通冠胶囊对骨髓单个核细胞向损伤血管内膜迁移分化的影响

1、 30只只Wistar大鼠，大鼠，10只为供体，只为供体，20只为受体只为受体 普通饮食一周后，普通饮食一周后，20只受体大鼠行颈动脉损伤只受体大鼠行颈动脉损伤 取供体大鼠骨髓制成单个核细胞悬液并取供体大鼠骨髓制成单个核细胞悬液并PKH26标标 记，记，0.2ml/只由受体大鼠尾静脉注入只由受体大鼠尾静脉注入 通冠胶囊组通冠胶囊组生理盐水组生理盐水组 4周后处死大鼠，提取标本，冰冻切片周后处死大鼠，提取标本，冰冻切片 免疫荧光组织学检测免疫荧光组织学检测ELISA检测检测VEGF、SDF-1 收集数据，录入数据库，分析数据收集数据，录入数据库，分析数据 技术路线技术路线 检测血管内膜检测血管内

2、膜/膜厚度膜厚度 随机随机 颈动脉三叉颈动脉三叉导丝进入导丝进入 球囊扩张拉伤球囊扩张拉伤损伤图解损伤图解 V Lindner. Mouse model of arterial injury.Circulation 单核细胞单核细胞 100PKH26染后的单核细胞染后的单核细胞 单核细胞层（白膜层）单核细胞层（白膜层） 损伤后损伤后3 3天天 损伤后损伤后1 1周周 损伤后损伤后3 3周周 通冠胶囊组通冠胶囊组 盐水组盐水组 颈动脉横切颈动脉横切HE染色染色50 通冠胶囊组通冠胶囊组 盐水组盐水组 颈动脉弹力纤维染色颈动脉弹力纤维染色50 治疗组内膜面积和内膜/中层面积比值均低于对照组（P0.

3、05）。提示通冠胶囊具 有抑制球囊损伤后血管内膜增殖的作用。 张敏州，等张敏州，等.通冠胶囊对兔球囊血管成形术后血管病理形态的影响，中国中医急症，通冠胶囊对兔球囊血管成形术后血管病理形态的影响，中国中医急症，2006 P0.01 P0.05 盐水组盐水组50 PKH26FITC-VEGFR-2 通冠胶囊组通冠胶囊组50 药物干预后，药物干预后，ELISAELISA法检测两组大鼠血清中基质细胞衍生因子法检测两组大鼠血清中基质细胞衍生因子-1-1 （SDF-1SDF-1）、血管内皮细胞生长因子（）、血管内皮细胞生长因子（VEGFVEGF）的浓度，探讨通冠胶）的浓度，探讨通冠胶 囊动员内皮祖细胞的分

4、子机制。囊动员内皮祖细胞的分子机制。 VEGF浓度（浓度（pg/ml ） SDF-1浓度（浓度（pg/ml ） n 2 2周、周、3 3周后通冠胶囊组周后通冠胶囊组VEGFVEGF和和SDF-1SDF-1浓度均较对照组有明显升高（浓度均较对照组有明显升高（P P0.050.05） 体育锻炼、雌激素体育锻炼、雌激素 、PHA、他汀、他汀、 G-CSF SDF-1 VEGF PDGF、EPO、 HGF、Ang-I、 SCF、FGF、PGF 凋亡体、细胞与细胞凋亡体、细胞与细胞 接触、黏附分子接触、黏附分子 VEGF、SDF-1 对内皮祖细胞动员归巢分化作用的因素对内皮祖细胞动员归巢分化作用的因素

5、I型型PI3K（IA和和IB），），IA 型型PI3K（p110和和p85），），PI3K通过两种方式激活通过两种方式激活, 一种是与一种是与 具有磷酸化酪氨酸残基的生长因子受体或连接蛋白相互作用具有磷酸化酪氨酸残基的生长因子受体或连接蛋白相互作用, 引起二聚体构象改变而被引起二聚体构象改变而被 激活激活; 另一种是通过另一种是通过Ras和和p110直接结合导致直接结合导致PI3K的活化。的活化。PI3K激活产生第二信使激活产生第二信使 PIP3, PIP3与与Akt和和PDK1结合结合, 促使促使Akt的活化。的活化。Akt还能通过还能通过PDK2而被激活。活化的而被激活。活化的 Akt通过

6、磷酸化作用激活或抑制其下游靶蛋白通过磷酸化作用激活或抑制其下游靶蛋白Bad、Caspase9、NF-B、GSK-3、 FKHR 、p21Cip1和和p27 Kip1等等, 进而调节细胞的增殖、分化、凋亡以及迁移等。进而调节细胞的增殖、分化、凋亡以及迁移等。 1010 24h 48h 组别组别ConSimv TGCWortmannin 5.420.56 7.010.65 a b14.720.21a c2.870.63 3.760.2114.720.21a b 2.050.07 a 与con相比 P0.01 b 与 WT相比 P0.01 c TGC24h与 simv24h相比 P0.01 18.72.720.23 2010 组别组别conSimvTGC Wortmannin 24h 48h 26.661.32 30.662.29a b 31.442.69a b25.111.96 20.662.4431.223.86a b30.771.64a b19.771.56 a 与con相比 P0.01b 与 WT相比 P0.01 20102