顶空气相色谱法测定卡维地洛中有机溶剂残留

1、顶空气相色谱法测定卡维地洛中有机溶剂残留【摘要】 目的 建立同时测定卡维地洛中乙醚、丙酮、 四氢呋喃、乙酸乙酯、甲醇、苯、三氯甲烷、甲苯、二氧六环、1，2?捕?氯乙烷残留量的方法。方法 采用顶空气相色谱法测定卡维地洛中有机溶剂残留量，使用Agilent DB?WAX毛细管柱；以氮气为载气；以FID为检测器。结果 该法有良好的线性，r在0.99710.9998之间；精密度试验及重现性试验RSD值均小于6，平均回收率在89.0100.9之间。结论 该方法简便，快速，准确，可用于卡维地洛的乙醚、丙酮、 四氢呋喃、乙酸乙酯、甲醇、苯、三氯甲烷、甲苯、二氧六环、1，2?捕?氯乙烷残留量的测定。 【关键词

2、】 卡维地洛；顶空气相色谱法；有机溶剂残留量卡维地洛（carvedilol）为心血管类药物，可阻断及受体，无内在活性，其阻断受体的作用较强，适用于原发性高血压及心绞痛。国内不同的合成工艺采用不同的有机溶剂，需用到的有机溶剂有乙醚、丙酮、 四氢呋喃、乙酸乙酯、甲醇、苯1、三氯甲烷、甲苯、二氧六环、1，2?捕?氯乙烷2，根据中国药典2005年版二部对药物有机溶剂残留量和ICH的要求，应对这些有机溶剂都进行控制。但目前各生产厂家均根据自己的生产工艺，仅对生产中涉及的溶剂进行检查，没有针对该品种统一的有机溶剂检测方法。本文建立了顶空气相色谱法同时检测上述十种有机溶剂的残留量，可适用于各厂家不同工艺的卡

3、维地洛残留溶剂质量控制。1 仪器与试药 Agilent 6890N气相色谱仪，Agilent G1888A顶空自动进样器，Sartorius CP225D万分之一电子天平。 乙醚（20061101-11）、丙酮（20060910-2）、乙酸乙酯（20060602-2）、甲苯（20060405-2）、二氧六环（20020201）、冰醋酸（20060401-2）均是分析纯，均是广州化学试剂厂产品；四氢呋喃（941907）、甲醇（020225）、三氯甲烷（041108）均是气相参比物，均是天津化学试剂二厂产品；苯（分析纯，天津市永大化学试剂开发中心，2006年8月13日）；1，2?捕?氯乙烷（分析纯

4、，天津市百世化工有限公司，2004年7月10日）；乙腈（色谱纯，天津市四友精细化学品有限公司，061025101）；以上试剂纯度均99.0%；实验用水为超纯水。卡维地洛（由不同厂家提供，A、B、C、D共4批）。2 方法与结果2.1 色谱条件 色谱柱：Agilent DB?WAX毛细管柱（30 m0.25 mm0.5 m）；氢火焰离子检测器，检测器温度：230 ，进样口温度200 ；载气：氮气；流速：3.0 mL/min；柱温：程序升温，起始温度40 ，保持12 min，以40 /min的升温速率升至180 保持5 min;顶空瓶温度：90 ，顶空时间：30 min;进样体积：1 mL。2.2

5、溶液的制备2.2.1 对照品溶液的配制 分别取甲醇、丙酮、四氢呋喃、二氧六环适量，精密称定，加质量分数为20的冰醋酸溶液制成含甲醇3 mg/mL、丙酮5 mg/mL、四氢呋喃0.72 mg/mL、二氧六环0.38 mg/mL的贮备溶液。再分别取1，2?捕?氯乙烷、苯、三氯甲烷、甲苯、乙醚、乙酸乙酯加乙腈分别制成含1，2?捕?氯乙烷0.05 mg/mL、苯0.02 mg/mL、三氯甲烷0.6 mg/mL、甲苯8.9 mg/mL、乙醚50 mg/mL、乙酸乙酯50 mg/mL作为贮备液。取贮备溶液10.0 mL和贮备溶液1.0 mL加质量分数为20醋酸的溶液至100 mL量瓶，取2.0 mL置20

6、 mL顶空瓶中，作为对照品溶液。2.2.2 供试品溶液的配制 精密称取供试品约0.2 g，置20 mL顶空瓶中，精密加入质量分数20的醋酸溶液2.0 mL，作为供试品溶液。2.3 线性范围的确定 分别取“2.2.1”项下对照品贮备溶液4.0 mL和贮备溶液0.4 mL、贮备溶液8.0 mL和贮备溶液0.8 mL、贮备溶液10.0 mL和贮备溶液1.0 mL、贮备溶液12.0 mL和贮备溶液1.2 mL、贮备溶液16.0 mL和贮备溶液1.6 mL加质量分数为20的醋酸溶液至100 mL量瓶。取2.0 mL置20 mL顶空瓶中，按“2.1”项下色谱条件进行测定，以峰面积（A）为纵坐标，以质量浓度

7、（）为横坐标，得出线性关系。结果见表1。表1 线性关系结果（略）Tab.1 The result of linear range2.4 干扰试验 取空白溶液（质量分数为20的醋酸溶液），按“2.1”项下色谱条件测定。结果表明空白溶液对样品测定无干扰，色谱图中各溶剂的保留时间如下:乙醚（1.239 min）,丙酮（2.056 min）,四氢呋喃（2.520 min）,乙酸乙酯（2.847 min）,甲醇（3.101 min）,苯（3.851 min）,三氯甲烷（6.286 min）,甲苯（6.896 min）,二氧六环（8.109 min）,1，2?捕?氯乙烷（8.471 min）,冰醋酸（14

8、 min）,见图1。2.5 重复性试验 按“2.2.1”制备对照品溶液，取6份进样测定。测得乙醚、丙酮、 四氢呋喃、乙酸乙酯、甲醇、苯、三氯甲烷、甲苯、二氧六环和1，2?捕?氯乙烷RSD依次为2.1，0.9，1.2，1.3，2.1，0.9，1.6，1.8，2.3和2.8（n6），表明试验的重复性良好。2.6 加样回收率试验 取已知有机残留量的供试品约0.1 g置20 mL顶空瓶，加入相当于“2.2.1”项下对照品溶液浓度80，100，120的溶液2.0 mL，按本方法进行试验，考察其加样回收率。平均回收率（n9）按乙醚、丙酮、四氢呋喃、乙酸乙酯、甲醇、苯、三氯甲烷、甲苯、二氧六环、1，2?捕?

9、氯乙烷顺序依次为97.1（RSD4.2），96.6（RSD4.9），93.6（RSD2.9），99.5（RSD2.6），100.9（RSD5.7），89.0（RSD3.0），100.2（RSD3.2），98.7（RSD4.2），96.0（RSD5.0），97.3（RSD4.5）。图1 20冰醋酸溶液（A）、对照溶液（B）、供试品溶液（C）的GC色谱图（略）Fig.1 GC chromatograms of blank solvent (20%Acetic acid )(A)、chemical reference substance(B)、sample(C)2.7 卡维地洛中有机溶剂残留量的限量

10、和检出限 根据中国药典2005年版二部附录对药物中残留溶剂的限量作了明确规定，以质量分数计，乙醚不得过0.5，丙酮不得过0.5，四氢呋喃不得过0.072，乙酸乙酯不得过0.5，甲醇不得过0.3，苯不得过0.0002，三氯甲烷不得过0.006，甲苯不得过0.089，二氧六环不得过0.038，1，2?捕?氯乙烷不得过0.00053。采用上述色谱方法，将混合对照品溶液逐步稀释，直至未检测到明显的峰为止，其检出限为乙醚0.025 g/mL，丙酮0.05g/mL，四氢呋喃7.310-3 g/mL，乙酸乙酯0.05 g/mL，甲醇310-4 g/mL，苯110-3 g/mL，三氯甲烷0.6 g/mL，甲苯

11、8.610-5 g/mL，二氧六环1.6 g/mL，1，2?捕?氯乙烷0.1 g/mL。2.8 样品测定 取供试品3批，按“2.2.2”项下方法制备，依法测定，按外标法计算。4厂样品乙醚、丙酮、四氢呋喃、甲醇、苯、三氯甲烷、二氧六环、1，2?捕?氯乙烷均未检出；乙酸乙酯的残留量均为0.1；A、B、D厂甲苯量未检出，C厂甲苯量为0.01。3 讨论3.1 取“2.2.1”项下对照品溶液进行直接进样和顶空进样进行对比，发现顶空进样各峰间分离良好，杂质较少，且直接进样对色谱柱的伤害较大，所以顶空进样明显优于直接进样。3.2 对溶解供试品的溶剂进行考察，醋酸浓度为低于20时，样品不能很好溶解；浓度太高则

12、对色谱柱具较大伤害。同时，曾试用二甲基亚砜溶解供试品，虽然供试品能很好溶解，但在苯、1，2?捕?氯乙烷等出峰的位置上也出现杂质峰，考虑其质量情况，故不选用。经考察，质量分数为20的醋酸溶液为最佳溶剂。3.3 分别使用Agilent DB?1、Agilent HP?5、Agilent DB?624等不同极性的毛细管柱，均不能把这十种残留溶液完全分离。而Agilent DB?WAX能将其分离，并且柱效、峰型以及保留时间良好。3.4 分别使用不同品牌聚乙二醇毛细管柱，不同品牌气相色谱仪，对同一批样品进行测定，其结果基本一致。表明该方法耐用性良好。3.5 本法可在18 min、同一色谱条件下检测10种不同