生物实验一检测生物组织中糖类脂肪和蛋白质

1、一一.实验原理：实验原理： . .还原性糖的鉴定：还原性糖的鉴定： 还原性糖还原性糖 + + 斐林试剂斐林试剂 砖红色沉淀砖红色沉淀 . .脂肪的鉴定：脂肪的鉴定： 脂肪脂肪 + + 苏丹苏丹 橘黄色橘黄色 脂肪脂肪 + + 苏丹苏丹 红色红色 . .蛋白质的鉴定：蛋白质的鉴定： 蛋白质蛋白质 + + 双缩脲试剂双缩脲试剂 紫色紫色 二二. .目的要求：目的要求： 尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、 脂肪和蛋白质脂肪和蛋白质 1 1、还原糖的检测和观察：、还原糖的检测和观察： 选材选材 （1 1）含含糖糖量高；量高； （2 2）颜色为）颜色为白色或接近白色白色

2、或接近白色的植物组织的植物组织 以苹果以苹果. .梨为最好。梨为最好。 问题问题：西瓜可以吗？：西瓜可以吗？ 制备组织样液：制备组织样液：研磨成浆：取苹果洗净、去皮、研磨成浆：取苹果洗净、去皮、 切块，取切块，取5g 5g 放入研钵，加石英砂、放入研钵，加石英砂、5 ml5 ml水研磨、过水研磨、过 滤滤 三三. .实验过程实验过程: : 可溶性还原糖与斐林试剂在加热的过可溶性还原糖与斐林试剂在加热的过 程中生成砖红色沉淀，程中生成砖红色沉淀，说明植物组织说明植物组织 样液中含有还原糖。样液中含有还原糖。 注入注入2mL2mL 苹果组苹果组 织样液织样液 注入注入1mL1mL刚配制好的刚配制好

3、的 斐林试剂斐林试剂 水浴加热约水浴加热约2min2min 呈色反应呈色反应 变成变成砖红色砖红色 50-650C的温水的温水 结论：结论： 甲乙液等量混匀甲乙液等量混匀 振荡、混振荡、混 合摇匀合摇匀呈呈 现蓝色现蓝色 还原糖有还原糖有 。 试剂：试剂： . （甲液：（甲液：0.1g/ml 的的 , 乙液：乙液：0.05g/ml的的 .） 甲乙液必须甲乙液必须 后再加入样后再加入样 液中，液中， 。 必须必须 。 葡萄糖，果糖，麦芽糖葡萄糖，果糖，麦芽糖 用水浴加热用水浴加热 斐林试剂斐林试剂 NaOHCuSO4 等量混合均匀等量混合均匀 现配现用现配现用 注意事项：注意事项： 颜色变化：颜

4、色变化： 浅蓝色浅蓝色棕色棕色砖红色砖红色 2 2、脂肪的检测和观察：、脂肪的检测和观察： 圆形小颗粒呈橘黄色，说明有脂肪存在。圆形小颗粒呈橘黄色，说明有脂肪存在。 取材：取材： 花生种子花生种子( (浸泡浸泡3 34h4h），将子叶削成薄片），将子叶削成薄片 制片制片 取最理想的薄片取最理想的薄片 在薄片上滴在薄片上滴2-32-3滴苏丹滴苏丹染液（染液（3min3min） 去浮色（用去浮色（用5050酒精）酒精） 制成临时装片制成临时装片 观察观察低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒，低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒， 然后用高倍镜观察然后用高倍镜观察 结论：结论： 注意事项：注意事项： 切片要

5、薄，切片要薄，如厚薄不均就会导致观察如厚薄不均就会导致观察 时有的地方清晰有的地方模糊。时有的地方清晰有的地方模糊。 酒精的作用是：酒精的作用是： 。 需需使用显微镜观察使用显微镜观察 使用不同的染色剂染色时间不同使用不同的染色剂染色时间不同 颜色变化：颜色变化： 。 洗去浮色洗去浮色 橘黄色或红色橘黄色或红色 3 3、蛋白质的检测和观察：、蛋白质的检测和观察： 选材选材 应该选择含应该选择含 丰富的丰富的豆浆豆浆或或鸡蛋鸡蛋 清清溶液。（避免材料自身的颜色对溶液。（避免材料自身的颜色对 实验变化颜色的掩盖）实验变化颜色的掩盖） 蛋白质蛋白质 黄豆浆滤液或蛋清稀释液黄豆浆滤液或蛋清稀释液 制备

6、组织样液制备组织样液 呈色反应呈色反应 组织组织 样液样液 2mL2mL 双缩脲试双缩脲试 剂剂A A液液1mL1mL 双缩脲试双缩脲试 剂剂B B液液4 4滴滴 摇匀后变摇匀后变 成紫色成紫色 结论：结论：说明组织样液中存在蛋白质。 说明组织样液中存在蛋白质。 （3 3）注意事项：）注意事项： 试剂：试剂： （ A液：液：0.1g/ml的的 ； B液：液： 0.01g/ml的的 ） 先加先加 ，再加，再加 。 B液要求量适中，否则液要求量适中，否则多余多余 的的B液液将会将会与与A液液发生反应生发生反应生 成成Cu（OH）2显色而遮盖原有的颜色。显色而遮盖原有的颜色。 鉴定前，留出一部分组织

7、样液，以便对比鉴定前，留出一部分组织样液，以便对比 双缩脲试剂双缩脲试剂 A A液液1ml1ml B B液液4 4滴滴 NaOH CuSO4 蛋 白 质 的 检 测 结 果 用于蛋白质鉴定的蛋清必须稀释，以免用于蛋白质鉴定的蛋清必须稀释，以免 实验后粘住试管壁，不易洗刷实验后粘住试管壁，不易洗刷 斐林试剂与双缩脲试剂的比较：斐林试剂与双缩脲试剂的比较： A A液液:0.1g/mLNaOH:0.1g/mLNaOH B B液液: :0.010.01g/mLCuSOg/mLCuSO4 4 甲液甲液:0.1g/mLNaOH:0.1g/mLNaOH 乙液乙液: :0.050.05g/mLCuSOg/mL

8、CuSO4 4 紫色物质生成紫色物质生成砖红色沉淀砖红色沉淀 先加先加A A液液，再加再加B B液液，不不 需加热需加热 甲液与乙液甲液与乙液先混再用先混再用， 且且现配现用现配现用，需，需加热加热 蛋白质蛋白质还原性糖还原性糖 试剂试剂 组成组成 检验检验 结果结果 试剂试剂 用法用法 检测检测 对象对象 双缩脲试剂双缩脲试剂斐林试剂斐林试剂 4 4、淀粉的检测和观察：、淀粉的检测和观察： 取材：取材： 马铃薯匀浆马铃薯匀浆 检测检测 组织组织 样液样液 2mL2mL 碘液碘液 2 2滴滴 结论：结论：说明组织样液中存在淀粉。说明组织样液中存在淀粉。 注意：注意： 常用材料：马铃薯常用材料：

9、马铃薯 试剂：试剂： 。颜色变化：。颜色变化： 。碘液碘液 变蓝变蓝 摇匀后变摇匀后变 成蓝色成蓝色 1.在下列四支试管中分别加入一些物质，在下列四支试管中分别加入一些物质， 甲试管甲试管:豆浆豆浆;乙试管乙试管:氨基酸溶液氨基酸溶液;丙试丙试 管管:牛奶和蛋白酶牛奶和蛋白酶;丁试管丁试管:人血液中的红人血液中的红 细胞和蒸馏水细胞和蒸馏水.上述四支试管中加入双上述四支试管中加入双 缩脲试剂振荡后缩脲试剂振荡后,有紫色反应的是有紫色反应的是 ( ) A.甲、丁甲、丁 B.甲、乙、丁甲、乙、丁 C.甲、乙、丙甲、乙、丙 D.甲、丙甲、丙 对应训练对应训练 D 2. 2.下列关于实验操作步骤的叙述

10、中，正确的下列关于实验操作步骤的叙述中，正确的 是是 用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲 液和乙液，可直接用于蛋白质的鉴定液和乙液，可直接用于蛋白质的鉴定 . .脂肪的鉴定需要用显微镜才能看到被染脂肪的鉴定需要用显微镜才能看到被染 成橘黄色的脂肪滴成橘黄色的脂肪滴 C. C.鉴定可溶性还原糖时，要加入斐林试剂甲鉴定可溶性还原糖时，要加入斐林试剂甲 液摇匀后，再加入乙液液摇匀后，再加入乙液 用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A A液与液与B B 液要混合均匀后，再加入含样品的试管中，液要混合均匀后，再加入含样品的试管中， 且必须现配现用且必须现配现

11、用 （ ） 3 3. .甘薯和马铃薯都富含淀粉，但甘薯吃起来比马甘薯和马铃薯都富含淀粉，但甘薯吃起来比马 铃薯甜，为探究其原因，某兴趣小组以甘薯和铃薯甜，为探究其原因，某兴趣小组以甘薯和 马铃薯块茎为材料，在不同温度、其他条件相马铃薯块茎为材料，在不同温度、其他条件相 同的情况下处理同的情况下处理30min30min后，测定还原糖含量，结后，测定还原糖含量，结 果表明马铃薯不含还原糖，甘薯的还原糖含量果表明马铃薯不含还原糖，甘薯的还原糖含量 见下表：见下表： 处理温度（处理温度（） 0 01010202030304040 甘薯还原糖含量甘薯还原糖含量 （mg/gmg/g） 22.122.123

12、.323.325.825.837.637.640.540.5 处理温度（处理温度（） 50506060707080809090 甘薯还原糖含量甘薯还原糖含量 （mg/gmg/g） 47.447.454.754.768.968.945.345.328.628.6 （1 1）由表可见，温度为）由表可见，温度为7070时甘薯还原糖含量时甘薯还原糖含量 最高，这是因为最高，这是因为_ _ _。 （2 2）马铃薯不含还原糖的原因是）马铃薯不含还原糖的原因是_。 （3 3）为了确认马铃薯不含还原糖的原因，请完）为了确认马铃薯不含还原糖的原因，请完 成以下实验：成以下实验： 实验原理：实验原理：_； _。

13、备选材料与用具：甘薯提取液（去淀粉和还原备选材料与用具：甘薯提取液（去淀粉和还原 糖，马铃薯提取液（去淀粉），二苯胺试剂，糖，马铃薯提取液（去淀粉），二苯胺试剂， 斐林试剂，双缩脲试剂，质量分数为斐林试剂，双缩脲试剂，质量分数为3%3%的淀粉的淀粉 溶液和质量分数为溶液和质量分数为3%3%的蔗糖溶液等。的蔗糖溶液等。 还原糖的产生是酶作用的结还原糖的产生是酶作用的结 果，果， 70时酶活性最高时酶活性最高 不含淀粉酶不含淀粉酶 淀粉酶水解淀粉产生还原糖淀粉酶水解淀粉产生还原糖 还原糖与斐林试剂反应，产生砖红色沉淀还原糖与斐林试剂反应，产生砖红色沉淀 实验步骤：实验步骤： 第一步：取第一步：取A

14、 A、B B两支试管，在两支试管，在A A管中加入甘薯管中加入甘薯 提取液，提取液，B B管中加入等量的马铃薯提取液。管中加入等量的马铃薯提取液。 第二步：第二步：7070水浴保温水浴保温5min5min后，在后，在A A、B B两支试两支试 管中各加入管中各加入_,_, 第三步：第三步：7070水浴保温水浴保温5min5min后，在后，在A A、B B两支试管两支试管 中再各加入中再各加入_， 第四步：第四步：_._. 实验结果：实验结果：_ 等量淀粉溶液。等量淀粉溶液。 等量斐林试剂。等量斐林试剂。 沸水浴加热沸水浴加热1min2min。 A试管呈现砖红色，试管呈现砖红色，B试管呈现蓝色试

15、管呈现蓝色 1.在下列四支试管中分别加入一些物质，在下列四支试管中分别加入一些物质， 甲试管甲试管:豆浆豆浆;乙试管乙试管:氨基酸溶液氨基酸溶液;丙试丙试 管管:牛奶和蛋白酶牛奶和蛋白酶;丁试管丁试管:人血液中的红人血液中的红 细胞和蒸馏水细胞和蒸馏水.上述四支试管中加入双上述四支试管中加入双 缩脲试剂振荡后缩脲试剂振荡后,有紫色反应的是有紫色反应的是 ( ) A.甲、丁甲、丁 B.甲、乙、丁甲、乙、丁 C.甲、乙、丙甲、乙、丙 D.甲、丙甲、丙 对应训练对应训练 D 2. 2.下列关于实验操作步骤的叙述中，正确的下列关于实验操作步骤的叙述中，正确的 是是 用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲用于

16、鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲 液和乙液，可直接用于蛋白质的鉴定液和乙液，可直接用于蛋白质的鉴定 . .脂肪的鉴定需要用显微镜才能看到被染脂肪的鉴定需要用显微镜才能看到被染 成橘黄色的脂肪滴成橘黄色的脂肪滴 C. C.鉴定可溶性还原糖时，要加入斐林试剂甲鉴定可溶性还原糖时，要加入斐林试剂甲 液摇匀后，再加入乙液液摇匀后，再加入乙液 用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A A液与液与B B 液要混合均匀后，再加入含样品的试管中，液要混合均匀后，再加入含样品的试管中， 且必须现配现用且必须现配现用 （ ） （1 1）由表可见，温度为）由表可见，温度为7070时甘薯还原糖含量时甘薯还原糖含量 最高，这是因为最高，这是因为_ _ _。 （2 2）马铃薯不含还原糖的原因是）马铃薯不含还原糖的原因是_。 （3 3）为了确认马铃薯不含还原糖的原因，请完）为了确认马铃薯不含还原糖的原因，请完 成以下实验：成以下实验： 实验原理：实验原理：_； _。 备选材料与用具：甘薯提取液（去淀粉和