HPLC法测定利心丸中丹皮酚的含量

1、HPLCHPLC法测定利心丸中丹皮酚的含竄鄂春华 王徳才(黑龙江省七台河市药品检验所154600)摘要 目的：建立HPLC法测定利心丸中丹皮酚的含量测定方法。方法：色谱柱 为 AlltimaC18(250mmX : 5um),以甲醇一水(60： 40)为流动相,流速为 ml*mind 检测波长274nm,结果:丹皮酚的现性范围是ml“，匸,平均加样回收率为%, RSD%结论：该方法结果准确、重复性好，可用于该制剂的质量控制。 关键词 利心丸；丹皮酚；高效液相法Determination of paeonol in Lixin Pills by HPLC EChunHua,WangDeCai(Q

2、itaiheInstituteforDrugControl,Heilongjiang,Qitaihe 154600, China)ABSTRACTABSTRACT ObJectiveObJective：ToTo establish determination method of paeonol in Lixin Pills by HPLCMethod:UsingMethod:Using a column C18(250mm X 46mm,5um) and a mixture of methanol-water (60:40)as the mobile phase with flow rate

3、of mb detection wavelength was at 274nmResult:Result: The linear range was -min1 (r=,The average recovery was % (RSD = = %),Concluslon%),Concluslon：TheThe method is accurate,reproducible and can be applied in quality control of in Lixin Pills pillsKEYKEY WORDSWORDS Lixin pill; paeonokHPLC利心丸是由貂心、地黃、

4、牡丹皮、朱砂、茯苓、天冬、防己、琥珀等多味中 药材制成，具有养心安神之功效，用于风湿性心脏病，心动过速，心律不齐，心 力衰竭等而见心血不足之症者，为了更好控制该药品质量八利用高效液相色谱 法对处方中牡丹皮所含的有效成分丹皮酚进行了含量测定研究，精密度、重复性 均符合中国药典2005年版一部的要求可作为其质控标准。1 1仪器与试剂日本岛津LC-10Atvp高效液相色谱仪和紫外监测器，工作站N3000工作站， 对照品：丹皮酚：中国药品生物制品检定所(批号：)甲醇：色谱纯重蒸憎 水：自制样品：吉林鹿王制药有限公司，批号：070506, 070507, 0705082 2方法与结果色谱条件C18(25

5、0mmX ； 5um),甲醇一水(60： 40)为流动相,流速为mbmin1检测波 长 274nm,柱温 25 C。溶液配制221对照品溶液的制备：精密称取丹皮酚对照品适量，加甲醇制成lml含20ug 的溶液即得222供试品溶液的制备：取本品粉末0.3g精密称定。加50%屮醇50ml称定 重量，超声45分钟。放冷，再称定重量，用50%屮醇补足减失重量，摇匀，滤 过，取续滤液即得。223阴性溶液的制备：取去除牡丹皮的阴性制剂，同供试品溶液的制备方法制 备,即得。方法和结果2.3.1线性关系考察 取丹皮酚适量，精密称定，制成1034ug-mr*既的对照品贮 备液，再精密吸取上述对照品溶液,用屮醇定

6、容至100ml,别吸取20ul对照 品溶液注入液相色谱仪测定，经线性回归，回归方程：Y = 54336X+,相关系数旦252520201515r=,线性范围是结果表明，丹皮酚在之间与峰面积积分值有良好的线性 关系。232空口干扰实验：分别取对照品溶液、供试品溶液、空白溶液各20ul注入高 效液相色谱仪测定，记录色谱图1,结果标明，空白样品与丹皮酚峰保留时间相 同的位置上无干扰峰出现。505045454040353510105 5 0 0A对照品C阴性对照2.3.3精密度试验吸取浓度为的对照品溶液20ul注入高效液相色谱仪测定 6 67 78 89 91010111112121313141415

7、150 01 12 23 34 45 56 67 78 89 9101011111212131314141515ImnlImnlB供试品IAE 一连续6次，测得峰面积RSD = %(n=6)表明精密度良好。234供试品溶液稳定性试验：取供试品溶液(批号：070506)于12h精密吸取 20ul注入高效液相色谱仪测得峰面积RSD二 (n = 5)结果表明供试品溶液在 12h内稳定性良好。235重复性试验:配制供试品溶液(份批号:070506)共6份分别吸取20ul溶 液注入液相色谱仪测定，结果平均含量亡分RSD = %(n = 6)表明方法重复性良 好。2.3.6加样回收试验 取批号070506

8、利心丸研碎的粉末0.5g,精密称定共6份， 分别精密加入ugm巴丹皮酚对照品溶液2ml,混匀后，其它处理同含量测定， 分别吸取20ul溶液，注入液相色谱仪测定结果见表1。編号 样品称重(g 样品的含址(mg)加入址(mg)测得虽(叫)回收率()平均回收RSD(%)3456样品含量测定照溶液测定方法制备样品溶液，分别精密吸取供试品溶液20ul注入高效液 相色谱仪，测定结果见表2表2样品含量测定结果(n = 3)批号含量(mgg“)0705060705070705083 3讨论根据文献报道的流动相进行筛选，最后选定屮醇一水(60：40)测定波长274nm 出峰时间约12分钟,且基线稳定，对照品与样品中其它组分达到基线分离，并且 阴性样品色谱中无干扰峰出现