培养基母液的配制

1、2021/3/111 任务二 培养基母液配制 主题二主题二 培养基及其制备培养基及其制备 2021/3/112 任务二培养基母液配制任务二培养基母液配制 知识回顾知识回顾 2021/3/113 N、P、K 微量元素微量元素 大量元素大量元素 Ca、Mg、S Fe、Mn、Zn 、B 、Cu 、Mo 有机添加物有机添加物 糖糖 维生素维生素 肌醇肌醇 氨基酸氨基酸 琼琼 脂脂 或或 卡卡 拉拉 胶胶 介质和介质和 溶媒溶媒 活性物质活性物质 （植物激素植物激素） 支持物质支持物质有机物质有机物质 无机盐无机盐 水水 培养基培养基 2021/3/114 任务二培养基母液配制中浓度问题任务二培养基母液

2、配制中浓度问题 及相关计算及相关计算 知识回顾知识回顾 相当于土壤，提供离体器官生长所需要的营养、环境和活性物质相当于土壤，提供离体器官生长所需要的营养、环境和活性物质 与土壤相比较，培养基缓冲性能很小，所以要求培养基各成分浓度与土壤相比较，培养基缓冲性能很小，所以要求培养基各成分浓度精确精确 2021/3/115 培养基各成分的培养基各成分的 浓度用什么表示浓度用什么表示 可以既方便又精可以既方便又精 确地配制培养基确地配制培养基 呢？呢？ 2021/3/116 任务二任务二 培养基母液配制培养基母液配制 l质量体积浓度：质量体积浓度：用单位体积（ 1升或1毫升）溶液中 所含的溶质质量数来表

3、示的浓度叫质 量-体积浓度， 单位常用：g/L或 g/mL 或mg/mL 如：0.9g/L的NaCl溶液即每一升水中含有0.9克 的氯化钠. l或微克毫升表示或ppm、ppb表示。（ppm称为百万分率， l ppm就是说百万之一或者是1微克毫升，ppb称为十亿分 率，l ppb就是说十亿分之一或0.001微克毫升）。 l表2-1（P20）大量元素20倍浓缩液NH4NO3 浓度为 33000 mg/L表示1L培养基中质量为33000mg，即33g. CuSO4.5H2O0.05mg/L表示1L培养基中质量为0.05mg，即 105 g。 2021/3/117 2021/3/118 什么是培养基母

4、液？什么是培养基母液？ l母液：即贮备液，指培养基配制时欲配制液的 浓缩液，一般母液配成比所需浓度放大浓度放大10-100 倍。 l这样不但可以保证各物质成分称量的精准性称量的精准性及 配制时的快速快速移取，而且浓缩液体积小便于低体积小便于低 温保藏温保藏。 l母液配制时比所需浓度放大浓度放大X倍，在配制培养 基时按配制培养基的体积（V升）的V/X吸取 母液即可。 2021/3/119 2021/3/1110 2021/3/1111 培养基母液配制培养基母液配制 2021/3/1112 培养基母液配制步骤培养基母液配制步骤 计算计算 称量称量 溶解溶解 定容定容 写标签写标签 保存保存 按下表

5、按下表进行计算进行计算 电子天平（百分之一、万分方一）烧杯、药匙电子天平（百分之一、万分方一）烧杯、药匙 蒸馏水、量筒、玻棒、可调式电炉、洗瓶蒸馏水、量筒、玻棒、可调式电炉、洗瓶 容量瓶（容量瓶（1000ml、500ml、 100ml） 母液名称、浓缩倍数、配制人员姓名、时间母液名称、浓缩倍数、配制人员姓名、时间 冰箱冰箱 2021/3/1113 母液母液成分成分 浓缩倍数浓缩倍数（X X） 数量（数量（g/g/L L）配制配制1L1L培养基培养基 吸取母液的吸取母液的毫升数毫升数 （V/XV/X） 母液母液1 1 （大量（大量 元素）元素） NH4NO31016.5100 KNO319 Ca

6、Cl.2H2O4.4 MgSO4.7H2O3.7 KH2PO4.1.7 母液母液2 2 （微量（微量 元素）元素） KI1000.08310 H3BO40.62 MnSO4.4H2O2.23 ZnSO4.7H2O0.86 Na2.MoO4.2H2O0.025 CuSO4.5H2O0.0025 CoCl2.6H2O0.0025 母液母液 3 3 （铁盐）（铁盐） FeSO4. 7H2O1002.7810 Na2.EDTA.2H2O3.73 母液母液4 4 （有机（有机 物质）物质） 肌醇（环已六醇）200205 烟酸（维生素B3）0.1 盐酸吡哆醇（维生素B6）0.1 盐酸硫胺素(维生素B1)0

7、.1 甘氨酸0.4 2021/3/1114 培养基母液配制计算培养基母液配制计算 母液母液成分成分浓缩倍数浓缩倍数浓度浓度g/Lg/L配制母液配制母液 毫升数毫升数 各成分的质量（各成分的质量（g） 母液母液1 1NH4NO31016.5 1000 KNO319 CaCl.2H2O4.4 MgSO4.7H2O3.7 KH2PO4.1.7 母液母液2 2KI1000.083 500 H3BO40.62 MnSO4.4H2O2.23 ZnSO4.7H2O0.86 Na2.MoO4.2H2O0.025 CuSO4.5H2O0.0025 CoCl2.6H2O0.0025 母液母液 3 3 （铁盐）（铁

8、盐） FeSO4. 7H2O1002.78 500 Na2.EDTA.2H2O3.73 母液母液4 4 （有机物（有机物 质）质） 肌醇（环已六醇）20020 100 烟酸（维生素B3）0.1 盐酸吡哆醇（维生素B6）0.1 盐酸硫胺素(维生素B1)0.1 甘氨酸0.4 2021/3/1115 电子天平的使用方法电子天平的使用方法 l (1)开机 开机前应检查天平的水平仪，确定天平处于水平状态。天平 的水平调整可通过其底部调整螺丝完成。 天平接通电源预热至指定时间。 l(2)校准 天平使用前要进行校准工作，校准程序可按说明书进行。用内 装校准砝码或外置砝码校准。 当天平较长时间(5d以上)放置

9、不用、天平位置发生移动、测试 环境不理想或为获得精确称量等，均应在使用前进行天平的校准 工作。 l(3)称量 按下显示屏的开关键，待显示稳定的零点后，将被称量物体置 于秤盘上，待数字稳定后，该数字即为被称量物的质量，按动相 关的按键可以实现“去皮”，“增重”，“减重”等称量功能。 l(4)称量结束后，应及时清理秤盘，关好天平门。 2021/3/1116 l母液1中CaCl2.2H2O溶解时需加热溶解。 l母液3FeSO4.7H2O和Na2EDTA需分别加热溶解后 混合。 l加热溶解的成分需冷却至室温后冷却至室温后再转移至容量瓶 定容。 2021/3/1117 容量瓶的定容方法容量瓶的定容方法 2021/3/1118 2021/3/1119 本课小结本课小结 l培养基