植物细胞工程的基本技术第二课时上课课件教学资料

1、切取切取形成层形成层无菌无菌接种接种诱导愈伤组织诱导愈伤组织的形成的形成试管苗的形成试管苗的形成培养室培养室移栽移栽脱分化脱分化再分化再分化实验实验： 离体的植物器官、组织或细胞离体的植物器官、组织或细胞愈伤组织愈伤组织根、芽根、芽植物体植物体外植体外植体脱分化脱分化植物激素：植物激素：细胞分裂素、生长素细胞分裂素、生长素再分化再分化2 2、过程、过程植物组织培养条件植物组织培养条件： 含有全部营养成分的含有全部营养成分的培养基、一定的温度、空培养基、一定的温度、空气、无菌环境、适合的气、无菌环境、适合的PHPH、适时光照等。适时光照等。遮光遮光光照光照细胞分化细胞分化程度与细程度与细胞分裂能

2、胞分裂能力呈负相力呈负相关。关。二、植物组织培养二、植物组织培养1 1、概念、概念 1 1、为什么诱导愈伤组织的过程中应避、为什么诱导愈伤组织的过程中应避光培养？光培养？在有光时，往往容易形成维管组织，在有光时，往往容易形成维管组织，而不易形成愈伤组织。而不易形成愈伤组织。能力提高能力提高2 2、决定植物脱分化、再分化的关键因、决定植物脱分化、再分化的关键因素是什么？素是什么？植物激素植物激素离体状态、提供营养物质、激素及其它适宜条离体状态、提供营养物质、激素及其它适宜条件（无菌，光照，温度，件（无菌，光照，温度，PH值等）。值等）。3 3、表现全能性的条件有哪些？、表现全能性的条件有哪些？强

3、调几个概念强调几个概念：愈伤组织：愈伤组织：离体的植物器官、离体的植物器官、组织或细胞，在培养一段时组织或细胞，在培养一段时间以后，通过细胞分裂，形间以后，通过细胞分裂，形成一种高度成一种高度液泡化液泡化，由，由无定无定形状态薄壁细胞形状态薄壁细胞组成的排列组成的排列疏松无规则的组织。疏松无规则的组织。植物细胞的植物细胞的脱分化脱分化：由高度分化的植物器：由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程，又官、组织或细胞产生愈伤组织的过程，又称称去分化去分化。脱分化的实质和结果分别是什么？脱分化的实质和结果分别是什么？实质是恢复细胞的全能性过程。实质是恢复细胞的全能性过程。结果是形成愈伤组织

4、。结果是形成愈伤组织。植物细胞的植物细胞的再分化再分化：脱分化产生的愈伤组织在：脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化成根或芽等器官的过程。培养过程中重新分化成根或芽等器官的过程。1.1.在离体的植物器官、组织或细胞脱在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，下列分化形成愈伤组织的过程中，下列哪一项条件是不需要的（哪一项条件是不需要的（ ）A.A.消毒灭菌消毒灭菌B.B.适宜的温度适宜的温度C.C.充足的光照充足的光照D.D.适宜的养料和激素适宜的养料和激素C反馈练习反馈练习2.2.要将胡萝卜韧皮部细胞培养成完要将胡萝卜韧皮部细胞培养成完整植株，不需要（整植株，不需要（ ）A.

5、A.具有完整细胞核的细胞具有完整细胞核的细胞B.B.离体状态离体状态C.C.导入外源基因导入外源基因D.D.一定的营养物质和激素一定的营养物质和激素C3 3、植物组织培养形成的愈伤、植物组织培养形成的愈伤组织进行培养，组织进行培养， 又可以分又可以分化形成根、芽等器官，这一化形成根、芽等器官，这一过程称为：过程称为： A A、脱分化、脱分化 B B、去分化、去分化 C C、再分化、再分化 D D、脱分化或去分化、脱分化或去分化4 4、下列不能作为植物组织培养、下列不能作为植物组织培养的材料是的材料是A A、秋海棠的叶、秋海棠的叶 B B、马铃薯的块茎、马铃薯的块茎C C、成熟的花粉、成熟的花粉

6、 D D、木质部中的导管细胞、木质部中的导管细胞D因为不同种生物之间存因为不同种生物之间存在着在着生殖隔离生殖隔离，所以用，所以用传统的有性杂交方法是传统的有性杂交方法是不可能做到这一点的。不可能做到这一点的。于是，这些科学家试图用这两种植物的体于是，这些科学家试图用这两种植物的体细胞进行杂交，来实现这一美妙的设想。细胞进行杂交，来实现这一美妙的设想。三、植物体细胞杂交技术三、植物体细胞杂交技术这幅番茄这幅番茄马铃薯图利马铃薯图利用传统有性杂交方法能用传统有性杂交方法能实现吗？为什么？实现吗？为什么？ 19721972年卡尔森等通过两个烟草品种之间年卡尔森等通过两个烟草品种之间原生质体的融合，

7、获得了第一个体细胞杂种。原生质体的融合，获得了第一个体细胞杂种。19781978年梅尔彻斯年梅尔彻斯(Melchers)(Melchers)等首次获得等首次获得了番茄和马铃薯的属间体细胞杂种了番茄和马铃薯的属间体细胞杂种“Potamato”“Potamato”。 目前，已得到栽培烟草与野生烟草、目前，已得到栽培烟草与野生烟草、栽培大豆与野生大豆、籼稻与野生稻、栽培大豆与野生大豆、籼稻与野生稻、籼稻与粳稻、小麦与鹅冠草等细胞杂种籼稻与粳稻、小麦与鹅冠草等细胞杂种及其后代，获得了有价值的新品系或育及其后代，获得了有价值的新品系或育种上有用的新材料。种上有用的新材料。 1 1你认为两个来自不同植物的

8、体细胞完你认为两个来自不同植物的体细胞完成融合，遇到的第一个障碍是什么？成融合，遇到的第一个障碍是什么？ 2 2有没有一种温和的去壁方法呢？有没有一种温和的去壁方法呢？ 3 3为什么两个原生质体能发生融合，这为什么两个原生质体能发生融合，这与细胞膜的什么特性有关？与细胞膜的什么特性有关？ 4 4如果两个来源不同的原生质体发生了如果两个来源不同的原生质体发生了融合，下一步该做何处理？融合，下一步该做何处理？ 5 5如何将杂种细胞培育成杂种植株？如何将杂种细胞培育成杂种植株？请思考：请思考：杂杂种种植植株株融合的融合的原生质原生质体体ABAB再再生生出出细细胞胞壁壁脱脱分分化化愈愈伤伤组组织织再再

9、分分化化1 1、过程、过程植物细胞的融合植物细胞的融合植物组织培养植物组织培养植物细胞植物细胞A A原生质体原生质体B B原生质体原生质体A A杂种杂种细胞细胞AB去去 壁壁去去 壁壁人人工工诱诱导导方法？方法？促进融合促进融合的方法？的方法？融合融合完成完成的的标志标志植物细胞植物细胞B B三、植物体细胞杂交技术三、植物体细胞杂交技术细胞融合的基础：细胞融合的基础： 细胞膜的流动性细胞膜的流动性2、概念 将不同种的植物体细胞，在一定条将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。育成新的植物体的技术。3、优势和未解决的

10、问题 优势优势（与有性杂交方法比较）与有性杂交方法比较） ：打破了不同种：打破了不同种生物间的生殖隔离障碍，大大扩展了可用生物间的生殖隔离障碍，大大扩展了可用于杂交的亲本组合范围。于杂交的亲本组合范围。未解决的问题：未解决的问题：未能让杂种植物按照人们未能让杂种植物按照人们 的需要表现出亲代的优良。的需要表现出亲代的优良。所采用技术的理论基础 植物细胞工程通常采用的技 术 手 段 植物组织培养植物组织培养 植物体细胞杂交植物体细胞杂交植物细胞的全能性植物细胞的全能性小结小结：1、植物体细胞杂交尚未解决的问题有：、植物体细胞杂交尚未解决的问题有：A A、去掉细胞壁、去掉细胞壁, ,分离出有活力的

11、原生质分离出有活力的原生质体体B B、将杂种细胞培育成植株、将杂种细胞培育成植株C C、让杂种植物按照人们的需要表现出亲、让杂种植物按照人们的需要表现出亲代的优良性代的优良性D D、尚未培育出属间杂种植物、尚未培育出属间杂种植物2、不能人工诱导原生质体融合的方、不能人工诱导原生质体融合的方法是法是A A、振动、振动 B B、电刺激、电刺激 C C、PEGPEG试剂试剂 D D、重压、重压3.植物细胞表现出全能性的必要条植物细胞表现出全能性的必要条件是件是 A. 给予适宜的营养和外界条件给予适宜的营养和外界条件 B. 导入其他植物细胞的基因导入其他植物细胞的基因C. 脱离母体后，给予适宜的营养脱离母体后，给予适宜的营养和外界条件和外界条件D. 将成熟筛管的细胞核移植到去将成熟筛管的细胞核移植到去核的卵细胞内核的卵细胞内4 4、植物体细胞融合完成的标志是、植物体细胞融合完成的标志是 A A产生新的细胞壁产生新的细胞壁 B B细胞膜发生融合细胞膜发生融合C C细胞质发生融合细胞质发生融合 D D细胞核发生融合细胞核发生融合5 5、用