实训四液体、半固体、平板、斜面等培养基的制备

1、实验四实验四 液体、半固体、平板、液体、半固体、平板、斜面等培养基的制备斜面等培养基的制备一、目的一、目的v1 1、掌握各类培养基制备方法及注意事项；、掌握各类培养基制备方法及注意事项；v2 2、掌握各类培养基的主要成分及各成分含量。、掌握各类培养基的主要成分及各成分含量。二、内容二、内容v1 1、液体培养基、液体培养基 1.21.2组组200ml200ml； v2 2、半固体培养基、半固体培养基 3.43.4组组200ml200ml；v3 3、斜面培养基（固体）、斜面培养基（固体） 5.65.6组组200ml200ml；v4 4、固体培养基、固体培养基 1616组组400ml400ml。三、

2、步骤三、步骤v1 1、称量、称量 （注意：（注意：3 35g5g应取应取5g5g；称量后瓶塞；称量后瓶塞盖好，防止粉剂潮解；称量要准确，熟练使盖好，防止粉剂潮解；称量要准确，熟练使用砝码天平）；用砝码天平）；v 2 2、溶化、溶化 电炉电炉100100充分完全溶化（注意：溶充分完全溶化（注意：溶化前记号笔画好水线作标记；反复化前记号笔画好水线作标记；反复4 45 5次沸次沸腾达到完全溶化，看不到大的颗粒物质，呈腾达到完全溶化，看不到大的颗粒物质，呈澄清透明状态）；澄清透明状态）；v3 3、调整、调整pHpH到到7.4 7.4 培养基若偏酸，加入培养基若偏酸，加入1d NaOH1d NaOH，若

3、偏碱，加入若偏碱，加入1d HCl1d HCl；pHpH试纸滴加试样后立即试纸滴加试样后立即观察，不可长时间等待；观察，不可长时间等待；v 4 4、分装、分装 液体、半固体和固体培养基需要先液体、半固体和固体培养基需要先分装入试管后高压灭菌，量约在试管分装入试管后高压灭菌，量约在试管1/31/3高度高度为准，选好合适的塞子塞好，塞子大小要合为准，选好合适的塞子塞好，塞子大小要合适，忌大忌小。适，忌大忌小。v 5 5、高压灭菌、高压灭菌 15 15磅磅20min20min（15 15磅压力下温度为磅压力下温度为121.3121.3）；）；v 6 6、倒板、倒板 固体培养基高压灭菌后倒板，严格固体

4、培养基高压灭菌后倒板，严格遵守无菌操作技术操作，防止培养基被污染；遵守无菌操作技术操作，防止培养基被污染；v 7 7、鉴定、鉴定 3724h3724h，如培养后随即选中平板无，如培养后随即选中平板无细菌生长则实验成功；细菌生长则实验成功；v8 8、保存、保存 44冰箱保存。冰箱保存。四、各培养基成分四、各培养基成分v 1 1、液体培养基（肉膏汤）、液体培养基（肉膏汤）v 成分：牛肉膏成分：牛肉膏3 35g5g，蛋白胨，蛋白胨10g10g，NaCl 5gNaCl 5g，蒸馏水蒸馏水1000ml1000ml；v 2 2、半固体培养基、半固体培养基v 成分：牛肉膏成分：牛肉膏3 35g5g，蛋白胨，

5、蛋白胨10g10g，NaCl 5gNaCl 5g，0.30.30.50.5琼脂粉，蒸馏水琼脂粉，蒸馏水1000ml 1000ml v3 3、斜面培养基、斜面培养基v 成分：牛肉膏成分：牛肉膏3 35g5g，蛋白胨，蛋白胨10g10g，NaCl 5gNaCl 5g，2 23 3琼脂粉，蒸馏水琼脂粉，蒸馏水1000ml1000ml；v4 4、固体培养基（营养琼脂或普通琼脂）、固体培养基（营养琼脂或普通琼脂）v 成分：牛肉膏成分：牛肉膏3 35g5g，蛋白胨，蛋白胨10g10g，NaCl 5gNaCl 5g，2 23 3琼脂粉（琼脂粉（202025g25g较好），蒸馏水较好），蒸馏水1000ml1000ml； 5 5、血液琼脂（血平板）、血液琼脂（血平板）v 成分：普通琼脂成分：普通琼脂100ml100ml，加入无菌脱纤维羊，加入无菌脱纤维羊血血8 81