园艺植物病理学

1、园艺植物病理学实习部分实习一、植物病害标本的采集和制作实习二、园艺植物病害的调查与损失估计实习三、园艺植物病害的诊断教学实习的目的是让学生将课本上学习到的理论知识应用到具体实践中，提高同学们解决实际生产问题的能力，特别是鉴定病害标本的能力。教学实习将为开展科研和技术推广工作打下一定的理论基础。因此，实验实习时应切实注意以下各点：一、实验实习前，必须认真对实验实习指导内容进行认真预习，明确目的要求、方法和步骤，熟悉主要操作环节，做好准备工作。二、准备好实验用具3H-4H绘图钢笔、橡皮、直尺或三角板、绘图纸、报告纸、记录本。三、实习小组在实习前应仔细清点实习用具、材料，填写仪器使用卡片，如有不符或

2、损坏，应及时报告指导教师。四、严格遵守操作规程，服从教师指导，认真完成实验实习规定的操作和观察项目，培养严肃认真、一丝不苟的科学态度和工作作风。五、在实验实习场所，必须保持安静；爱护仪器，珍惜标本，节约药物，实验实习用品、材料等用后要及时整理，放归原处，不得乱拿乱用或随意丢弃，如有损坏按规定处理。六、注意安全，严防着火、触电和药物中毒。七、认真记录实验实习结果，写好实验实习报告（用统一规定的实验实报告纸）或完成其他作业，按时交批，由指导人员进行考核、评定成绩。作业力求简明扼要，清晰正确，反对单纯抄袭、临摹参考书。如实验实习报告不符合要求，必须退回重做。缺实验、实习时，应申请补做。八、每次实验实

3、习结束时，由指导人员检查后，方可离开现场实习一 植物病害标本的采集和制作 植物病害标本是植物病害及其分布的实物性记载。有了病害标本，就可以在室外观察的基础上，在室内进一步对病害进行研究。尤其是对于系统地学习植物病原真菌来说，提供大量的实物标本更是不可缺少的。所以，植物病害标本的采集、制作和鉴定，是病理实验室不可忽视的基本建设工作。一、目的要求学习采集和制作植物病害标本的方法；通过标本采集能识别当地园艺植物主要病害种类及症状特征和发生情况，为积累病害标本和开展植保工作奠定基础。二、仪器及用品标本夹、标本纸、采集箱、剪刀、小刀、纸袋、塑料袋、标签、麻绳、记载本、镊子、体视显微镜、扩大镜、标本瓶、大

4、烧杯、酒精、蒸馏水、量杯等。三、实习地点野外及实验室。四、实习内容和方法(一)标本的采集1、采集标本的要求根据标本使用的目的，决定采集的数量和部位。为了提高标本的使用价值，对标本采集提出以下几点要求：（1）症状应具有典型性，标本应有典型的病状和病症，最好有不同阶段和不同部位的症状。这样才能使标本起到帮助人们正确识别病害的作用。例如苹果腐烂病在不同时期的症状更是截然不同，即形成孢子角、溃疡、裂皮、“小黑烂点”等各种症状。所以采集不同阶段的症状，对正确识别病害也是很重要的。（2）真菌病害标本应采集有子实体的。对于真菌病害来说，鉴定病原物是正确诊断病害的重要条件之一，因此要求真菌病害标本必须有病菌的

5、子实体。（3）每种标本上的病害种类应力求单纯。如果一份标本上同时有几种病害，就会混淆视线，影响鉴定，这样就没有适用价值。（4）采集时应进行必要的记载，以辅助标本不足。记载的内容应包括：寄主名称、发病情况、环境条件、以及采集日期、地点、采集人姓名等。附表植物病害采集记录采集号： 采集时间： 年 月 日寄主名称： 病原名称： 采集起点： 发病情况：发病率（%）：环境条件:采集人： 鉴定人：（5）寄主的鉴定也很重要，有些病害如锈病，不知道寄主是无法鉴定的。对于不认识的寄主植物。应将寄主鉴定所必需的部分，如枝、叶、花及果实等部分都采集齐全。2、采集标本应注意以下几点（1）适于干制的标本，应随采随压于标

6、本夹中，尤其容易干燥卷缩的标本如水稻、小麦的叶片，最好立即夹在厚书本中，否则叶片失水卷缩后无法展平。（2）柔软多汁或腐烂的标本，应用纸袋或标本纸包好，然后置于标本箱中，以免污染和挤坏标本，妨碍鉴定。（3）黑粉病类标本由于病菌孢子极易散落，所以采集时应用纸袋或标本纸包好后，再置于采集夹中或采集箱中，以免混杂妨碍鉴定。（4）每种标本采集的数量不宜过少，以便在制作和应用中留有余地。 3、采集标本的用具（1）标本夹：是用来翻晒、压制标本的木夹。由两个对称的一些木条平行钉成的栅状板组成。（2）采集箱：在野外用于临时收存新采的果实等柔软多计的标本。是由铁皮制成的扁园箱，内侧较平，外侧较鼓，箱门设在外侧，箱

7、上设有背带。（3）标本纸：用于吸收标本的水分使标本逐渐干燥，一般用吸水性较好的草纸。此外，采集标本时还要扩大镜、绳子、采集记录本和采集标鉴等。有时根据采集标本的对象不同，还需要修枝剪、高枝剪、手锯、手铲等工具。（二）标本的制作1、干标本制作法通常所说的腊叶标本就是经过压制的干标本。把适于压制的标本如植物的茎、叶以及去掉果肉的果皮等，分层压在标本夹中，放一层标本纸(每层3-4张)放一层标本，每个标本夹的总厚度以三寸左右厚为宜，用绳子将标本夹压紧后，经日晒使其干燥，干燥愈快愈能保持标本原有的色泽。夏季气温较高标本容易发酵变色，换纸宜勤。一般前三、四天应每天换纸一次，以后每二、三天换纸一次，至完全干

8、燥为止。在第一次换纸时，同时将标本整形，使其达到既美观又便于观察的要求。压制干标本，除了自然干燥外，必要时可用人工干燥法，在烘箱中或土炕上进行烘干。其温度可提高到35-50，进行快速干燥，但换纸要勤，至少两小时换一次。幼嫩或多汁的标本如花、嫩苗等可夹在两层脱脂棉中再压制。2、液浸标本制作法有些标本如多汁的果实、块茎、块根及多肉的子囊菌和担子菌的子实体等，不适于干制，而且有些标本还需要保持原色，须用浸渍法保存在标本瓶中。浸渍液的种类很多，这里介绍常用的几种：普通防腐性浸渍液：只适于防腐没有保色的作用。福尔马林50毫升酒精(95%)300毫升水2000亳升保持绿色标本的浸渍液。(1)醋酸铜浸渍法以

9、结晶醋酸铜逐渐加到50%的醋酸中，至饱和为止，(大约1000毫升50%醋酸加入15克醋酸铜既可达到饱和程度)然后将饱和溶液稀释3-4倍后使用。醋酸铜液处理标本分热处理和冷处理两种方法。热处理法是将稀释后的醋酸铜液加热至沸、投入标本。标本的绿色最初会被漂去，经3、4分钟至绿色恢复后，将标本取出，用清水洗净，保存于5%的福尔马林液中。由于热处理标本易使茎、叶变软，果实破裂，因此，亦可采用冷处理法，即将标本用2-3倍醋酸铜稀释液冷浸，经3小时绿色退掉，再经72小时又可恢复原来的绿色，然后取出用清水洗净，保存于5%的福尔马林液中。(2)硫酸铜及亚硫酸浸渍法将标本在5%的硫酸铜溶液中冷浸6-24小时，当

10、绿色恢复后取出用清水洗净，保存于亚硫酸溶液中(以含5-6%SO2的亚硫酸溶液15毫升加水1000毫升)。亚硫酸浸渍液也可用下法配制：取无水亚硫酸钠16克，溶于1000毫升水中，将20毫升浓硫酸慢慢加入上述溶液中即成。或以3%的硫酸铜溶液加热至80，将绿色标本浸入，不久绿色渐变成褐色，等其绿色恢复后立即取出用清水洗净，保存于5%的福尔马林液中，效果也很好。保持黄色和桔红色标本的浸渍液用亚硫酸浸渍液保存杏、梨、柿、苹果、柑桔、红辣椒等标本效果较好。但亚硫酸过浓，有漂白作用不能保色；亚硫酸过稀达不到防腐作用，因此，对各种标本的适宜浓度需要通过试验才能确定。在需要用较低浓度时，可加入少量酒精以增加防腐

11、能力。如果溶液中加入少许甘油，可防止标本开裂。亚硫酸浸渍液的浓度，一般用市售的亚硫酸(含SO25-6%的水溶液)配成4-10%的稀释溶液(4-10%溶液含SO2为0.2%-0.5%)即可。保持红色标本的浸渍液保存红色相当因难，因大部分的红色是水溶性的花青素形成的，而花青素又能溶于水和酒精中。常用的浸渍液为瓦查红色浸渍液：硝酸亚钴15克氯化饧10克福尔马林2.5毫升水2000毫升将标本洗净后冷浸在上述溶液中(完全浸没)14天，然后取出保存于下列浸渍液中：福尔马林10毫升酒精(95%)10毫升亚硫酸(饱和溶液)30-50毫升水1000毫升保持真菌色素的浸渍液真菌色素不溶于水者，可采用以下两种浸渍液

12、：(1)硫酸锌福尔马林溶液硫酸锌25克福尔马林(40%)10毫升水1000毫升(2)醋酸汞冰醋酸溶液醋酸汞10克冰醋酸5毫升水1000毫升真菌色素溶于水中者，可采用下述浸渍液：醋酸汞1克中性醋酸铅10克冰醋酸10毫升酒精(95%)1000毫升标本瓶的封口方法上述保存标本的浸渍液，多由易于挥发和易于氧化的药品配制，因此，很容易挥发或氧化而丧失其作用，所以，只有将标本瓶密封以后才能长久保持药液的效用。封口的方法如下：(1)暂时封口法以蜂蜡及松香各一份，分别熔化混合，加入少量凡士林调成胶状物，涂于瓶盖边缘，将盖压紧。亦可用明胶四份在水中浸数小时，将水滤去，加热溶化，拌入一份石蜡，融化混合后成胶状物，

13、乘热使用。(2)永久封口法以明胶及硝石灰各一份混合，加水调成糊状物，用于封盖，干燥后由于明酸钙的硬化而密封。亦可用明胶28克在水中浸数小时，将水滤去加热熔化，再加入0.324克的重铬酸钾，并加入适量的熟石膏使其成糊状，即可用于封口。3、标本的保藏制好的标本，除保存在标本瓶中的浸渍标本外，绝大部分是干制的腊叶标本。保存腊叶标本，一般采用以下两种方法。一般是把标本装在标本盒中，主要适用于教学示范标本和展览用标本。标本盒为具有玻璃面的纸盒、盒的大小可根据标本决定，一般以20282-3厘米为宜。装标本时，先在盒底撒一层樟脑粉，以防止虫蛀食标本。然后铺一层适当厚度的棉絮(或棉絮下面铺适量的纸屑可节省不少

14、棉絮)，在棉絮上摆好标本，并在左下角或右下角(位置应统一)放上标签，最后盖上盒盖，在标本盒的上端和下端侧面中部，各插入一枚大头针，将标本于以固定。并在下端侧面的右面加以标签注明标本的名称。另一种方法，是先将标本封在适当大小的普通油光纸夹中，再将其置于牛皮纸袋或牛皮纸中。牛皮纸袋或牛皮纸夹的大小视标本大小而定，一般以4030厘米为宜。然后在牛皮纸袋或牛皮纸夹面上贴上标签，标签上的项目应包括，寄主、病害名称、病原学名、采集人、鉴定人，采集日期及地点，采集编号等。标本应放在专用标本柜中、标本柜应能防鼠。其内部结构以层式的为好，各层以活动板相隔，每层放一种标本。柜的扣壁内侧，应留有间距，使上下贯通，以

15、便于熏蒸杀虫时毒气上下流通。柜的最下一层应作成抽屉式，以便于盛装熏蒸杀虫的药剂，标本室的防虫工作很重要，除经常注意外，应定期普遍检查，发现标本有虫应彻底消灭。防治标本虫通常用氯化苦、溴甲烷等药剂熏蒸，效果很好。标本室应设在阴凉干燥的房间，以防止标本受潮霉变。五、作业与思考题1.采集标本时应注意那些问题?2.采集当地主要园艺植物病害标本。3.制作干制标本和浸渍标本。4.记叙主要病害标本的症状特征。5.制好的植物病害标本如何保存?实习二 园艺植物病害的调查与损失估计一、 目的要求通过田间病害发病率、严重率、病情指数、损失率及防治效果的调查，了解病害在田间的发生发展情况，提高分析问题和从事调查研究的

16、能力。二、 仪器用品扩大镜、记录本、铅笔。三、实习地点学校实习农场或附近当地果园或菜田。四、实习内容和方法(一)、一般调查当一个地区有关病害发生情况的资料很少，可先进行一般调查，目的在于了解当地病害发生的一般情况。调查的面要广，要有代表性，例如调查附近果农的果树病害发生的一般情况。以小组为单位，选择不同类型的代表性果园。调查病害种类，统计发病率。将调查结果填入下表。果树病害的一般情况调查表调查地点果树种类调查人日期病害 地势 果园 土壤 水肥 品种 苗木调查时发病率备注种类名称 性质 条件来源 生育期(二)、重点调查（专题调查）经过一般调查发现的主要病害，可作为重点调查的对象，深入了解它的分布

17、、发病率、损失率、环境影响和防治效果等。调查某一具体病害的发生发展规律及防治效果等，其调查项目、次数、时间和要求则因调查目的而异。(三)、调查研究调查研究是解决病害中的怀疑问题，如侵染循环、发病因子和防治方法等。调查的区域不一定要广，但要深入，除田间观察外，更要注意访问和座谈。植物病害田间调查的基本方法及应注意的问题：1、调查的时间和次数要根据调查目的来确定。对于一般发生的病害和为害情况的调查，以在病害发生的盛期为宜；若一次调查几种植物或一种植物的几种病害，则应选适中的时期。2、取样要有代表性应根据病害种类和环境条件而定。气流传播而分布均匀的病害舅黄瓜霜霉病，样点数目可以少些，土传病害如黄瓜枯

18、萎病，样点要多，几在地形、土壤耕作不一致的地区，应分别取样。为了使调查样点具有代表性，一般采用如下几种取样方法：（1）棋盘式（图A、B）此法的正确性较大，但所用的时间也较多。（2）对角线法（图C、D、E）正确性不如棋盘式，但比较省事。（3）分别取样法（图F）即在田间每隔若干行取一行（或数行）调查。 ACD BEF取样单位应随植物种类和病害特点而相应变化。一般以面积（用于高杆宓植植物）或长度（用于密植条播作物）。取样数量是在每一调查点上取100200株或2030张叶片。叶片病害，根据分布情况，每点可检查2030张叶片。叶片取样，可随机取样，也可在一定部位联系一定情况来确定取样单位。3、注意田间记

19、载和统计进行田间调查，必须根据调查的目的和内容，对所调查的实际情况进行认真记载和统计，一般性病害调查要随时记载调查日期、地点、作物种类和品种名称、病名、发病程度（发病率和严重率）、病害分布情况、栽培情况等。作物病害调查记载调查地点调查日期 调查人 作物品种 种子来源 病名发病和在田间分布情况施肥情况 栽培方式当地温度和雨水防治方法和防治效果当地群众经验(四)、病害调查的记载方法估计作物损失所用的数据，一般有发病率（%），病情指数和损失率，也可根据目测估计。1、发病百分率(发病率)：代表发病多少，用于记载发病百分率就是等于损失率的病害，计算公式为 发病样本数发病率（%）= 100调查样本总数2、

20、病情指数(感染指数)：病情指数是指严重度，是以分级计数的方法来估计病情的，适宜于多种斑点类病害。根据病害轻重程度，人为地分为几个便于计算的级别，而以数值来代表各级严重度，常以“0”级代表无病，以最高值代表最严重的发病程度，然后再以一定的间隔，定出其它级别，级别不需太多，一般35级即可。级间差异要明显，容易判断。分级可以叶片、果实、全株或一个田块做单位，采用哪一种方法，要由病害种类决定，例如黄瓜霜霉病的分级标准：在叶片上随机取9cm2的面积,计算其中的斑点数目(斑点不认大小,明显的联合斑都应分别计算)共分五级病情指数计算公式如下 （发病级值各级病株或病叶数）病情指数=样本总数最高发病级值黄瓜霜霉

21、病的分级标准病级发病程度 代表数值 调查株数一级无病 0 8二级每个单位面积中少于4个病斑 1 15三级每个单位面积中少于4个病斑 2 20四级每个单位面积中有59个病斑 3 40 五级 每个单位面积中有10个以上病斑或叶片枯死 4 30 08+115+220+340+430病情指数= =63.5（8+15+20+40+30）4至于各级严重率与损失率的关系，亦不能直接计算，应通过药剂保护和人工诱变等对比试验估计。（三）普遍率和严重率：普遍率即病害发生的普遍程度。通常用病叶占总病叶数的百分比来表示，但在发病很不普遍时，也可用病株占总株数的百分比来表示，但应加以说明。严重率是表示植物叶片或整株的受害轻重按叶片受害面积或植株受害叶片的多少划分等级，一般可分五级。例