饥饿处理对江黄颡鱼血液pH值的影响论文

1、毕 业 论 文题 目： 饥饿处理对江黄颡鱼血 液pH值的影响姓 名： 李能勋学 号： 教 学 院： 地理与生命科学学院专业班级： 生物科学2009级指导教师： 肖玲远（副教授）完成时间： 2013年 05月 20日 毕节学院教务处制 目 录摘要iAbstractii1.引言11.1简介11.2黄颡鱼生理学研究进展11.3黄颡鱼研究的目的和意义12.研究的材料和方法22.1材料22.1.1实验鱼22.1.2器材和试剂22.2方法22.2.1购鱼22.2.2驯养22.2.3分组处理22.2.4预实验32.2.5正式实验43.结果与分析53.1第一阶段处理10天，实验组，饥饿处理，对照组，正常投食，

2、血液PH值变化53.2第二阶段处理20天，实验组,饥饿处理，对照组正常投食，血液PH值的变化53.3结果64.讨论7主要参考文献9致谢10饥饿处理对江黄颡鱼血液PH值的影响 作者姓名：李能勋 专业班级：2009级生物科学专业学号： 指导教师：肖玲远（副教授） 摘要：将市场上购买的江黄颡鱼数十条在实验室养殖1015天，待其体内各项生理指标稳定后，选取形态大小相似的江黄颡鱼40条，随机分成两组（各20条）：一组为实验组，进行饥饿处理，第一阶段处理10天，第二阶段处理20天后分别抽取血液，并用PH计测定其PH值。另一组为对照组，进行正常喂食，同样在10d、20d后分别取血测定其pH值。最终发现，饥饿

3、对江黄颡鱼血液PH有一定的影响，实验组（饥饿处理）血液PH值要小于对照组（给予正常投食），进一步观察可以发现，第二阶段饥饿20d后血液pH值比第一阶段饥饿10d后的血液PH值下降的要多，由此可得出，在一定条件下，饥饿可使江黄颡鱼血液PH值降低，并且随着饥饿时间的延长，其PH值下降的越明显。 关键字：饥饿；江黄颡鱼；血液；PH值Effects of pH of blood with Hunger Treatment on Pseudographs ChellianCandidate: Nengxun Li Major: 09 session of Biological SciencesStude

4、nt No.: Advisor:LingyuanXiao(Associate Professor）Abstract: 40 specimen of Pseudographs Chellian bought from the market, placed in the laboratory and cultured 10 to 15 d,When their blood index was steady, Divided them into two groups, one was experimental group, the other was control group. Experimen

5、tal group was hunger treatment, the control group was given food, Treating them with two stage, the first stage treated 10 d, the second stage treated 20 d and then through extracted blood from the P. Chellian The pH meter was used to determine, The results of experiment finally found that hunger ha

6、s certain influence on P. Chellian blood PH, The experimental group (hunger treatment) blood pH is smaller than that of the control group (given normal feeding), and further observation can be found, the second stage blood pH of experimental group declined much more than the first stage. Based on th

7、ese situation can draw such a conclusion, on some condition, hunger had a decreasing tendency on blood pH of P. Chellian, and the pH value declined much more with the contention of hunger. Key words: Pseudographs Chellian；hunger；pH of blood1.引言1.1简介黄颡鱼，又名黄腊丁，属鲇形目，鲿科，黄颡鱼属，有四种：岔尾黄颡鱼，江黄颡鱼，光泽黄颡鱼，瓦氏黄颡鱼。黄

8、颡鱼体呈黄色，背面稍黑，腹面呈白色，头较大且扁，须四对，大多数种上颌须比较长。口下位，属无鳞鱼，背鳍和胸鳍的硬刺很发达，很尖，并且刺尖部带有毒性，为淡水刺毒鱼类中毒性较强的鱼类之一。另外黄颡鱼在搬运时容易相互之间划伤，划伤后，伤口容易感染，最终导致死亡。黄颡鱼多在静水中或缓慢流动的河水中活动，并沿底栖水底生活，白天底栖在湖泊水底，夜晚并游到水上面觅食。对环境的适应能力较强。但其耐氧能力不是很强，在缺氧的状况下，其会出现浮头，如果在极低氧浓度环境中的话，就会窒息而死亡。因此在实验室放养时，应时刻用充氧泵充氧。或者将其放入循环水中。黄颡鱼为杂食性动物，并且主要以肉食性为主，其取食多数在夜间进行，主

9、要取食对象为：小鱼，虾，各种陆生或者是水生的昆虫，小型的软体动物和其他的水生无脊椎动物。而我们在实验时主要给予投喂黄粉虫，约两天给予投喂一次，每次投喂2条（34g/条）。黄颡鱼的食性随着季节的变化而变化，并且不同种的黄颡鱼其食性也有很大的差异。1.2黄颡鱼生理学研究进展有关黄颡鱼生理生化方面的研究目前已有报道，如对瓦氏黄颡鱼血清的鳞组分的测定1；黄颡鱼消化器官蛋白酶和淀粉酶活性测定分析2；淡水白鲳、团头鲂、黄颡鱼的主要消化酶活性对比研究3；中华倒刺鲃、黄颡鱼和华鲮的消化酶活性的比较分析4；黄颡鱼不同组织中同工酶的表达模式的研究等5；黄颡鱼血清免疫球蛋白的纯化及分子量的初步测定；红细胞脆性和Hb

10、与水体pH值的关系6等。但对饥饿处理对江黄颡鱼血液pH值影响的研究还未见报道。1.3黄颡鱼研究的目的和意义黄颡鱼，又名黄腊丁，其肉质鲜美，营养丰富，深受广大消费者所喜爱。但因为其生长缓慢，且又容易患其它疾病，容易划伤，分布较为狭窄，死亡率高等等，因此得不到大规模的养殖和推广，致使其价格较为昂贵，使广大群众难于购买。为此本实验研究饥饿对黄颡鱼血液PH影响，其目的就是为了丰富黄颡鱼在饲养、疾病防治等方面基础知识，从而为黄颡鱼大面积养殖及提高经济效益和食用推广提供理论依据。2.研究的材料和方法2.1材料2.1.1实验鱼实验鱼为江黄颡鱼，雌雄兼有，形状大小基本相似（体长约1012厘米），身体健壮，并且

11、在实验室饲养了一段时间，其体内各项生理指标已稳定。2.1.2器材和试剂 器材：PH计(上海今迈仪器仪表有限公司生产)，烧杯，温度计，滤纸，吸水纸，试管，注射器（带针头），解剖器，玻璃棒，容量瓶，酒精灯，石棉网，滴管。 试剂：PH计缓冲液，蒸馏水，肝素钠溶液,复合电极的外参比补充液。2.2方法2.2.1购鱼 购买体型大小、健康状况一致的江黄颡鱼数十条，在搬运回实验室的过程中要在容器里多放点水，尽量减少震动，以防止体表划伤而引起感染。2.2.2驯养 由于刚够买回来的鱼进入了一个新的环境，其体内的很多生理指标还不稳定，需要一定的适应过程，因此必须先进行侍养性喂养。在刚买过来的头几天，首先必须对鱼进行

12、消毒处理，消毒剂可选用高锰酸钾、孔雀石绿，高锰酸钾浓度为10ppm，孔雀石绿浓度为2ppm，消毒时间大约一周，每天一次。消毒处理结束后，将其放入循环水中，循环设备可以不断更新水质，清理杂质，并且还可以清理水里面的一些细菌等，使鱼能够更好，更平安的生存。当养殖到其能够吃东西时（投喂黄粉虫、蚯蚓），即已表明其体内各项生理指标基本稳定，可以进行分组处理了。2.2.3分组处理将鱼在实验室饲养了一段时间(约半个月左右)，待其能够吃食物时，表明其体内的各项血液生理指标已基本稳定，即可进行分组，分组时一定要注意随机性，这样才能保证每一组中的鱼体型大小基本一样。分成两组，一组为实验组，进行饥饿处理；另一组为对

13、照组，给予正常投食，让其正常生活，约每两天投喂一黄粉虫。处理两个阶段：第一阶段处理10天，第二阶段处理20天。在处理过程中，应随时注意观察其吃食等生活状态。2.2.4预实验为了确保实验能够成功，为了能够得到比较精确的数据，在实验之前，必须多次进行预实验，以尽可能的熟悉实验操作，并尽可能的减少误差。在预实验过程中，着重掌握PH计的使用，还有抽血、取血等基本操作过程。PH计的使用：本次实验所选用的PH计为PHS3C型实验室PH计（上海今迈仪器仪表有限公司生产），该仪器测量精度高（为0.01级），且反应非常灵敏，测量非常方便。PH计在测量之前应进行标定（以减少测量结果精准性）。标定用缓冲液为混合物磷

14、酸盐、邻笨二甲酸氢钾、四硼酸纳。标定之前事先配好这三种标准的缓冲溶液。 标定的缓冲溶液一般第一次用PH6.86的溶液，即0.025molkg混合物磷酸盐溶液，第二次选用接近待测溶液pH值的缓冲液。如果待测溶液为酸性，就应选pH4.00邻笨二甲酸氢钾缓冲液，如果待测溶液为碱性，就应选pH9.18四硼酸纳缓冲液。一般情况下，仪器在24h内不需要标定。标定完成后，用清水清洗电极后即可对待测溶液进行pH值测量。 PH值测量：标定后的仪器，即可测量待测溶液的pH值。但这里要注意如果待测溶液温度与标定溶液温度相同时或者是不同时，它们所进行的测量步骤也不尽相同。其具体操作步骤如下：待测溶液温度与标定溶液温度

15、相同时，测量方法如下：用蒸馏水清洗电极的头部，再用待测溶液清洗一次。用玻璃棒搅动待测溶液，并摇动，使溶液混合均匀，再将电极插入待测溶液中，这时就能在显示屏上读出待测溶液的pH值。待测溶液温度与标定溶液温度不相同时，其操作方法如下：用蒸馏水清洗电极的头部，再用待测溶液清洗一次。用温度计测出待测溶液的温度值。按pH计上的“温度”键，使仪器显示为待测溶液的pH值，然后再按确认键。用玻璃棒搅动待测溶液，并摇动，使溶液混合均匀，再将电极浸入待测溶液中，这时在显示屏上就可以读出待测溶液的pH值。数据测量结束后，应将电极保护套套上，并且电极保护套内应加少量的外参比补充液。以保持电极的玻璃球湿润，切记浸泡到蒸

16、馏水中，复合电极的外参比补充液为浓度3molL的氯化钾溶液。抽血和取血：取血部位一般为尾静脉和靠近心脏的主大动脉。首先将鱼固定住，然后解剖，解剖时应十分小心，不要剪破心脏主大动脉，用玻璃分针找到心脏的主大动脉，找到后将已用肝素浸润过的注射器插入靠近心脏的大动脉中，缓慢的抽取血液，抽完后又继续找到尾静脉，又再抽取。抽血时应格外的小心，不要将血液往外流，以保证血量。另外抽血时务必不要抽取流到外面的血液，因为外面的血液已经和组织液相混，血液已被稀释，这样测出来的pH值已经不在是血液本身的pH值。另外在抽取血液的整个过程中，动作要快，以保证血液的新鲜，防止血液的凝固。因此在预实验中应多次反复的练习。2

17、.2.5正式实验预实验之后，并已对抽血、取血，以及实验仪器等各项操作非常熟悉的情况下，开始正式实验。分组处理10天以后，即第一阶段实验正式开始。第一天做实验组，第二天做对照组。实验时，用干净一次性注射器从黄颡鱼心脏大动脉和尾静脉处抽血，抽血时，动作要迅速，以防凝固，抽出的血量应足以浸没PH计复合电极玻璃泡，这样才能真实地测出其血液的PH值。将抽取出的血液依次放在PHS3C型PH计下测量其血液PH值。在测完一个数据以后，在进行下一个数据测量之前。PH计电极需洗干净，并且应用蒸馏水清洗，清洗后，应待其晾干，或用吸水纸吸干外面的水珠，方可进行测定。否则血液将会被稀释了。导致测得的数据不精准，将会增大

18、误差。在将血液放入PH计电极下测量时，读数时，应待其示数稳定后，即（PH计显示屏上的数字停止跳动时），即为该条鱼血液的PH值，至少应停留2到3分钟。最后将以上测得的实验组、对照组数据进行统计分析。3.结果与分析3.1第一阶段处理10天，实验组，饥饿处理，对照组，正常投食，血液PH值变化表一：饥饿处理对黄颡鱼血液PH值影响序 号PH值分 组 第一阶段（处理10天后血液PH值）第二阶段（处理20天后血液PH值）实验组对照组实验组对照组17.027.356.897.1226.917.056.846.8537.497.527.566.7846.886.936.737.4456.837.196.267.

19、5667.027.757.077.4076.847.426.227.2187.096.896.476.9496.936.776.517.09106.977.246.737.33均数6.9987.2116.728*7.172注：* 表示差异显著 * 表示差异极显著实验数据经excel统计软件处理并用双样本异方差t检验可知，第一阶段处理10天（实验组饥饿10天，对照组给予正常投食）后，P(T=t) 双尾 =0.,大于0.05，由此可知两组鱼血液pH指标有一定的差异，但不是很显著，实验组血液pH指标要略小于对照组。结果表明饥饿处理后的江黄颡鱼血液pH值有降低趋势。 3.2第二阶段处理20天，实验组,

20、饥饿处理，对照组正常投食，血液PH值的变化第二阶段，处理20天后，将实验数据经excel统计软件处理并用双样本异方差t检验可知，P(T=t) 双尾 = 0.，小于0.01，由此可知两组鱼血液pH指标值存在明显的差异，实验表明随饥饿时间延长江黄颡鱼血液pH值降低越为显著。3.3结果实验结果经excel统计软件处理并用双样本异方差t检验可知，第一阶段处理10天，实验组和对照之间不存在显著差异；而在第二阶段处理20天当中，实验组和对照之间存在极显著差异。由图1、2观测值还可看出，第二阶段所得的数据波动比第一阶段所得的数据要大一些，出现波动的原因可能是鱼与鱼之间个体的差异导致。 0第n条鱼124567

21、891036.206.406.606.807.407.007.207.607.70血液pH值实验组对照组图1 第一阶段处理，实验组和对照组血液pH数值变化波动情况 0第n条鱼124567891036.206.406.606.807.407.007.207.607.70血液pH值实验组对照组图2 第二阶段处理，实验组和对照组血液pH数值变化波动情况4.讨论鱼类的各项血液生理指标正常稳定对于鱼的正常生长发育均起着极其重要的作用，因此鱼类血液的各项指标可以作为衡量鱼类机体健康状况的重要参数之一，然而鱼类的血液指标容易受各方面因素的影响，从而影响到其正常的生长发育和生存。这些因素如：饥饿、温度（高温或

22、低温）、溶氧量、盐浓度、重金属离子、还有不同的生态环境等，这些因素的改变，终将导致鱼体正常生理及生化等相关指标改变【7】。鱼类一般能经受住长时间的饥饿，如有些黄颡鱼能饥饿到长达65天左右的时间，在饥饿的过程中，其体内将发生一系列生理生化的变化，以满足其生命活动状态，尤其是一些血液方面的指标，如血液pH值、血红蛋白、红细胞、白细胞、红细胞脆性、全血比重等，较容易受其影响。如饥饿对月鳢几项血液指标的影响【8】，饥饿对养殖鲈鱼血液生理生化指标的影响【9】。血液pH值即血液内氢离子浓度的负对数，凡是细胞内生化的改变均与血液pH有密切的关系，只有当血液的pH值维持在相对恒定范围时，机体才能维持正常的代谢

23、及生理功能活动，如果超出这个范围，就会导致鱼体内环境稳态失调，终将导致其体内正常代谢及生理功能发生紊乱，进而对其生长和生活造成影响，严重者甚至会导致机体死亡。导致机体血液PH值降低的原因常见有代谢及呼吸性酸中毒【10】，另外还有食物方面，进食酸性食物过多，可造成血液偏酸性。试验结果表明，在饥饿初期，机体由于通过自身适应性机能调整，血中PH几乎无明显改变，但随着饥饿时间延长，血液PH值发生明显改变。研究资料表明，饥饿状态下瓦氏黄颡鱼对身体储能物质的动用在饥饿后期主要为脂肪【11】， 而脂的有氧氧化化结果将导致体内脂肪酸含量升高，脂肪酸氧化释能同时，也会致体内CO2升高。在饥饿状态下, 对瓦氏黄颡

24、鱼的氨氮排泄率测定结果表明, 瓦氏黄颡鱼的氨氮排泄率在饥饿前期先升高后下降; 在饥饿 1020 d氨氮排泄率无显著变化，20 d后氨氮排泄率呈下降趋势【11】。氨氮排泄下降，致使体内血中氨氮含量升高，而氨氮升高使鱼体鳃组织破坏，且降低血液载氧能力，使呼吸机能下降【7】，呼吸机能下降将导致体内CO2积聚，血PH下降。综上所述，饿使江黄颡鱼血液PH降低原因，可能是饥饿使体内营养及能源物质缺乏，导致鱼体呼吸机能减弱，酸性物质在体内积聚过多而致，但具体发生机制还有待进一步探讨和研究。 参考文献1 叶勤，李云，廖戎等. 瓦氏黄颡鱼血清磷组分的测定及应用. 化学研究与应用，2002， 14（2）：239231.2 余涛，史立才，曲东风等. 黄颡鱼消化酶活性的初步研究. 吉林农业大学学 报，2002，24（5）：9294.3 陈章宝，