肺癌的早期诊断

1、肺癌的早期诊断肺癌的早期诊断 内容提要内容提要 肿瘤细胞生物学基础肿瘤细胞生物学基础 肺癌的流行特征肺癌的流行特征 肺癌早期诊断肺癌早期诊断 肺癌的影像学检查肺癌的影像学检查 细胞学与病理学检查细胞学与病理学检查 分子生物学技术分子生物学技术 肺癌筛查肺癌筛查 小结小结 什么是癌症？什么是癌症？ l癌症是一组复杂的疾病，可累及全身各种不同的细胞和组癌症是一组复杂的疾病，可累及全身各种不同的细胞和组 织织 l癌症的特点癌症的特点: 细胞不受控制的繁殖和生长细胞不受控制的繁殖和生长 癌细胞能扩散并侵袭身体其它部位癌细胞能扩散并侵袭身体其它部位转移转移 信号传导失常信号传导失常 自分泌生长因子增加自

2、分泌生长因子增加 基质金属酶分泌增加基质金属酶分泌增加 癌基因激活癌基因激活 / 抑癌基因失活抑癌基因失活 血管生成因子分泌增加血管生成因子分泌增加 生长因子生长因子 / 生长因子受体增加生长因子受体增加 肿瘤形成的分子生物学基础肿瘤形成的分子生物学基础 肿瘤细胞生物学肿瘤细胞生物学 肿瘤细胞生物学肿瘤细胞生物学 细胞复制过程细胞复制过程 恶性转化恶性转化 双倍化双倍化 10 x106个细胞个细胞 (20次的倍化次的倍化) 肿瘤尚不可测量肿瘤尚不可测量 10 x109个细胞个细胞 (30次的倍化次的倍化) 肿瘤包块出现肿瘤包块出现 10 x1012个细胞个细胞 (40次的倍化次的倍化) 肿瘤重

3、达肿瘤重达2 lb 双倍化双倍化 双倍化双倍化 双倍化双倍化 肿瘤细胞生物学肿瘤细胞生物学 致癌因子致癌因子 细胞突变细胞突变 血管形成血管形成迁移及浸润迁移及浸润 毛细血管毛细血管/静脉静脉/淋巴管形成淋巴管形成 粘附粘附 微血管床捕获微血管床捕获 栓塞与循环栓塞与循环 向血管外组织间隙浸润向血管外组织间隙浸润 对微环境的反应对微环境的反应 肿瘤细胞增生肿瘤细胞增生 血管形成血管形成 转移转移 转移至其他转移至其他 组织和器官组织和器官 转移转移 多种细胞的移行多种细胞的移行 （淋巴细胞，（淋巴细胞， 血小板）血小板） 肺癌流行特征肺癌流行特征 l高发病率高发病率 男性男性 : 第一第一 女

4、性女性: 第二第二 19731990： 每年递增每年递增11.9 l高死亡率高死亡率 男性男性 : 第一第一 女性女性: 第一第一 晚期晚期 70%80% 5年存活率：年存活率： 10%13% 早期早期 10 5年生存率：年生存率： 8590 l肺癌是全球的常见的恶性肿瘤肺癌是全球的常见的恶性肿瘤 l是绝大多数国家因癌症死亡的首要原因是绝大多数国家因癌症死亡的首要原因 l是当今世界对人类健康与生命威胁最大的恶性肿瘤是当今世界对人类健康与生命威胁最大的恶性肿瘤 l多中心、大样本、病例多中心、大样本、病例-对照研究或对照研究或/和前瞻性研究证实，系和前瞻性研究证实，系 统有效的筛查可以大大提高肺癌

5、早诊、早治率，提高治愈统有效的筛查可以大大提高肺癌早诊、早治率，提高治愈 率，降低死亡率，改善患者预后和生活质量率，降低死亡率，改善患者预后和生活质量 肺癌流行特征肺癌流行特征 Worldwide Incidence of lung Cancer *Incidence per 100,000 population. male 54.8 female 8.1 male 75.9 female 10.3 male 39.3 female 11.2 male 47.6 female 16.1 male 34.7 female 13.4 male 12.9 female 2.6 male 29.1 f

6、emale 7.7 male 69.6 female 32.9 male 19.3 female 7.9 male 55.1 female 7.6 Parkin DM, et al. CA Cancer J Clin. 1999;49:33-64. 5-year Survival Rates of Lung Cancer Parkin DM, et al. CA Cancer J Clin. 1999;49:33-64. 7% 12% 21% 13% 8% 8% 10% 20% 14% Females Males 80 60 40 20 0 1930 1940 1950 1960 1970 1

7、980 1990 1997 80 60 40 20 0 1930 1940 1950 1960 1970 1980 1990 1997 Uterus Breast Pancreas Ovary Stomach Lung and bronchus Colon and rectum Pancreas Liver Prostate Stomach Lung and bronchus Colon and rectum Leukemia Rate per 100,000 Rate per 100,000 Year Year 美国癌症死亡率美国癌症死亡率: 无论男性还是女性，肺癌均为头号致死肿瘤无论男性还

8、是女性，肺癌均为头号致死肿瘤 Lung cancer - US incidence and mortality rates (1973-1996) 10 50 100 Incidence - males Mortality - males Incidence - females Mortality - females Rate per 100,000 people (log scale) 1974 76 78 80 82 84 86 88 90 92 94 96 Year of diagnosis/death Ries et al 1999 Epidemiological Characteri

9、stic of Lung Cancer 中国第三次全国死因调查主要情况中国第三次全国死因调查主要情况 l脑血管病、恶性肿瘤是我国前两位死亡原因，分别占死亡脑血管病、恶性肿瘤是我国前两位死亡原因，分别占死亡 总数的总数的22.45%和和22.32% 。 l恶性肿瘤是城市首位死因（占城市死亡总数的恶性肿瘤是城市首位死因（占城市死亡总数的25.0%），）， 农村为第二位死因（占农村为第二位死因（占21.0%）。）。 l过去过去30年间，我国肺癌死亡率上升了年间，我国肺癌死亡率上升了465 。 l肺癌肺癌已代替肝癌成为我国已代替肝癌成为我国首位首位恶性肿瘤死亡原因（占全部恶性肿瘤死亡原因（占全部 恶性

10、肿瘤死亡的恶性肿瘤死亡的22.7%）。）。 中华人民共和国卫生部，2008-04-29 肺癌自然发展过程肺癌自然发展过程 l由吸烟所致肺癌，在一个细胞发生癌变后，大约需要由吸烟所致肺癌，在一个细胞发生癌变后，大约需要810 年才能生长到年才能生长到1.0cm直径直径 l一个一个1.0cm 直径的非小细胞肺癌，直径的非小细胞肺癌， 不经任何治疗的情况下，不经任何治疗的情况下， 大约在大约在23 年内死亡年内死亡 l一个由吸烟所致的非小细胞肺癌，在不经任何治疗的情况一个由吸烟所致的非小细胞肺癌，在不经任何治疗的情况 下，其自然病程约下，其自然病程约1013 年年 l肺癌的自然发展肺癌的自然发展 量

11、变到质变：暴露致癌剂量变到质变：暴露致癌剂细胞转化细胞转化癌前病变癌前病变原原 位癌位癌 质变到量变：原位癌质变到量变：原位癌肿瘤发展，侵袭，远处转移肿瘤发展，侵袭，远处转移 肺癌的癌前病变肺癌的癌前病变 l鳞状上皮增生鳞状上皮增生(dysplasia)：鳞癌的癌前病变鳞癌的癌前病变 l非典型腺瘤样增生非典型腺瘤样增生(atyppical adenomatous hyperplasia)：肺腺癌的癌肺腺癌的癌 前病变前病变 l弥漫性特发性肺神经内分泌细胞增生：弥漫性特发性肺神经内分泌细胞增生：类癌的癌前病变类癌的癌前病变 l肺癌的癌前病变有肺癌的癌前病变有3 种可能的结果：种可能的结果： 进展

12、到原位癌（进展到原位癌（ 10%20% ） 局限于上皮上持续不变局限于上皮上持续不变 病变逆转消失病变逆转消失 l肺癌浸润前病变包括肺癌浸润前病变包括: 不典型支气管上皮增生和原位癌不典型支气管上皮增生和原位癌 原位癌原位癌 80%90 进展为浸润癌进展为浸润癌 10 自动逆转或稳定不变自动逆转或稳定不变 （ 80%90% ） Mountain CF. Chest 1997; 111: 1710-1717 NSCLC stages - an overview Disease Early Localized Advanced Stage 0 IA IB IIA IIB IIIA IIIB IV

13、TNM TIS N0 M0 (carcinoma in situ) T1 N0 M0 T2 N0 M0 T1 N1 M0 T2 N1 M0 T3 N0 M0 T3 N1 M0 T1-3 N2 M0 T4, Any N, M0 Any T, N3, M0 Any T, Any N, M1 肺癌的预后与诊断时的临床分期相关肺癌的预后与诊断时的临床分期相关 l0期肺癌患者术后的期肺癌患者术后的5年生存率可达年生存率可达90% 以上以上 lIA期肺癌患者术后期肺癌患者术后5 年生存率为年生存率为60% l而而II- IV期病人总的期病人总的5 年生存率则从年生存率则从40%下降到下降到5% 以下以下

14、lIA期肺癌患者未经治疗者期肺癌患者未经治疗者5年生存率仅为年生存率仅为10%，局限性肺切，局限性肺切 除者效果亦较差除者效果亦较差 l在肺癌高危人群中实施筛查在肺癌高危人群中实施筛查 l在在NSCLC 的的 I 期可治愈的阶段发现并进行治疗期可治愈的阶段发现并进行治疗 胸部胸部X 光照片光照片 l胸部胸部X 光照片成为诊断肺部疾病的重要方法光照片成为诊断肺部疾病的重要方法 l胸腔胸腔X线检查的敏感性大约是直径线检查的敏感性大约是直径1 cm 以上的结节性病变以上的结节性病变 l缺点：是组织结构互相重叠成像，对肺门区、纵隔旁，心缺点：是组织结构互相重叠成像，对肺门区、纵隔旁，心 脏后，近横膈区

15、等部位的病变难于显示脏后，近横膈区等部位的病变难于显示 l目前研究表明目前研究表明X 线胸片不能发现的隐蔽区的肺癌占线胸片不能发现的隐蔽区的肺癌占 8.1%19.0% l对提高早期肺癌筛出率，降低肺癌死亡率收效甚微对提高早期肺癌筛出率，降低肺癌死亡率收效甚微 早期诊断早期诊断影像学检查影像学检查 早期诊断早期诊断影像学检查影像学检查 l螺旋螺旋CT可发现可发现0.1-0.5 cm的小结节的小结节 l能够精确显示肺内小结节的细微结构和边缘特征能够精确显示肺内小结节的细微结构和边缘特征 lHenschke (2001) 采用低剂量螺旋采用低剂量螺旋CT对对1000例例60岁以上、吸烟指数大岁以上、

16、吸烟指数大 于于200的志愿者进行普查的志愿者进行普查 CT发现肺癌发现肺癌27例例 (是胸片发现的是胸片发现的4倍倍) 其中其中I期肺癌期肺癌23例例 (是胸片发现的是胸片发现的6倍倍) CT发现的发现的27例，例，26例例(96%)能手术切除能手术切除 极大地改善了肺癌患者的预后极大地改善了肺癌患者的预后 l国际早期肺癌行动计划国际早期肺癌行动计划 (2005) 采用低剂量螺旋采用低剂量螺旋CT对无症状高危人群筛对无症状高危人群筛 查发现了查发现了458例肺癌例肺癌 其中其中80 为为I期期 行手术治疗的肺癌患者行手术治疗的肺癌患者8年生存率为年生存率为95-98 螺旋螺旋CT PET (

17、正电子发射断层扫描正电子发射断层扫描) - CT l肿瘤细胞肿瘤细胞葡萄糖代谢水平增加葡萄糖代谢水平增加 对注入体内的放射性对注入体内的放射性 18F-脱氧葡萄糖 脱氧葡萄糖 (18F-FDG)摄取率增加摄取率增加(呈正相关呈正相关) l PETPET有助于胸片或有助于胸片或CTCT检查发现病变的定性诊断，以及肺癌检查发现病变的定性诊断，以及肺癌 治疗前后的疗效判断治疗前后的疗效判断 l肿瘤的诊断的敏感性为肿瘤的诊断的敏感性为95 , 特异性为特异性为80，纵隔分期准，纵隔分期准 确性达确性达90% l由于由于PET高阴性预计值，对高阴性预计值，对PET阴性病变仅推荐放射学随阴性病变仅推荐放射

18、学随 访，而不需做活检访，而不需做活检 lPET-CT融合融合CT提供的高分辨率解剖信息和提供的高分辨率解剖信息和PET所提供的所提供的 生化信息，提高了对病变性质和病变部位诊断的准确性生化信息，提高了对病变性质和病变部位诊断的准确性 早期诊断早期诊断影像学检查影像学检查 Positive Electron Tomography (PET) -CT l白光纤维支气管镜白光纤维支气管镜(white-light bronchoscopy，WLB)检检 查主要用于中心型肺癌筛查查主要用于中心型肺癌筛查 l可以获得组织学和细胞学的标本可以获得组织学和细胞学的标本 l中心型肺癌纤维支气管镜的检出率可达中

19、心型肺癌纤维支气管镜的检出率可达95%以上以上 l周围型只有周围型只有50%的检出率的检出率 l对早期肺癌，尤其是癌前病变和原位癌难以发现对早期肺癌，尤其是癌前病变和原位癌难以发现 早期诊断早期诊断影像学检查影像学检查 白光纤维支气管镜检查（白光纤维支气管镜检查（WLB） 荧光纤维支气管镜检查（荧光纤维支气管镜检查（LIFE） l对白光纤维支气管镜（对白光纤维支气管镜（WLB）不能观察）不能观察 到的可疑部位进行定位活检和局部处理，到的可疑部位进行定位活检和局部处理， 提高肺癌早期诊断的阳性率提高肺癌早期诊断的阳性率 l光敏物质血卟啉衍生物光敏物质血卟啉衍生物(HgD)静脉注入人静脉注入人 体

20、后，因体后，因HgD与癌细胞有较强的亲和力，与癌细胞有较强的亲和力， 在给药在给药2472 h荧光纤支镜检查荧光纤支镜检查 l400440nm蓝光照射下，正常组织蓝光照射下，正常组织绿绿 光，原位癌或早期浸润癌光，原位癌或早期浸润癌红光红光 l机理：可能是肿瘤上皮细胞增厚、血流增机理：可能是肿瘤上皮细胞增厚、血流增 多多 早期诊断早期诊断影像学检查影像学检查 荧光纤维支气管镜荧光纤维支气管镜 (Lung imaging fluorescence bronchoscope, LIFB) lLam 用用WLB和和LIFB检查检查233例肺癌高危人群者，显示诊断的敏感性例肺癌高危人群者，显示诊断的敏

21、感性 中重度不典型增生中重度不典型增生 原位癌原位癌 WLB 38.5% 40% LIFB 73.1% 91.4% WLB LIFB 气管内镜超声气管内镜超声( (EBUS) ) l EBUS对早期发现气管腔外、纵隔内、气管黏膜下生长的对早期发现气管腔外、纵隔内、气管黏膜下生长的 肿瘤有重要作用肿瘤有重要作用 lHerth通过通过131例患者研究发现，对气管外肿瘤诊断例患者研究发现，对气管外肿瘤诊断 EBUS CT 敏感性敏感性 89% 75% 特异性特异性 100% 28 % 准确性准确性 94% 51 % 早期诊断早期诊断影像学检查影像学检查 气管内镜超声介导细针活检（气管内镜超声介导细针

22、活检（EBUS-FNAEBUS-FNA） l对于中心部位的肿瘤的诊断、纵隔淋巴结的分析及检测肿瘤的外侵，对于中心部位的肿瘤的诊断、纵隔淋巴结的分析及检测肿瘤的外侵， EUS-FNA是一种准确、安全、创伤极小的侵入性检查手段是一种准确、安全、创伤极小的侵入性检查手段 lAnnema对对32例纤维支气管镜检查为阴性、位于中心部位的腔外型肺例纤维支气管镜检查为阴性、位于中心部位的腔外型肺 癌，用癌，用EUS-FNA，有，有31例确诊为肺癌例确诊为肺癌(97 %)，且检查者无并发症发生，且检查者无并发症发生 早期诊断早期诊断影像学检查影像学检查 支气管内超声可见 一异常回声区 超声引导下穿刺针刺入粘膜

23、 超声实时引导下 穿刺针刺入病灶 Bronchoscopic View of a Transbronchial Needle Aspiration of a Subcarinal Node Herth FJ. Eur Respir J 2006 涂片可见癌细胞 cancer cells found in the TBNA tissue samples 常规痰脱落细胞学检查常规痰脱落细胞学检查 l具有简便易行、安全无痛，可重复多次检查，在临床应用已具有简便易行、安全无痛，可重复多次检查，在临床应用已80年年 l可系统动态地观察上皮细胞从不典型增生到癌前期病变直至发展为浸润癌的连可系统动态地观察上

24、皮细胞从不典型增生到癌前期病变直至发展为浸润癌的连 续渐变过程，能查到其他方法不易发现的隐性肺癌，是肺癌早期诊断的主要手续渐变过程，能查到其他方法不易发现的隐性肺癌，是肺癌早期诊断的主要手 段之一段之一 l检查是建立在形态学基础上的判断，往往因痰标本中肿瘤细胞过少且易变性、检查是建立在形态学基础上的判断，往往因痰标本中肿瘤细胞过少且易变性、 组织变异和形态上的不典型增生而致组织变异和形态上的不典型增生而致 阳性检出率低且不稳定阳性检出率低且不稳定 l准确性还受到其它许多因素的影响，如：痰标本的留取和处理方法、涂片制作、准确性还受到其它许多因素的影响，如：痰标本的留取和处理方法、涂片制作、 染色

25、技巧、读片水平等染色技巧、读片水平等 l该方法主要适应于中心型肺癌的诊断，对鳞癌和小细胞肺癌的检出率高，大约该方法主要适应于中心型肺癌的诊断，对鳞癌和小细胞肺癌的检出率高，大约 为为50% ，对周围型肺癌较低，对周围型肺癌较低 l痰细胞学早期肺癌的敏感性仅为痰细胞学早期肺癌的敏感性仅为20% 30%，可靠性差距较大，为，可靠性差距较大，为13% 82% l最大的局限性在于对于早期肺癌存在无法定位，进而无法治疗的问题最大的局限性在于对于早期肺癌存在无法定位，进而无法治疗的问题 早期诊断早期诊断细胞学与病理学检查细胞学与病理学检查 痰薄层液基细胞学技术痰薄层液基细胞学技术 l1996 年美国年美国

26、FDA 批准薄层液基细胞学技术应用于痰检批准薄层液基细胞学技术应用于痰检 l目前有目前有Thin-Prep 检测系统和检测系统和AutoCyte-Prep 检测系统检测系统 l把痰标本经过离心、分层等技术将细胞团块松散并与黏性碎片分开，把痰标本经过离心、分层等技术将细胞团块松散并与黏性碎片分开， 细胞单个分布在样本中细胞单个分布在样本中 l单个细胞被均匀地转移到玻片上，最后固定玻片和染色，直接制成观单个细胞被均匀地转移到玻片上，最后固定玻片和染色，直接制成观 察清晰的薄层涂片察清晰的薄层涂片 lFischler 等对等对152 例经常规痰脱落细胞学检查结果不明确者，例经常规痰脱落细胞学检查结果

27、不明确者， 用痰液用痰液 基细胞学技术重检，基细胞学技术重检，145 例（例（95%）检测结果与术后病理检查一致）检测结果与术后病理检查一致 lLeung 等对等对230 份标本检查显示，份标本检查显示， 液基细胞学检查的敏感性为液基细胞学检查的敏感性为97.6%， 特异性为特异性为92.9%，阳性预测值为，阳性预测值为93% l液基细胞学技术对于诊断早期和疑似肺癌病例，液基细胞学技术对于诊断早期和疑似肺癌病例， 明显优于常规痰脱落明显优于常规痰脱落 细胞学技术细胞学技术 早期诊断早期诊断细胞学与病理学检查细胞学与病理学检查 肺癌早期分子标志物检测肺癌早期分子标志物检测 癌胚抗原癌胚抗原 ca

28、rcino-embryonic antigen (CEA) lCEA是一种人类胚胎抗原决定簇的酸性糖蛋白，为非特异是一种人类胚胎抗原决定簇的酸性糖蛋白，为非特异 性肿瘤标志物性肿瘤标志物 l有有30 70 的肺癌的肺癌CEA水平升高水平升高 lCEA的水平与疾病预后及治疗效果密切相关的水平与疾病预后及治疗效果密切相关 lPlavec测定原发性肺癌患者胸水中测定原发性肺癌患者胸水中CEA值，阳性率值，阳性率60 ， 特异性为特异性为90 lCEA对诊断肺腺癌的临床价值较大对诊断肺腺癌的临床价值较大 lCEA阴性不能排除肺癌，若阴性不能排除肺癌，若CEA明显阳性要高度怀疑肺癌明显阳性要高度怀疑肺癌

29、 早期诊断早期诊断分子生物学技术分子生物学技术 肺癌早期分子标志物检测肺癌早期分子标志物检测 端粒酶端粒酶 （telomerase） l一种特殊的反转录酶，能以自身一种特殊的反转录酶，能以自身RNA为模板，反转录合成为模板，反转录合成 具的重复具的重复DNA序列染色体末端的端粒序列染色体末端的端粒DNA，以保持端粒的，以保持端粒的 长度，从而使体细胞得以无限分裂长度，从而使体细胞得以无限分裂 l研究表明，端粒酶阳性率：肺癌组织（研究表明，端粒酶阳性率：肺癌组织（94%）、支气管刷）、支气管刷 落细胞（落细胞（91.3%）、）、BALF （86.7%） l有研究发现有研究发现 在肺癌的极早期，甚

30、至在吸烟或有吸烟史的患在肺癌的极早期，甚至在吸烟或有吸烟史的患 者癌前期就可以检测到端粒酶者癌前期就可以检测到端粒酶 l端粒酶作为新的肺癌标志物而应用于肺癌的早期诊断端粒酶作为新的肺癌标志物而应用于肺癌的早期诊断 早期诊断早期诊断分子生物学技术分子生物学技术 核内不均一核糖蛋白核内不均一核糖蛋白(hnRNP) lhnRNP是一种核内是一种核内RNA 结合蛋白，结合蛋白，A2、B1是其核心蛋白中两种主要是其核心蛋白中两种主要 的蛋白质的蛋白质 l它的异常表达可使它的异常表达可使DNA 的转录翻译过程失去正常控制，导致癌症的发的转录翻译过程失去正常控制，导致癌症的发 生生 lhnRNP B1 过表

31、达见于非常早期的人肺癌中，过表达见于非常早期的人肺癌中， Sueoka (2001) 报道在报道在 期肺癌期肺癌的组织样本中抗的组织样本中抗hnRNP B1 抗体抗体100%染色阳性，染色阳性，X 线检查为线检查为 隐匿性肺癌（鳞癌）隐匿性肺癌（鳞癌）中有中有58.1%染色呈阳性，染色呈阳性， 而支气管发育异常组织而支气管发育异常组织 有有63.6%阳性反应阳性反应 lhnRNP B1作为肺癌，尤其是鳞癌，的早期诊断的重要的标志物作为肺癌，尤其是鳞癌，的早期诊断的重要的标志物 早期诊断早期诊断分子生物学技术分子生物学技术 肺癌早期分子标志物检测肺癌早期分子标志物检测 p16 基因甲基化基因甲基

32、化 lP16 基因系细胞周期依赖性激酶基因系细胞周期依赖性激酶4（CDK4）抑制蛋白基因，）抑制蛋白基因，P16 蛋白蛋白 通过抑制通过抑制CDK4的催化活性，从而抑制细胞增殖的催化活性，从而抑制细胞增殖 lP16基因甲基化失活，则基因甲基化失活，则CDK4活性增高，细胞的增殖不能受到有效的活性增高，细胞的增殖不能受到有效的 抑制而发生癌变抑制而发生癌变 lBelinsky（1998）发现鳞癌病灶）发现鳞癌病灶75出现出现P16基因甲基化，而细胞过基因甲基化，而细胞过 度增生（度增生（17 ）、鳞状化生（）、鳞状化生（24）、原位癌（）、原位癌（50） lP16 甲基化在肿瘤组织及癌前病灶均有

33、发生，提示检测甲基化在肿瘤组织及癌前病灶均有发生，提示检测P 基因甲基化基因甲基化 能早期诊断肺癌能早期诊断肺癌 l是肺癌早期诊断中重要的生物标志物是肺癌早期诊断中重要的生物标志物 早期诊断早期诊断分子生物学技术分子生物学技术 肺癌早期分子标志物检测肺癌早期分子标志物检测 l将分子生物学的知识和技术用于肺癌的早期诊断，提高早期肺癌的检将分子生物学的知识和技术用于肺癌的早期诊断，提高早期肺癌的检 出率是当今研究的热点出率是当今研究的热点 l关键是确定对肺癌早期诊断较特异和敏感的标志物关键是确定对肺癌早期诊断较特异和敏感的标志物 l现已发现的肺癌标志物还有现已发现的肺癌标志物还有FHIT 基因缺失

34、、基因缺失、Survivin基因异常表达、基因异常表达、 ERCC2/XPD多态性、多态性、K-ras基因突变、基因突变、P53基因突变、基因突变、DNA微卫星标微卫星标 志等位基因丢失志等位基因丢失 l这些筛检肺癌的重要标志物的改变可能是肺癌的早期事件这些筛检肺癌的重要标志物的改变可能是肺癌的早期事件 l通过各种新的敏感的基因诊断技术，检测痰液，支气管肺泡灌洗液和通过各种新的敏感的基因诊断技术，检测痰液，支气管肺泡灌洗液和 外周血中基因表达的异常，外周血中基因表达的异常， 可为肺癌高危人群提供可能的早期诊断和可为肺癌高危人群提供可能的早期诊断和 筛选手段筛选手段 早期诊断早期诊断分子生物学技

35、术分子生物学技术 l基因芯片基因芯片(gene chip)是指将许多特定的寡核苷酸片段或基因片段作为是指将许多特定的寡核苷酸片段或基因片段作为 探针，通过激光共聚焦荧光检测，迅速将某个或几个基因与疾病联系探针，通过激光共聚焦荧光检测，迅速将某个或几个基因与疾病联系 起来起来 l基因芯片技术的主要优点是信息量大，目前一张基因芯片一次可对数基因芯片技术的主要优点是信息量大，目前一张基因芯片一次可对数 千上万个不同的已知或未知其意义的靶基因片段进行分析，获得几十千上万个不同的已知或未知其意义的靶基因片段进行分析，获得几十 几百个差异表达的基因几百个差异表达的基因 lGoodwin（2001） 以正常

36、组织作对照，用基因芯片对以正常组织作对照，用基因芯片对3例支气管例支气管-肺泡肺泡 癌基因表达进行了研究结果发现，共有癌基因表达进行了研究结果发现，共有18条基因呈异常表达，其中条基因呈异常表达，其中12 条高表达，大于或等于正常组织的两倍；另条高表达，大于或等于正常组织的两倍；另6条为低表达，为正常组织条为低表达，为正常组织 的的1/5或更少或更少 早期诊断早期诊断分子生物学技术分子生物学技术 基因芯片技术基因芯片技术 l从蛋白质组学（从蛋白质组学（proteomics）的角度，肿瘤性疾病被认为是一种蛋白质）的角度，肿瘤性疾病被认为是一种蛋白质 缺陷病缺陷病 l蛋白质组学技术蛋白质组学技术可以高通量的筛选肿瘤不同发展阶段基因表