。）。增加了视野的进光量，从而增加了视野的进光量，从而使物象更加清晰。使物象更加清晰。增加显微镜的分辨率增加显微镜的分辨率 显微镜的分辨率或分辨力（显微镜的分辨率或分辨力（resolution or resolving resolution or resolving powerpower）是指显微镜能辨别两点之间的最小距离的能力。从）是指显微镜能辨别两点之间的最小距离的能力。从物理学角度看，光学显微镜的分辨率受光的干涉现象及所用物理学角度看，光学显微镜的分辨率受光的干涉现象及所用物镜性能的限制，可表示为：物镜性能的限制，可表示为：式中：式中：=光波

7、波长光波波长（平均（平均0.550.55 m)m) na=na=物镜的数值孔径值。物镜的数值孔径值。nad2分辨率 数值孔径则取决于物镜的镜口数值孔径则取决于物镜的镜口角和玻片与镜头间介质的折射率，角和玻片与镜头间介质的折射率，可表示为：可表示为： na=na=n n sin(/2 sin(/2） n:n: 物镜和被检标本间介质的折物镜和被检标本间介质的折射率。射率。 ：镜口角。镜口角。 以香柏油为介质的油镜所能达以香柏油为介质的油镜所能达到的数值孔径（到的数值孔径（nana一般在一般在1.21.21.41.4）要高于低倍镜、高倍镜）要高于低倍镜、高倍镜等物镜（等物镜（nana都低于都低于1.01.0