第七章++基因治疗

1、第七章 基因治疗 湖南师范大学生命科学学院湖南师范大学生命科学学院 袁袁 婺婺 洲洲 本章目录本章目录 l7.1 7.1 基因治疗的概念与发展基因治疗的概念与发展 l7.1.1 7.1.1 基因治疗的概念与策略基因治疗的概念与策略 l7.1.2 7.1.2 基因治疗的基本程序基因治疗的基本程序 l7.1.3 7.1.3 基因治疗的现状与展望基因治疗的现状与展望 l7.2 7.2 基因治疗的载体基因治疗的载体 l7.2.1 7.2.1 病毒载体病毒载体 l7.2.2 7.2.2 非病毒载体非病毒载体 l7.2.3 7.2.3 载体与基因治疗中的靶向性问题载体与基因治疗中的靶向性问题 l7.3 7

2、.3 重要疾病的基因治疗重要疾病的基因治疗 l7.3.1 7.3.1 遗传病的基因治疗遗传病的基因治疗 l7.3.2 7.3.2 肿瘤的基因治疗肿瘤的基因治疗 l7.3.3 7.3.3 病毒病的基因治疗病毒病的基因治疗 第一节第一节 基因治疗的概念与发展基因治疗的概念与发展 l基因治疗的概念与策略基因治疗的概念与策略 l基因治疗的基本程序基因治疗的基本程序 l基因治疗的现状与展望基因治疗的现状与展望 一、一、 基因治疗的概念基因治疗的概念 基因治疗（基因治疗（gene gene therapytherapy）就是向有就是向有 功能缺陷的细胞补充相功能缺陷的细胞补充相 应功能基因，以纠正或应功能

3、基因，以纠正或 补偿其基因缺陷，从而补偿其基因缺陷，从而 达到治疗的目的。达到治疗的目的。 Gene Therapy Principles 基因治疗的前提条件基因治疗的前提条件 l发病机制在发病机制在DNADNA水平上已经清楚水平上已经清楚 l要转移的基因已经克隆分离，其表达产物有详尽的了要转移的基因已经克隆分离，其表达产物有详尽的了 解解 l该基因正常表达的组织可在体外进行遗传操作该基因正常表达的组织可在体外进行遗传操作 基因治疗的策略基因治疗的策略 1 1）基因置换基因置换，就是用正常的基因原位替换病变细胞内的致病基，就是用正常的基因原位替换病变细胞内的致病基 因，使细胞内的因，使细胞内的

4、DNADNA完全恢复正常状态。完全恢复正常状态。 2 2）基因修复基因修复，是指将致病基因的突变碱基序列纠正，而正常部，是指将致病基因的突变碱基序列纠正，而正常部 分予以保留。分予以保留。 3 3）基因修饰，又称基因增补基因修饰，又称基因增补。是将目的基因导入病变细胞或其。是将目的基因导入病变细胞或其 他细胞，目的基因的表达产物能够修饰缺陷细胞的功能或使他细胞，目的基因的表达产物能够修饰缺陷细胞的功能或使 原有的某些功能得到加强。原有的某些功能得到加强。 4 4）基因失活基因失活，利用反义，利用反义RNARNA、核酶或肽核酸等反义技术及、核酶或肽核酸等反义技术及RNARNA干干 涉等技术能特异

5、地封闭基因表达的特性，抑制一些有害基因涉等技术能特异地封闭基因表达的特性，抑制一些有害基因 的表达，以达到治疗疾病的目的。的表达，以达到治疗疾病的目的。 5 5）免疫调节免疫调节，这是将抗体、抗原或细胞因子的基因导入病人体，这是将抗体、抗原或细胞因子的基因导入病人体 内，改变病人的免疫状态，从而达到预防和治疗疾病的目的。内，改变病人的免疫状态，从而达到预防和治疗疾病的目的。 基因治疗的两种途径基因治疗的两种途径 1 1）ex vivoex vivo法，法，是将受体细胞在体外培养，转入外源基因，是将受体细胞在体外培养，转入外源基因， 经过适当的选择系统，把重组的受体细胞回输到患者体经过适当的选择

6、系统，把重组的受体细胞回输到患者体 内，让外源基因表达以改善患者症状。内，让外源基因表达以改善患者症状。 2 2）in vivoin vivo法，法，直接将外源直接将外源DANDAN注射到机体内，使其在体注射到机体内，使其在体 内表达发挥治疗作用。内表达发挥治疗作用。 inin vivo vivo法比法比ex vivoex vivo法更简单、直接和经济，疗效也比较法更简单、直接和经济，疗效也比较 确切，常用的体内基因直接转移手段有病毒介导，脂质确切，常用的体内基因直接转移手段有病毒介导，脂质 体介导和基因直接注射等。体介导和基因直接注射等。 二、基因治疗的基本程序二、基因治疗的基本程序 l基因

7、治疗的主要步骤基因治疗的主要步骤 目的基因的克隆目的基因的克隆 基因转移系统的建立基因转移系统的建立 靶细胞的选择靶细胞的选择 基因的导入。基因的导入。 1. 1. 目的基因的选择和制备目的基因的选择和制备 l用于基因治疗的基因必须满足以下条件：用于基因治疗的基因必须满足以下条件： 1 1）在体内仅有少量表达就可以显著改善症状；）在体内仅有少量表达就可以显著改善症状； 2 2）该基因的过高表达不会对机体造成危害；）该基因的过高表达不会对机体造成危害； 3 3）外源基因可有效导入靶细胞）外源基因可有效导入靶细胞 4 4）外源基因能在靶细胞中长期稳定存留）外源基因能在靶细胞中长期稳定存留 5 5）

8、导入基因的方法及载体对宿主细胞安全无害）导入基因的方法及载体对宿主细胞安全无害 2. 2. 靶细胞的选择靶细胞的选择 1）生殖细胞 l基因的转移只能用显微注射，效率不高，并且只适用于 排卵周期短而次数多的动物，不适用于人类。所以，这 种靶细胞的遗传修饰至今尚无实质性进展。 2）体细胞 l采取基因置换、基因修复等方式，但还不能实现特定位 点的基因转移。只能采取基因在基因组上非特定定位， 随机整合的方式。只要基因能表达产物就可以达到治疗 的目的。是一种异常基因功能补偿的基因治疗方式。 靶细胞的选择靶细胞的选择 l最好为组织特异性细胞最好为组织特异性细胞 l细胞较易获得，且生命周期较长细胞较易获得，

9、且生命周期较长 l离体细胞较易受外源基因转化离体细胞较易受外源基因转化 l离体细胞经转染和一定时间培养后再植回体内，离体细胞经转染和一定时间培养后再植回体内， 仍较易成活仍较易成活 常用的靶细胞常用的靶细胞 l造血细胞造血细胞 l皮肤成纤维细胞皮肤成纤维细胞 l肝细胞肝细胞 l血管内皮细胞血管内皮细胞 l淋巴细胞淋巴细胞 l肌肉细胞肌肉细胞 l肿瘤细胞肿瘤细胞 3.转移载体的选择与细胞转染 l病毒感染、显微注射、电穿孔、化学转染试剂等。病毒感染、显微注射、电穿孔、化学转染试剂等。 4.外源基因的表达及检测 第二节第二节 基因治疗的载体基因治疗的载体 l病毒载体病毒载体 l非病毒载体非病毒载体

10、l载体与基因治疗中的靶向性问题载体与基因治疗中的靶向性问题 一一 、病毒载体、病毒载体 l逆转录病毒载体逆转录病毒载体 l腺病毒载体腺病毒载体(AV) (AV) l腺伴随病毒载体（腺伴随病毒载体（AAVAAV） 1. 逆转录病毒载体逆转录病毒载体 外源目的基因外源目的基因 J 优点优点 L 缺点缺点 2. 2. 腺病毒载体腺病毒载体(AV)(AV) 腺病毒的结构腺病毒的结构 l蛋白质外壳蛋白质外壳 包囊外壳蛋白：由纤维状蛋白分子和角蛋白组成包囊外壳蛋白：由纤维状蛋白分子和角蛋白组成 骨架蛋白：起着保持包囊形状的作用骨架蛋白：起着保持包囊形状的作用 DNADNA结合蛋白：与结合蛋白：与DNADN

11、A结合结合 l线性双链双螺旋病毒线性双链双螺旋病毒DNA DNA Adenovirus 36 kb Double Stranded DNA Genome Entry through CAR receptor and integrin co-receptor 腺病毒基因组腺病毒基因组DNADNA l基因组长基因组长36kb36kb，两端各有一个，两端各有一个ITRITR，ITRITR内侧为病毒包装内侧为病毒包装 信号。信号。 l6 6个早期转录基因：个早期转录基因：E1a, E1bE1a, E1b，E2a, E2bE2a, E2b，E3, E4E3, E4，承担，承担 基因调控功能基因调控功能

12、l1 1个晚期转录单元个晚期转录单元(5(5个晚期基因个晚期基因L1-L5)L1-L5)：负责结构蛋白的：负责结构蛋白的 编码。编码。 lE1E1的缺失可能造成病毒再复制阶段的流产，的缺失可能造成病毒再复制阶段的流产，E3E3为复制非为复制非 必须区，可被外源基因替代。必须区，可被外源基因替代。 基因组基因组DNADNA长长36kb36kb，两端各有一个两端各有一个ITRITR，ITRITR内侧为病毒包装信号。内侧为病毒包装信号。 ITRITR E1E2E3E4 IVa2VAL1L2L3L4L5 ITRITR是是反向重复序列反向重复序列 E1-E4E1-E4为早期基因，与病毒基因组的复制及晚期

13、基因的为早期基因，与病毒基因组的复制及晚期基因的, ,表达调控有关，其表达调控有关，其 中中E3E3编码晚期基因的调控因子编码晚期基因的调控因子 L1-L5L1-L5为编码病毒包装蛋白的晚期基因为编码病毒包装蛋白的晚期基因 IVa2IVa2和和VAVA均为病毒均为病毒RNARNA聚合酶的亚基编码基因。聚合酶的亚基编码基因。 腺病毒载体的构建腺病毒载体的构建 l第一代腺病毒载体缺少第一代腺病毒载体缺少E1aE1a和和 E1bE1b基因，基因，取代的是治疗基因。取代的是治疗基因。 包装细胞基因组含有包装细胞基因组含有E1E1基因；但第一代腺病毒载体产生炎症，基因；但第一代腺病毒载体产生炎症， 而且

14、基因表达快速衰退；而且基因表达快速衰退； l第二代腺病毒载体在删除第二代腺病毒载体在删除E1E1的基础上，或者突变的基础上，或者突变E2E2区或直接区或直接 除掉除掉E2E2或或E4E4区，区，基因型为基因型为E1E1 E2 E2 或 或E1E1 E4 E4 。由于保留有 。由于保留有 E3E3区，可抑制宿主的免疫反应。区，可抑制宿主的免疫反应。 l第三代腺病毒载体正在开发，第三代腺病毒载体正在开发，目的是尽可能多删除全部的反目的是尽可能多删除全部的反 式序列基因，以降低病毒基因的表达，但腺病毒载体的生产式序列基因，以降低病毒基因的表达，但腺病毒载体的生产 及治疗基因在细胞内的稳定性可能有影响

15、。及治疗基因在细胞内的稳定性可能有影响。 E1E3 DNA E3 DNAE3 J 优点优点 插入插入DNADNA片段较长片段较长 宿主范围广，不需要正在分裂的细胞宿主范围广，不需要正在分裂的细胞 不整合，减少插入突变的潜在危险不整合，减少插入突变的潜在危险 L 缺点缺点 需反复给药需反复给药 具有免疫原性具有免疫原性 3. 3. 腺伴随病毒载体（腺伴随病毒载体（AAVAAV） l腺伴随病毒属于细小病毒科，病毒颗粒直径为腺伴随病毒属于细小病毒科，病毒颗粒直径为20nm20nm，无，无 包膜，包膜，2020面体。面体。是一类单链线状是一类单链线状DNADNA病毒病毒。AAVAAV感染率很感染率很

16、高，而且尚无发现高，而且尚无发现AAVAAV引起人体疾病的报道，相反，引起人体疾病的报道，相反，AAVAAV 感染者减少了患癌的机会。感染者减少了患癌的机会。 腺伴随病毒载体的基因组腺伴随病毒载体的基因组 lAAVAAV基因组很小，两端也是基因组很小，两端也是ITRITR，中间含有，中间含有3 3个启动子和个启动子和2 2 个编码基因（个编码基因（reprep和和capcap）。）。REPREP参与病毒复制、转录的参与病毒复制、转录的 调节，并与基因组的整合有关。而调节，并与基因组的整合有关。而CAPCAP是病毒衣壳蛋白。是病毒衣壳蛋白。 lAAVAAV是一种缺陷病毒，只有在与腺病毒等辅助病毒

17、共转是一种缺陷病毒，只有在与腺病毒等辅助病毒共转 染时才能进行有效复制和产生溶细胞感染。染时才能进行有效复制和产生溶细胞感染。 l在人体，在人体，AAVAAV特异整合到特异整合到1919号染色体上，是唯一一种以位号染色体上，是唯一一种以位 点特异性方式整合的真核病毒，从而避免了随机整合而点特异性方式整合的真核病毒，从而避免了随机整合而 导致宿主细胞突变的潜在危险性。导致宿主细胞突变的潜在危险性。 lAAVAAV载体是缺失病毒结构基因，仅保留两个载体是缺失病毒结构基因，仅保留两个ITRITR。 l使用使用AAVAAV载体安全，但缺乏高效的包装细胞。载体安全，但缺乏高效的包装细胞。 腺伴随病毒载体

18、构建腺伴随病毒载体构建 二二 非病毒载体非病毒载体 1. 1. 裸露裸露DNA DNA 2.2.脂质体法脂质体法 1. 1. 裸露裸露DNADNA 直接注射直接注射 溶液类型对基因表溶液类型对基因表 达有影响：达有影响： 重组重组DNADNA可贮存可贮存 于于5%30%5%30%的蔗的蔗 糖溶液中糖溶液中 也可用生理盐也可用生理盐 水或水或PBSPBS 2. 脂质体法脂质体法 人造单层膜，是一人造单层膜，是一 种脂质双层包围水种脂质双层包围水 溶液的脂质微球溶液的脂质微球. . 结构和性质与细胞结构和性质与细胞 膜极为相似，二者膜极为相似，二者 易于融合，易于融合，DNADNA由于由于 细胞的

19、内吞作用进细胞的内吞作用进 入细胞。入细胞。 Liposomes 脂质体的优缺点脂质体的优缺点 Gene Therapy: Delivery Vehicle 第三节第三节 重要疾病的基因治疗重要疾病的基因治疗 l遗传病的基因治疗遗传病的基因治疗 l肿瘤的基因治疗肿瘤的基因治疗 l病毒病的基因治疗病毒病的基因治疗 一、遗传病的基因治疗一、遗传病的基因治疗 l血友病血友病B B l地贫地贫 l囊性纤维化囊性纤维化 l腺苷脱氨酶缺乏症腺苷脱氨酶缺乏症 1. 1. 血友病血友病B B v凝血因子凝血因子IXIX缺乏引起，不能正常凝血缺乏引起，不能正常凝血 地贫是由于地贫是由于珠珠 蛋白基因突变或缺蛋白

20、基因突变或缺 失造成，失造成， 珠蛋珠蛋 白肽链合成减少，白肽链合成减少， 引起患者溶血性贫引起患者溶血性贫 血。血。 2. 2. 地贫地贫 地贫的基因治疗地贫的基因治疗 l基因转移的治疗基因转移的治疗 向患者的造血干细胞导入正常的向患者的造血干细胞导入正常的珠蛋白珠蛋白基因基因 l反义核酸修复反义核酸修复 通过反义核酸与目标通过反义核酸与目标mRNAmRNA特异性杂交，导致异常表达特异性杂交，导致异常表达 的的mRNAmRNA降解，或修饰降解，或修饰mRNAmRNA的剪接或阻碍的翻译。的剪接或阻碍的翻译。 lcftrcftr基因突变引起基因突变引起 l正常的正常的CFTRCFTR引导氯离子穿

21、过细胞引导氯离子穿过细胞 膜膜 l患者肺细胞分泌过量的黏液，呼患者肺细胞分泌过量的黏液，呼 吸困难吸困难 A child with cystic fibrosis 3. 囊性纤维化（CF） Cystic Fibrosis: Finding the Gene 囊性纤维化的治疗囊性纤维化的治疗 l压缩压缩DNADNA技术技术 l直接将正常直接将正常DNADNA导入细胞，补偿患者缺乏的导入细胞，补偿患者缺乏的CFTRCFTR蛋白蛋白 4. 严重免疫缺陷症(SCID) 1990.9.14 1990.9.14 首例基因治疗首例基因治疗 4 4岁岁 女孩女孩 严重免疫缺陷症严重免疫缺陷症 (SCID) (

22、SCID) 缺乏腺苷酸脱氨酶缺乏腺苷酸脱氨酶(ADA) 2-(ADA) 2-脱脱 氧腺苷含量升高氧腺苷含量升高 毒性毒性 严严 重破坏免疫功能重破坏免疫功能 严重免疫缺陷症(SCID)的治疗 LTRADA SV40LTR ADAADA基因基因 LNLN逆转录病毒载体逆转录病毒载体 靶细胞为病人淋巴细胞靶细胞为病人淋巴细胞 回输回输 Adenosine deaminase 二二 肿瘤的基因治疗肿瘤的基因治疗 1. 1. 针对抑癌基因治疗针对抑癌基因治疗 l肿瘤患者肿瘤患者5050是由于抑癌基因突变导致是由于抑癌基因突变导致 l将正常的抑癌基因导入肿瘤细胞中，以补偿和代替突变将正常的抑癌基因导入肿

23、瘤细胞中，以补偿和代替突变 或却失的抑癌基因。或却失的抑癌基因。 l p53, p16,p53, p16, 2. 2. 针对癌基因治疗针对癌基因治疗 l癌基因是指基因组中能够使正常细胞发生恶性转化的一癌基因是指基因组中能够使正常细胞发生恶性转化的一 类基因。类基因。 l采用反义核酸技术，封闭癌基因，抑制其表达。采用反义核酸技术，封闭癌基因，抑制其表达。 lRasRas, , MycMyc, , SrcSrc 3. 3. 自杀基因疗法自杀基因疗法 l所谓自杀基因治疗，就是将某些细菌、病毒和真菌中特所谓自杀基因治疗，就是将某些细菌、病毒和真菌中特 有的有的药物敏感基因药物敏感基因导入肿瘤细胞，通过

24、此基因编码的特导入肿瘤细胞，通过此基因编码的特 异性酶类将原先对细胞无毒或毒性极低的药物前体异性酶类将原先对细胞无毒或毒性极低的药物前体在肿在肿 瘤细胞内代谢成有毒性的产物，瘤细胞内代谢成有毒性的产物，以达到杀死肿瘤细胞的以达到杀死肿瘤细胞的 目的。目的。 自杀基因疗法自杀基因疗法 l单纯疱疹病毒胸苷激酶基因（单纯疱疹病毒胸苷激酶基因（HSV-HSV-tktk），编码胸苷激酶，），编码胸苷激酶， 使核苷类似物代谢为二磷酸化物，后者在细胞内酶的作用使核苷类似物代谢为二磷酸化物，后者在细胞内酶的作用 下成为有毒性的三磷酸化物而发挥抗肿瘤作用。下成为有毒性的三磷酸化物而发挥抗肿瘤作用。 TdRdTM

25、PdTDPdTTP 1TKHSV1TKHSV cytosol TKcytosol dTMP-K cytosol dNDP-K GCVGCVMPGCVDPGCVTP 1TKHSV1TKHSV cytosol dNDP-K 核苷类似核苷类似 物物 TK基因基因 TK蛋白蛋白 有毒性的三有毒性的三 磷酸化物磷酸化物 肿瘤细胞死亡肿瘤细胞死亡 4. 4. 耐药基因治疗耐药基因治疗 l多药耐受多药耐受MDRMDR：指肿瘤细胞接触某一种抗癌药物产生耐药指肿瘤细胞接触某一种抗癌药物产生耐药 的同时，也对其他结构和功能不同的药物产生交叉耐药的同时，也对其他结构和功能不同的药物产生交叉耐药 性。性。 l耐药基因

26、治疗耐药基因治疗是指将一些耐药基因转移至造血干细胞，是指将一些耐药基因转移至造血干细胞， 以降低化疗药物对骨髓的毒性，这样就可以用高剂量的以降低化疗药物对骨髓的毒性，这样就可以用高剂量的 药物杀死肿瘤细胞而不破坏骨髓细胞。药物杀死肿瘤细胞而不破坏骨髓细胞。 造血干细胞肿瘤细胞 糖蛋白糖蛋白 5. 5. 抑制血管肿瘤生成抑制血管肿瘤生成 l肿瘤的生长和存活依赖于生成的血管为它所提供的氧气肿瘤的生长和存活依赖于生成的血管为它所提供的氧气 和营养物质，阻断肿瘤血管的生成可以抑制肿瘤的生长，和营养物质，阻断肿瘤血管的生成可以抑制肿瘤的生长， 防止肿瘤的转移。防止肿瘤的转移。 lVEGFVEGF是肿瘤诱

27、导血管生成过程中的一个重要的调节因子，是肿瘤诱导血管生成过程中的一个重要的调节因子， 引入反义引入反义VEGFVEGF的的cDNAcDNA基因，通过与基因，通过与VEGFVEGF的的mRNAmRNA结合，来结合，来 抑制抑制VEGFVEGF蛋白的翻译。蛋白的翻译。 VEGF促进血管生成 Circulation. 2003;107:1532-1538 三三 病毒病的基因治疗病毒病的基因治疗 l病毒性肝炎病毒性肝炎 l艾滋病（获得性免疫缺陷综合症）艾滋病（获得性免疫缺陷综合症） 1. 1. 病毒性肝炎病毒性肝炎 l主要由肝炎病毒引起，包括甲型肝炎病毒主要由肝炎病毒引起，包括甲型肝炎病毒HAVHAV

28、，乙型肝炎，乙型肝炎 病毒病毒HBVHBV，丙型肝炎病毒，丙型肝炎病毒HCVHCV，丁型肝炎病毒，丁型肝炎病毒HDVHDV，戊型肝，戊型肝 炎病毒炎病毒HEVHEV。其中主要是。其中主要是HBVHBV和和HCVHCV感染较多。感染较多。 l治疗的根本方法是阻断、抑制甚至是清除肝炎病毒。治疗的根本方法是阻断、抑制甚至是清除肝炎病毒。 l采用采用核酶、反义寡核苷酸、显性失活突变体等方式均可核酶、反义寡核苷酸、显性失活突变体等方式均可 抑制抑制HBVHBV或或HCVHCV病毒的基因复制和表达。病毒的基因复制和表达。 艾滋病（艾滋病（AIDSAIDS） l艾滋病又叫获得性免疫缺陷综合症艾滋病又叫获得性

29、免疫缺陷综合症 l由艾滋病病毒由艾滋病病毒HIVHIV感染感染引起引起 。HIVHIV侵入人体后破坏人体侵入人体后破坏人体 免疫功能，使人体发生多种不可治愈的感染和肿瘤，最免疫功能，使人体发生多种不可治愈的感染和肿瘤，最 后导致被感染者死亡的一种严重传染病。后导致被感染者死亡的一种严重传染病。 HIV病毒的分子结构 HIV模型图模型图 脂双层膜脂双层膜 gp120gp120 gp41gp41 包膜糖蛋白包膜糖蛋白 p24p24衣壳蛋白衣壳蛋白 p14p14内膜蛋白内膜蛋白 p7p7核衣壳蛋白核衣壳蛋白 逆转录酶逆转录酶 蛋白酶蛋白酶 整合酶整合酶 HIVHIV基因组结构：基因组结构： 由由两条

30、单链两条单链RNARNA组成，每个组成，每个RNARNA基因组约为基因组约为9.7k9.7k，在，在 RNA5RNA5端有一帽结构（端有一帽结构（m7G5ppp5GmpNpm7G5ppp5GmpNp）, 3, 3端有端有 polypoly（A A）尾巴。）尾巴。HIVHIV的主要基因结构和组合形式与其他的主要基因结构和组合形式与其他 反转录病毒相同，均由反转录病毒相同，均由55末端长重复（末端长重复（long terminal long terminal repeatrepeat， LTRLTR）、结构蛋白编码区（）、结构蛋白编码区（gaggag）、蛋白酶编码）、蛋白酶编码 区（区（propr

31、o）、具有多种酶活性的蛋白编码区（）、具有多种酶活性的蛋白编码区（polpol）、外）、外 膜蛋白（膜蛋白（envenv）和）和33末端的长重复末端的长重复LTRLTR区组成。区组成。 HIVHIV较其他反转录病毒复杂，因为它有较多的较其他反转录病毒复杂，因为它有较多的 调节基因，调节基因，HIV1HIV1基因编码区有很多重叠，尤其在基基因编码区有很多重叠，尤其在基 因组因组33端。其部分基因如端。其部分基因如TatTat和和RevRev是不连续的，是不连续的， 被插入的内含子分隔成两个外显子。被插入的内含子分隔成两个外显子。HIV1HIV1至少有至少有4 4 个功能性的剪接供体位点和个功能性

32、的剪接供体位点和6 6个剪接受位点个剪接受位点. . HIVHIV的生活周期：的生活周期： 亲代病毒亲代病毒 与细胞表面与细胞表面CD4CD4分子结合分子结合 进入细胞进入细胞 脱去核心蛋白脱去核心蛋白 cDNAcDNA 进入细胞核形成环状进入细胞核形成环状DNA DNA 整整 合进染色体合进染色体DNADNA 原病毒原病毒 转录成转录成mRNAmRNA 子代病毒子代病毒 RNARNA 组装成病毒颗粒组装成病毒颗粒 病毒病毒释放释放 子代病毒子代病毒 艾滋病的致病原因艾滋病的致病原因 lHIVHIV主要通过其表面的主要通过其表面的包膜糖蛋白与宿主细胞包膜糖蛋白与宿主细胞CD4CD4 结合结合，在，在CCR5CCR5或或CXCR-4CXCR-4等辅助受体协同帮助下，等辅助受体协同帮助下， 与细胞膜融合，病毒核心进入细胞内，与细胞膜融合，病毒核心进入细胞内，病毒病毒RNARNA在在 逆转录酶作用下合成前病毒。逆转录酶作用下合成前病毒。一方面病毒以出芽一方面病毒以出芽 方式从细胞释放形成新病毒，并感染新细胞，另方式从细胞释放