季花药培养-公开课精编版

1、 1 1、细胞分裂素和生长素、细胞分裂素和生长素使用顺序不同，结果不同使用顺序不同，结果不同 : : 有利于细胞分裂，有利于细胞分裂， 但细胞不分化但细胞不分化 细胞既分裂也分化细胞既分裂也分化 分化频率分化频率加快加快 生长素生长素 细胞分裂素细胞分裂素： 生长素生长素=细胞分裂素细胞分裂素： 生长素生长素细胞分裂素细胞分裂素： 2、细胞分裂素和生长素、细胞分裂素和生长素使用比例不同，发育方向不同使用比例不同，发育方向不同 利于根的分化和抑制芽的形成利于根的分化和抑制芽的形成 促进愈伤组织的生长促进愈伤组织的生长 有利于芽的分化、抑制根的形成有利于芽的分化、抑制根的形成 大自然为我们创造了千

2、姿百态的植物，许大自然为我们创造了千姿百态的植物，许 多植物都会开出鲜艳、芳香的花朵。多植物都会开出鲜艳、芳香的花朵。 月季月季 牡丹牡丹 导入新课导入新课 百合百合 你知道这些绚丽、芬芳的鲜花你知道这些绚丽、芬芳的鲜花用用 人工方法人工方法是怎样产生的吗？是怎样产生的吗？ 花药花药 花药花药是花丝顶端膨大呈囊状的部分，是雄是花丝顶端膨大呈囊状的部分，是雄 蕊产生花粉的主要部分。蕊产生花粉的主要部分。 花药培养花药培养 采用植物组织培养技术，把发育到一定阶段采用植物组织培养技术，把发育到一定阶段 的花药，通过无菌操作技术，接种在人工培养基的花药，通过无菌操作技术，接种在人工培养基 上，以改变花

3、药内花粉粒的发育程序，诱导其分上，以改变花药内花粉粒的发育程序，诱导其分 化，形成细胞团，进而形成愈伤组织，随后使愈化，形成细胞团，进而形成愈伤组织，随后使愈 伤组织分化成完整的植株的技术。伤组织分化成完整的植株的技术。 课题课题2 2 月季的花药培养月季的花药培养 花的结构花的结构 阅读：阅读：P37-38被子植物的花被子植物的花 粉发育粉发育 重点掌握：被子植物花粉的发育过程重点掌握：被子植物花粉的发育过程 花丝花丝 花药：花药：囊状结构，内有很多花粉囊状结构，内有很多花粉 2、由花粉母细胞（由花粉母细胞（即小孢子母细胞即小孢子母细胞） 花粉花粉， 即：即：。 1、雄蕊、雄蕊 一、基础知识

4、一、基础知识 3、阶段：阶段： 四分体时期、单核期、双核期四分体时期、单核期、双核期 4、过程：、过程： 减数减数 分裂分裂 有丝有丝 分裂分裂 花粉花粉：是小孢子母细胞经过减数分裂而形成的，因此，是小孢子母细胞经过减数分裂而形成的，因此， 花粉是单倍体的生殖细胞。花粉是单倍体的生殖细胞。 注意：注意：精子和营养核的基因型相同。精子和营养核的基因型相同。 阅读：阅读：P38 产生花粉植株的两种途径产生花粉植株的两种途径 重点掌握：花药培养产生花粉植株的两种途径重点掌握：花药培养产生花粉植株的两种途径 移栽移栽 花药中花药中 的花粉的花粉 胚状体胚状体 脱分化脱分化 愈伤组织愈伤组织 花药中花药

5、中 的花粉的花粉 脱分化脱分化 分化分化 丛芽丛芽 再分化再分化 丛芽丛芽 诱导诱导 生根生根 体细胞胚（胚状体）：在组织培养过程中，某些细胞在形态上转体细胞胚（胚状体）：在组织培养过程中，某些细胞在形态上转 变为与变为与合子发育成的胚非常相似的结构合子发育成的胚非常相似的结构，它的它的发育过程发育过程也也与合子与合子 胚类似胚类似，胚芽、胚根、胚轴等结构完整，就像一颗种子。，胚芽、胚根、胚轴等结构完整，就像一颗种子。 这两种途径之间没有绝对的界限，这两种途径之间没有绝对的界限，主要取主要取 决于培养基中激素的种类及浓度配比。决于培养基中激素的种类及浓度配比。 1、材料的选择、材料的选择 不同

6、植物的诱导成功率不同不同植物的诱导成功率不同. 同一植物的不同生理状况也对诱导成功率有直同一植物的不同生理状况也对诱导成功率有直 接的影响接的影响. 材料的选择与培养基的组成材料的选择与培养基的组成 从花药看：从花药看： 从花粉看：从花粉看： 从花蕾看：从花蕾看： 此外，植株生长条件、材料低温预处理、接种密度等对诱导成功此外，植株生长条件、材料低温预处理、接种密度等对诱导成功 率有一定影响。率有一定影响。 月季的初花期月季的初花期（五月初到五月中旬）（五月初到五月中旬） 单核期单核期（一般来说，细胞核从中央移向细（一般来说，细胞核从中央移向细 胞一侧的时期，花药培养成功率最高）胞一侧的时期，花

7、药培养成功率最高） 完全未开放的完全未开放的 选择哪个做材料？选择哪个做材料？ 答：花瓣松动后，微生物就可能侵答：花瓣松动后，微生物就可能侵 入到花药，给材料的消毒带来困难。入到花药，给材料的消毒带来困难。 思考思考 为什么花瓣松动会给材料的消毒为什么花瓣松动会给材料的消毒 带来困难？带来困难？ 二、二、 实验操作实验操作 （一）材料的选取（一）材料的选取 （二）材料的消毒（二）材料的消毒 （三）接种和培养（三）接种和培养 （一）（一） 材料的选取材料的选取 1. 选择花药一般通过镜检来确定其中的花粉是否选择花药一般通过镜检来确定其中的花粉是否 处于适宜的发育期。处于适宜的发育期。 2. 最常

8、用的方法：最常用的方法：醋酸洋红法醋酸洋红法（将染色体染成红色）（将染色体染成红色） 焙花青焙花青铬矾法。铬矾法。 某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花焙花 青青铬矾法铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。 （二）材料的消毒（二）材料的消毒 5 5、无菌水冲洗、无菌水冲洗3 35 5次次 花药的外面有花萼、花瓣保护，通常处于无菌状态花药的外面有花萼、花瓣保护，通常处于无菌状态 1、花蕾用、花蕾用体积分数为体积分数为70%的酒精的酒精浸泡浸泡30秒秒 2、无菌水清洗、无菌水清洗 3、无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分、无菌

9、吸水纸吸干花蕾表面的水分 4、放入、放入质量分数为质量分数为0.1%的氯化汞的氯化汞溶液中溶液中24分钟分钟 （质量分数为质量分数为1%的的次氯酸钙溶液次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液或饱和漂白粉溶液） （三）接种和培养（三）接种和培养 1 1、灭菌后花蕾，要在灭菌后花蕾，要在 下除去萼下除去萼 片和花瓣，并立即将花药接种到培养基片和花瓣，并立即将花药接种到培养基 上。上。 3 3、通常每瓶接种花药通常每瓶接种花药 ，温度控制，温度控制 在在 左右，左右， 。幼小植株形成。幼小植株形成 后才后才 。 2 2、在剥离花药时，要尽量在剥离花药时，要尽量 （否则否则 接种后，容易从受伤部位产生二倍体的愈

10、伤组织接种后，容易从受伤部位产生二倍体的愈伤组织），同），同 时还要彻底时还要彻底 ，因为与花丝相连的花药不利因为与花丝相连的花药不利 于愈伤组织或胚状体的形成于愈伤组织或胚状体的形成。 无菌条件无菌条件 不损伤花药不损伤花药 去除花丝去除花丝 7-107-10个个 2525 不需要光照不需要光照 需要光照需要光照 4 4、一般经过、一般经过20-3020-30天培养后，会发现花药开裂，长出天培养后，会发现花药开裂，长出 愈伤组织或释放出胚状体愈伤组织或释放出胚状体。将愈伤组织及时转移到分。将愈伤组织及时转移到分 化培养基上，以便进一步分化出再生植株。化培养基上，以便进一步分化出再生植株。 5

11、 5、对培养出来的幼苗进一步的、对培养出来的幼苗进一步的鉴定和筛选。鉴定和筛选。 植物组织培养技术与花药培养技术的比较植物组织培养技术与花药培养技术的比较 1 1、离体培养的外离体培养的外 植体为植体为体细胞。体细胞。 2 2、有丝分裂的过有丝分裂的过 程，程，染色体数量不染色体数量不 变。变。 1 1、花粉是花粉是生殖细胞生殖细胞， 得到的得到的单倍体植株单倍体植株，弱，弱 小且高度不育。小且高度不育。 2 2、秋水仙素处理，染秋水仙素处理，染 色体加倍，恢复正常的色体加倍，恢复正常的 染色体数，为染色体数，为。 离体的植物组织经离体的植物组织经脱分化脱分化形成形成愈伤组织愈伤组织 （或胚状

12、体）（或胚状体），再分化再分化（或分化）（或分化）成成丛芽丛芽， 诱导出诱导出根根，然后进行移栽。，然后进行移栽。 基础基础 知识知识 实验操作实验操作 被子植被子植 物的花物的花 粉发育粉发育 花粉花粉 双核期双核期 其他因素其他因素 接种密度接种密度 小小孢孢子四分体时期子四分体时期 影响因素影响因素 花粉发育经花粉发育经 历的时期历的时期 花粉囊花粉囊 单核期单核期 亲本植株的生长条件亲本植株的生长条件 材料低温预处理材料低温预处理 月月 季季 的的 花花 药药 培培 养养 材料与培养基材料与培养基 材料的选取材料的选取 产生途径产生途径 结果分析与评价结果分析与评价 消毒消毒 花粉花粉 培养条件培养条件 接种和培养接种和培养 课堂小结课堂小结 1 1、关于被子植物花粉发育的说法，不正确的是（关于被子植物花粉发育的说法，不正确的是（ ） A A、花粉粒是在花药中的