临床免疫学和免疫检验酶免疫技术练习

1、第九章酶免疫技术一、A11、在ELISA技术中，将抗原或抗体固相化的过程称为A、圭封闭B、固定C包被D吸附E、结合2、检测HIV感染的初筛试验常用A、对流电泳法B、酶免疫法C免疫荧光法D免疫印迹法E、PCR法3、检测HBsAg最常用的方法为A、凝集试验B、酶联免疫吸附试验C荧光免疫法D分子生物学法E、火箭电泳4、HRP与TMB反应后，加HSQ终止反应前呈A、蓝色B、橙黄色C棕黄色D黄色E、紫色5、HRP与底物QPD反应后的测定波长为A、278nmB、450nmC 403nmD 495nmE、492nm6、HRP与底物TMB反应后的测定波长为A、278nmB、450nmC 403nmD 495n

2、mE、492nm7、用于标记的HRP的RZ值应大于A 2.4B、3.0C 1.5D 3.5E、5.08酶免疫技术中酶的要求A、酶的活性要强，催化反应的转化率高，纯度高B、易与抗体或抗原偶联，标记后酶活性保持稳定C作用专一性强，酶活性不受样品中其他成分的影响D酶催化底物后产生的产物易于判断或测量，方法简单易行、敏感和重复性好E、以上都是9、酶免疫测定根据抗原抗体反应后是否需要分离结合的与游离的酶标记物而分为下述哪几种类型A、均相异相B、同相均相C异相固相D固相均相E、固相异相10、辣根过氧化物酶的酶活性基团为A、糖蛋白B、亚铁血红素C活跃糖基D醛基E、羟基11、下列说法错误的是A TMB是ELI

3、SA中应用最广泛的底物B、一般采用四甲基联苯胺作为AP的底物C AP系统的敏感性一般高于应用HRP系统HRP低D AP较难得到高纯度制剂，稳定性较HRP氐，价格较HRP高，制备酶结合物时得率也较E、B半乳糖苷酸的底物常用4-甲基酮基-R-D半乳糖苷12、下列对血清中酶活力的测定的描述哪一项是错误的A、可测定产物生成量B、可测定底物消耗量C需最适pHD需最适温度E、与底物浓度无关13、下述哪一种酶联免疫吸附实验方法最常用于抗原测定A、间接法ELISAB、反向间接法ELISAC竞争法ELISAD双抗体夹心法 ELISAE、捕获法14、选择ELISA的标记用酶，下面哪一项特性是不需要的A、具有可与抗

4、原、抗体结合的基团B、标记抗原后，酶活性保持稳定C当酶标抗原与抗体结合后酶活性可出现激活或抑制D酶催化底物反应后生成的信号易于测定、重复性好E、酶的稳定性、可溶性好15、酶免疫技术中最佳工作浓度的选定常采用A、抗原稀释法B、抗体稀释法C酶标记物稀释法D棋盘滴定法E、A+ B16、ELISA双抗原夹心法检测抗体时，固相载体包被物是A、酶标记的抗原B、酶标记的抗体C未标记的已知抗原D未标记的已知抗体E、未标记的抗抗体17、 酶联免疫吸附试验（ELISA）中应用最多的底物是A、邻苯二胺（OPDB、四甲基联苯胺（TMBC ABTSD对硝基苯磷酸酯E、以上都不是18、在双位点ELISA实验中，造成抗原检

5、测值低于实际含量的常见原因是A、固相抗体过多B、反应时间不够C标记抗体过多D待测物过浓E、酶活性过高19、ELISA中最常用的固相载体是A、聚氯乙烯B、聚苯乙烯C三聚氰胺D琼脂糖E、尼龙膜20、ELISA板包被后，最常用的封闭物质是A、人白蛋白B、人球蛋白C牛血清白蛋白D牛血清球蛋白E、鼠白蛋白二、B1、A.间接法B. 双抗体夹心法测抗原C. 竞争法测抗体D. 捕获法E. 竞争法测抗原 、以下示意图是哪一种ELISA检测模式K- o -&洗薛斬抗悻僦切A B C D E 、以下示意图是哪一种ELISA检测模式o +底詡一聲目-尿色2 1A B C D E 、以下示意图是哪一种ELISA检测模式

6、A B C D E答案部分一、A11、【正确答案】C【答案解析】将抗原或抗体结合在固相载体上的过程称为包被。【该题针对“酶免疫技术的特点”知识点进行考核】【答疑编号101317230,】2、【正确答案】B【答案解析】 酶联免疫吸附试验是最常用的HIV抗体初筛试验。【该题针对“酶联免疫吸附试验（ELISA）”知识点进行考核】【答疑编号101317219,】3、【正确答案】B【答案解析】 检测HBsAg最常用的方法为酶联免疫吸附试验（ ELISA）。【该题针对“酶联免疫吸附试验（ELISA）”知识点进行考核】【答疑编号101317217,4、【正确答案A【答案解析TMB是一种优于OPD的新型HRP

7、色原底物。TMB经HRP乍用后变为蓝色，加入硫酸终止反应 后变为黄色，最大吸收峰波长为450nm。【该题针对“酶免疫技术的特点”知识点进行考核【答疑编号100917306,5、【正确答案E【答案解析OPD被认为是HRP最为敏感的色原底物之一。OPD在HRP的作用下显橙黄色，加强酸如硫酸或盐酸终止反应后呈棕黄色，最大吸收峰在492nm波长。【该题针对“酶免疫技术的特点”知识点进行考核【答疑编号100917305,6、【正确答案B【答案解析TMB是一种优于OPD的新型HRP色原底物。TMB经HRP作用后变为蓝色，加入硫酸终止反应后变为黄色，最大吸收峰波长为450nm。【该题针对“酶免疫技术的特点”

8、知识点进行考核【答疑编号100917304,7、HRP其RZ值应大于3.0。知识点进行考核【正确答案B【答案解析用于酶免疫技术的【该题针对“酶免疫技术的特点”【答疑编号100917303,8【正确答案E【答案解析1.酶的活性要强，催化反应的转化率高，纯度高。2.易与抗体或抗原偶联，标记后酶活性保持稳定，且不影响标记抗原与抗体的免疫反应性。3作用专一性强，酶活性不受样品中其他成分的影响，受检组织或体液中不存在与标记酶相同的内源性酶或抑制物。用于均相酶免疫测定的酶还要求当抗体与酶标抗原结合后，酶活性可出现抑制或激活。4.酶催化底物后产生的产物易于判断或测量，方法简单易行、敏感和重复性好。【该题针对

9、“酶免疫技术的特点”知识点进行考核【答疑编号100783453,9、【正确答案A【答案解析】酶免疫测定根据抗原抗体反应后是否需要分离结合的与游离的酶标记物而分为均相和异相这 两类。【该题针对“酶免疫技术分类”知识点进行考核】【答疑编号100783451,】10、【正确答案】B【答案解析】 辣根过氧化物酶由糖蛋白和亚铁血红素组成，其酶活性基团为亚铁血红素。【该题针对“酶免疫技术的特点”知识点进行考核】【答疑编号100783450,11、【正确答案B【答案解析邻苯二胺为在ELISA中应用最多的底物。一般采用对硝基苯磷酸酯作为碱性磷酸酶（AP）的底物。在ELISA中应用AP系统，其敏感性一般高于应用

10、HRP系统，空白值也较低。但 AP较难得到高纯度制剂，稳定性较 HRP氐，价格较HRP高，制备酶结合物时得率也较HRP氐。在ELISA中-半乳糖苷酸的底物常用4-甲基酮基-R-D半乳糖苷。【该题针对“酶免疫技术的特点”知识点进行考核【答疑编号100783449,12、【正确答案E【答案解析酶促反应中需要最适 pH、温度及过量的底物，反应速度可用一定时间内产物生成量或底物消 耗量来反映。【该题针对“酶免疫技术的特点”知识点进行考核【答疑编号100783448,13、【正确答案D【答案解析ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体，双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法。【该题针对“酶联免疫吸附试验（

11、ELISA）”知识点进行考核【答疑编号100783446,14、【正确答案C【答案解析选择ELISA的标记用酶，保证标记抗原后，酶活性保持稳定。【该题针对“酶免疫技术的特点”知识点进行考核【答疑编号100783444,15、【正确答案D【答案解析最佳工作浓度的选择通常通过将抗体、抗原作一系列的稀释，即棋盘滴定。【该题针对“酶免疫测定的应用”知识点进行考核【答疑编号100783443,16、【正确答案C【答案解析间接法测抗体是检测抗体最常用的方法，其操作步骤如下：将特异性抗原与固相载体连接，形成固相抗原，洗涤；加稀释的受检血清；加酶标抗抗体；加底物显色。由此可知固相载体包被物 是未标记的已知抗原

12、。【该题针对“酶联免疫吸附试验（ELISA）”知识点进行考核【答疑编号100783441,】17、【正确答案】B【答案解析】TMB具有稳定性好，成色无需避光，无致突变作用等优点，已成为目前ELISA中应用最广泛的底物。【该题针对“酶免疫技术的特点”知识点进行考核】【答疑编号100783440,18【正确答案D【答案解析测定时将含待测抗原标本和酶标抗体同时加入进行反应，两种抗体互不干扰，经过一次温育 和洗涤后，即可加入底物进行显色测定。但当待测抗原浓度过高时，过量的抗原可分别同固相抗体和酶标 抗体结合而抑制夹心复合物的形成，出现钩状效应。【该题针对“酶联免疫吸附试验（ELISA）”知识点进行考核

13、【答疑编号100783439,19、【正确答案B【答案解析目前国内外一般均使用聚苯乙烯塑料，此种材料具有很好的光透性和蛋白吸附能力，且很容 易加工成试管、微孔板、微球、珠、膜等形状的固相，价格低廉。【该题针对“酶免疫技术的特点”知识点进行考核【答疑编号100783434,20、【正确答案C【答案解析ELISA板包被后最常用的封闭物质是牛血清白蛋白。【该题针对“酶免疫技术的特点”知识点进行考核【答疑编号100783433,二、B1、【正确答案B【答案解析双抗体夹心法基本原理是先将特异性抗体与固相载体连接，形成固相抗体；加入待测标本并温育，使标本中的抗原与固相抗体充分反应，形成固相抗原抗体复合物，

14、洗涤除去其他未结合物；然后加入酶标抗体并温育。使固相抗原抗体复合物与酶标抗体结合，形成固相抗体-待测抗原-酶标记抗体复合物（双抗体夹心），洗涤除去未结合酶标记抗体；加底物显色，固相上的酶催化底物成为有色产物，根据颜 色反应的程度进行该抗原的定性或定量检测。【该题针对“酶联免疫吸附试验（ELISA）”知识点进行考核【答疑编号100783436,【正确答案C【答案解析竞争法原理为先用抗小分子的特异性抗体如同双抗体夹心法一样包被固相，然后同时加入待 测样本和酶标记的小分子，待测样本中的小分子与酶标小分子竞争与固相上的抗小分子的特异性抗体结合， 温育一定时间后洗涤，加入酶底物显色。【该题针对“酶联免疫吸附试验（ELISA）”知识