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文档简介

1、尿液化学检验尿液化学检验 Chemical examination of urine 2.pH2.pH试纸法试纸法: : 1.1.试带法试带法: : 模块有模块有甲基红甲基红(pH4.6-6.2),(pH4.6-6.2),溴麝香草酚蓝溴麝香草酚蓝 (pH6.0 - 7.6).(pH6.0 - 7.6). 变色范围:黄变色范围:黄5.0-5.0-绿绿7.0-7.0-蓝蓝9.09.0,仪器或,仪器或 肉眼判读肉眼判读 多种混合指示剂多种混合指示剂( (棕红色棕红色- -深黑色深黑色),), 与标准色板比较。与标准色板比较。 (一)测定原理(一)测定原理 一、一、尿酸碱度测定尿酸碱度测定(urine

2、 acidity) 3.3.指示剂法指示剂法: : 5.pH5.pH计法计法: : 4.4.滴定法滴定法: : 0.4g/L0.4g/L溴麝香草酚蓝溴麝香草酚蓝滴于尿液滴于尿液黄黄- -酸酸 性性, ,绿绿- -中性中性, ,蓝蓝- -碱性碱性. . 受黄疸尿及血尿的影响受黄疸尿及血尿的影响. . pHpH电极电极. .精确度较高精确度较高, ,需仪器需仪器, ,烦琐烦琐, ,少用少用. . 标准标准NaOHNaOH滴定滴定, ,测总酸度测总酸度. .复杂复杂, ,少用少用 (一)测定原理(一)测定原理 一、一、尿酸碱度测定尿酸碱度测定(urine acidity) (二)(二) 尿酸度测定的

3、方法学评价尿酸度测定的方法学评价 方方 法法评评 价价 试带法试带法配套应用于尿液分析仪,是目前满足临床对尿配套应用于尿液分析仪,是目前满足临床对尿pHpH检查检查 需要最广泛应用的一种筛检方法需要最广泛应用的一种筛检方法 pHpH试纸法试纸法 操作简便,采用操作简便,采用pHpH精密试纸可提高检测的灵敏度,但精密试纸可提高检测的灵敏度,但 试纸易吸潮而失效试纸易吸潮而失效 指示剂法指示剂法 溴麝香草酚蓝变色范围为溴麝香草酚蓝变色范围为pH 6.0pH 6.07.67.6,当尿,当尿pHpH偏离此偏离此 范围时,检测结果不准确;黄疸尿、血尿将直接影响范围时,检测结果不准确;黄疸尿、血尿将直接影

4、响 结果判读结果判读 滴定法滴定法可测定尿酸度总量。临床上用于尿酸度动态监测,但可测定尿酸度总量。临床上用于尿酸度动态监测,但 操作复杂操作复杂 pHpH计计 结果精确可靠结果精确可靠, ,需特殊仪器,操作繁琐。可用于肾小管需特殊仪器,操作繁琐。可用于肾小管 性酸中毒定位诊断、分型、鉴别诊断时尿性酸中毒定位诊断、分型、鉴别诊断时尿pHpH精确测定精确测定 标本新鲜标本新鲜; ; 操作规范操作规范; ; 试带保存试带保存; ; 试剂配制标准试剂配制标准; ; pHpH计校准计校准. . (三)质量保证(三)质量保证 一、一、 尿酸碱度测定尿酸碱度测定(urine acidity) 正常饮食正常饮

5、食 晨尿晨尿pHpH:5.55.56.56.5,平均,平均6.0;6.0; 随机尿随机尿pHpH: 4.64.68.08.0; 可滴定酸度:可滴定酸度: 202040mmol/24h40mmol/24h尿尿 (四)参考值(四)参考值 一、一、 尿酸碱度测定尿酸碱度测定(urine acidity) (1)(1)生理变化生理变化: : 食物影响:食物影响:蛋白类蛋白类酸性酸性; ; 果蔬类果蔬类碱性碱性. . 碱潮碱潮: :餐后胃酸餐后胃酸,肾泌肾泌H H+ +,Cl,Cl- -重吸收重吸收 尿尿pHpH一过性一过性. 生理活动:生理活动:运动运动, ,饥饿饥饿, ,出汗出汗, ,应急应急, ,

6、夜间入睡呼吸夜间入睡呼吸 变慢变慢体内酸性代谢产物体内酸性代谢产物pH.pH. (五)临床意义(五)临床意义 一、一、 尿酸碱度测定尿酸碱度测定(urine acidity) (2)(2)病理变化病理变化: : 酸性尿:酸中毒酸性尿:酸中毒, ,高热高热, ,慢性肾炎慢性肾炎, ,白血病白血病, , 糖尿病酮症酸中毒糖尿病酮症酸中毒, ,低钾血症低钾血症, ,痛风痛风 碱性尿:碱中毒碱性尿:碱中毒, ,呕吐呕吐, ,尿路感染尿路感染,型肾型肾 小管性酸中毒小管性酸中毒, ,原发性醛固酮增多症原发性醛固酮增多症 一、一、 尿酸碱度测定尿酸碱度测定(urine acidity) (五)临床意义(五

7、)临床意义 (3 3)药物影响:)药物影响: NaHCONaHCO3 3,K,K2 2COCO3 3, ,枸橼酸钠枸橼酸钠碱化尿液碱化尿液防止酸性结防止酸性结 晶晶( (尿酸及胱氨酸尿酸及胱氨酸) )形成形成; ;促进酸性药物排泄促进酸性药物排泄. . 氯化钙氯化钙( (铵、钾铵、钾) )、稀盐酸、稀盐酸酸化尿液酸化尿液防止碱性防止碱性 结晶结晶( (磷磷/ /碳碳/ /草酸钙草酸钙) )形成形成; ;促进碱性药物排泄促进碱性药物排泄; ;预防预防 细菌生长细菌生长. . 溶血时口服溶血时口服NaHCONaHCO3 3碱化尿液碱化尿液促进溶解及排泄促进溶解及排泄Hb.Hb. 一、一、 尿酸碱度

8、测定尿酸碱度测定(urine acidity) (五)临床意义(五)临床意义 表表5-6 5-6 常见影响尿液常见影响尿液pHpH的因素的因素 影响因素影响因素尿酸性尿酸性尿碱性尿碱性 食物食物肉类、高蛋白及混合食肉类、高蛋白及混合食 物(含硫、磷)物(含硫、磷) 蔬菜、水果(含钾、钠)蔬菜、水果(含钾、钠) 生理活动生理活动剧烈运动、应激、饥饿、剧烈运动、应激、饥饿、 出汗出汗 用餐后碱潮用餐后碱潮 药物药物氯化铵、氯化钾、氯化氯化铵、氯化钾、氯化 钙、稀盐酸等钙、稀盐酸等 小苏打、碳酸钾、碳酸镁、小苏打、碳酸钾、碳酸镁、 枸橼酸钠、酵母、利尿剂等枸橼酸钠、酵母、利尿剂等 肾功能肾功能肾小球

9、滤过增加而肾小肾小球滤过增加而肾小 管保碱能力正常管保碱能力正常 肾小球滤过功能正常而肾小肾小球滤过功能正常而肾小 管保碱能力丧失管保碱能力丧失 表表5-6 5-6 常见影响尿液常见影响尿液pHpH的因素的因素 影响影响 因素因素 尿酸性尿酸性尿碱性尿碱性 疾病疾病酸中毒、发热、慢性酸中毒、发热、慢性 肾小球肾炎。肾小球肾炎。代谢性代谢性 疾病:如糖尿病、痛风、疾病:如糖尿病、痛风、 低血钾性碱中毒(肾小低血钾性碱中毒(肾小 管分泌管分泌H H 增强,尿酸度 增强,尿酸度 增高)。增高)。其他:如白其他:如白 血病、呼吸性酸中毒血病、呼吸性酸中毒 (因(因COCO2 2潴留)。潴留)。尿酸尿酸

10、 盐或胱氨酸尿结石盐或胱氨酸尿结石 碱中毒:如呼吸性碱中毒,丢碱中毒:如呼吸性碱中毒,丢 失失COCO2 2过多。过多。严重呕吐(胃酸丢严重呕吐(胃酸丢 失过多)。失过多)。尿路感染:如膀胱尿路感染:如膀胱 炎、肾盂肾炎、变形杆菌性尿路炎、肾盂肾炎、变形杆菌性尿路 感染(细菌分解尿素产生氨)。感染(细菌分解尿素产生氨)。 肾小管性酸中毒:肾小球虽滤肾小管性酸中毒:肾小球虽滤 过正常,但远曲小管形成氨和过正常,但远曲小管形成氨和H H 的交换功能受损,肾小管泌的交换功能受损,肾小管泌H H 、 、 排排H H 及 及H H -Na -Na 交换能力减低,机 交换能力减低,机 体明显酸中毒,尿体明

11、显酸中毒,尿pHpH呈相对偏碱呈相对偏碱 性。性。草酸盐或磷酸盐或碳酸盐草酸盐或磷酸盐或碳酸盐 尿结石尿结石 其他其他尿液含酸性磷酸盐尿液含酸性磷酸盐尿内混入多量脓、血、细菌尿内混入多量脓、血、细菌 二、二、尿液蛋白质检查尿液蛋白质检查 健康人尿液中蛋白含量很少,定性为阴性。健康人尿液中蛋白含量很少,定性为阴性。 尿液中蛋白质含量尿液中蛋白质含量150mg/24h150mg/24h 或尿中蛋白质浓度或尿中蛋白质浓度100mg/L100mg/L 蛋白定性为阳性,即蛋白定性为阳性,即 proteinuria. . 1.1.蛋白尿蛋白尿 (proteinuria, PRO) ( (一一) )概述概述

12、 二、二、尿液蛋白质检查尿液蛋白质检查 2.2.蛋白尿形成的原因蛋白尿形成的原因 (1)(1)肾小球滤过膜破坏或电荷屏障改变肾小球滤过膜破坏或电荷屏障改变 (2)(2)肾小管重吸收障碍肾小管重吸收障碍 (3)(3)溢出性溢出性 (4)(4)肾组织性肾组织性 ( (一一) )概述概述 【原理】【原理】 指示剂的蛋白质误差原理指示剂的蛋白质误差原理 溴酚蓝溴酚蓝阴离子阴离子 (1)(1)干化学试带法干化学试带法 【评价评价】 肉眼和仪器肉眼和仪器;对清蛋白灵敏对清蛋白灵敏(70-100mg/L)(70-100mg/L), 与与Hb/Mb/BJPHb/Mb/BJP基本不反应;基本不反应; 简便快速,

13、易标准化,简便快速,易标准化,应用普遍应用普遍。 健康普查、肾病筛查健康普查、肾病筛查。 pH3.2 pro+ +复合物复合物 ( (淡黄淡黄绿色绿色兰色兰色) ) ( (二二) ) 尿蛋白定性检查尿蛋白定性检查 1.1.测定原理与评价测定原理与评价 表表5-7 5-7 试带法检测的干扰因素及评价试带法检测的干扰因素及评价 干扰因素干扰因素评评 价价 标本因素标本因素 尿尿pHpH9 9,可假阳性;尿,可假阳性;尿pHpH3 3,可假阴性。最适尿,可假阴性。最适尿pH pH 5 56 6,故必要时可先调标本,故必要时可先调标本pHpH值。尿液新鲜。值。尿液新鲜。 食物因素食物因素 尿酸碱度与摄

14、入食物有系,检查前尿酸碱度与摄入食物有系,检查前1 1天应避免单一摄入天应避免单一摄入 过多肉类或蔬菜、水果,进食应均衡过多肉类或蔬菜、水果,进食应均衡 药物因素药物因素 假阳性:服奎宁、奎宁丁、嘧啶等或尿中含聚乙烯、假阳性:服奎宁、奎宁丁、嘧啶等或尿中含聚乙烯、 吡咯酮、洗必泰、磷酸盐、季胺盐消毒剂吡咯酮、洗必泰、磷酸盐、季胺盐消毒剂 等,尿呈强碱(等,尿呈强碱(pH9.0pH9.0)。)。 假阴性:大剂量滴注青霉素或用庆大霉素、磺胺、假阴性:大剂量滴注青霉素或用庆大霉素、磺胺、 含碘造影剂含碘造影剂 操作过程操作过程 假阳性:试带浸渍时间过长,反应颜色变深。假阳性:试带浸渍时间过长,反应颜

15、色变深。 假阴性:试带浸渍时间过短反应不完全或浸渍时间过假阴性:试带浸渍时间过短反应不完全或浸渍时间过 长膜块中试剂流失长膜块中试剂流失 ( (二二) ) 尿蛋白定性检查尿蛋白定性检查 【评价评价】 (2)(2)磺基水杨酸法磺基水杨酸法 【原理】【原理】 propro+ + + + 磺基水杨酸根磺基水杨酸根- - 不溶性蛋白沉淀不溶性蛋白沉淀 简便快速,简便快速,灵敏度高灵敏度高0.05-0.1g/L0.05-0.1g/L; 与清与清/ /球球/ /本周蛋白反应本周蛋白反应;假阳性。假阳性。 干化学法的参考方法,干化学法的参考方法,NCCLSNCCLS推荐的推荐的 确证实验。确证实验。 H+

16、( (二二) ) 尿蛋白定性检查尿蛋白定性检查 1.1.测定原理与评价测定原理与评价 1 尿尿2-3ml+试剂试剂0.1ml, 立即混匀,立即混匀,1min内观察内观察 结果结果. (2)(2)磺基水杨酸法磺基水杨酸法 【干扰因素】【干扰因素】 ( (二二) ) 尿蛋白定性检查尿蛋白定性检查 1.1.测定原理与评价测定原理与评价 干干 扰扰 因因 素素 假阳性假阳性高浓度尿酸、尿酸盐、草酸盐高浓度尿酸、尿酸盐、草酸盐 碘造影剂、大剂量青霉素碘造影剂、大剂量青霉素 混入生殖系统分泌物混入生殖系统分泌物 假阴性假阴性pH pH 9 9或或 9 9或或 3.5g/24h;4+;3.5g/24h;肾病

17、综合症肾病综合症. . MWMW9 9万万,Ig(G,A,M),C,Ig(G,A,M),C3 3; ;Alb,T-H. Alb,T-H. 1+1+4+;0.54+;0.53.0g/24h.3.0g/24h. 持续持续肾衰;原肾衰;原/ /继发肾小球疾病继发肾小球疾病. . ( (三三) ) 尿蛋白定量检查尿蛋白定量检查 肾小球性肾小球性:肾小球肾炎:肾小球肾炎+ +,很少,很少+; 肾小管性肾小管性:+ +,很少,很少+.+. 混合性性混合性性:肾病综合征:肾病综合征+.+. 组织性组织性: + +,很少,很少+.+. ( (三三) ) 尿蛋白定量检查尿蛋白定量检查 三、尿液葡萄糖检查三、尿液

18、葡萄糖检查 正常人尿内含糖量极少,正常人尿内含糖量极少,0.560.565.05.0 mmol/24hmmol/24h,定性试验阴性,定性试验阴性 糖尿糖尿(glucosuria, GLU) 血糖血糖8.88mmol/L8.88mmol/L,肾糖阈值,或近端肾小管,肾糖阈值,或近端肾小管 重吸收功能障碍时尿糖重吸收功能障碍时尿糖,定性试验阳性的尿液,定性试验阳性的尿液. . (1)(1)试带法试带法 【原理原理】 葡萄糖葡萄糖+ +H H2 2O O 葡萄糖氧化酶 葡萄糖氧化酶 葡萄糖酸内酯 葡萄糖酸内酯+ +H H2 2O O2 2 H H2 2O O2 2+ +色素原色素原 过氧化物酶 过

19、氧化物酶 有色物质有色物质+ + H H2 2O O (glucose oxidase-peroxidase method) 【评价评价】 特异性强特异性强, ,灵敏度高灵敏度高(1.67(1.672.78mmol/L 2.78mmol/L 弱阳性弱阳性),),简便简便快速快速, ,自动分析自动分析. . 1.1.测定方法与评价测定方法与评价 ( (一一) ) 尿糖尿糖定性定性检查检查 (1)(1)干化学试带法干化学试带法 【干扰因素干扰因素】 葡萄糖氧化酶试带法葡萄糖氧化酶试带法 1.1.测定方法与评价测定方法与评价 ( (一一) ) 尿糖尿糖定性定性检查检查 标本因素标本因素 假阳性:容器

20、残留强氧化剂假阳性:容器残留强氧化剂. . 假阴性:标本放置过久假阴性:标本放置过久, ,高高SGSG尿尿, ,尿酮体尿酮体0.4g/L.0.4g/L. 药物因素药物因素假阴性:假阴性:VitCVitC、左旋多巴、左旋多巴. . 【原理】【原理】 CuCu2+ 2+- -CuCu+ + 兰色兰色 黄色黄色至砖红色至砖红色. . 【评价评价】缺乏特异性缺乏特异性, ,灵敏度低灵敏度低 (8.33mmol/L(8.33mmol/L弱阳性弱阳性) ) - CHO ,OH 1.1.测定方法与评价测定方法与评价 班氏试剂班氏试剂1ml,1ml, 煮沸不变色煮沸不变色+ + 尿尿2 2滴滴煮沸煮沸 1-2

21、min 1-2min 冷冷 却后观察却后观察. . ( (一一) ) 尿糖定性检查尿糖定性检查 【干扰因素干扰因素】 1.1.测定方法与评价测定方法与评价 ( (一一) ) 尿糖定性检查尿糖定性检查 标本因素标本因素 假阳性:还原性糖假阳性:还原性糖 假阴性:假阴性:大量铵盐,预先加碱煮沸去氨后再检验;大量铵盐,预先加碱煮沸去氨后再检验; PRO PRO0.5g/L,0.5g/L,加热乙酸法去蛋白取滤液检验加热乙酸法去蛋白取滤液检验; ; 药物因素药物因素 假阳性:假阳性:VitC,VitC,青青/ /链霉素链霉素, ,头孢菌素头孢菌素, ,异烟肼异烟肼, ,水杨酸水杨酸 盐盐, ,氨苄西林氨

22、苄西林 (3)(3)薄层层析法薄层层析法( (thin-layer chromatography, TLC) ) 【评价评价】 鉴别、鉴别、确证尿糖种类确证尿糖种类的特异、灵的特异、灵 敏的方法;操作烦琐,很少应用。敏的方法;操作烦琐,很少应用。 ( (一一) ) 尿糖定性检查尿糖定性检查 1.1.测定方法与评价测定方法与评价 【原理】【原理】 吸附剂作固定相;有机溶剂作流动相;吸附剂作固定相;有机溶剂作流动相; 两相间作相对移动。两相间作相对移动。 各组分各组分流动相流动相固定相固定相反复吸附反复吸附- - 解析解析- -亲和作用亲和作用展开展开分离。分离。 比移值(比移值(RfRf)= =

23、斑点距离斑点距离/ /溶剂距离溶剂距离 假阳性多假阳性多 (1)(1)检验前:检验前: (2)(2)检测中:检测中: 容器清洁,不含氧化性物质;一次性尿杯容器清洁,不含氧化性物质;一次性尿杯. . 消除消除VitCVitC干扰:尿液煮沸几分钟干扰:尿液煮沸几分钟. . (3)(3)检测后:检测后:报告审核报告审核, ,结果不符查找原因结果不符查找原因; ; 与临床沟通与临床沟通. . 2.2.质量控制质量控制 ( (一一) ) 尿糖定性检查尿糖定性检查 室内质控室内质控. . 试带法注意反应时间和温度试带法注意反应时间和温度; ;阴凉干燥阴凉干燥, ,保质期保质期. . 班式法遵守操作规程班式

24、法遵守操作规程, ,注意判读时间注意判读时间. . 定性:阴性定性:阴性3.3.参考值参考值 (1)(1)检验前质量控制检验前质量控制 (2)(2)试带法:试带法:试带试带避光干燥避光干燥保存;保存; VitCVitC, ,高高SGSG尿尿, ,酮尿酮尿, ,左旋多巴左旋多巴假阴性假阴性; ; 尿液污染尿液污染过氧化物过氧化物或或次氯酸盐次氯酸盐假阳性假阳性. . (3)(3)班氏法:班氏法:VitC,VitC,青青/ /链霉素链霉素, ,头孢菌素头孢菌素水杨酸盐水杨酸盐, ,氨苄西氨苄西 林林假阳性假阳性; 大量铵盐大量铵盐,预先,预先加碱煮沸加碱煮沸去氨后去氨后再检验再检验; PROPRO

25、0.5g/L,0.5g/L,加热乙酸法去蛋白加热乙酸法去蛋白取滤液检验取滤液检验; ; 大量尿酸盐大量尿酸盐绿色浑浊绿色浑浊灰蓝色灰蓝色; ; 2.2.质量控制质量控制 ( (一一) ) 尿糖定性检查尿糖定性检查 【测定方法】【测定方法】 葡萄糖氧化酶法葡萄糖氧化酶法, ,己糖激酶法己糖激酶法 ( (二二) ) 尿糖尿糖定量定量检查检查 【评价评价】测血糖方法。药物和尿液中的自然物质测血糖方法。药物和尿液中的自然物质 对己糖激酶法几乎无干扰;对葡萄糖氧对己糖激酶法几乎无干扰;对葡萄糖氧 化酶法有不同程度的干扰。化酶法有不同程度的干扰。 2.2.参考值:参考值:0.560.565.0 mmol/

26、L5.0 mmol/L 1.1.测定方法与评价测定方法与评价 非葡萄糖尿非葡萄糖尿 葡萄糖尿葡萄糖尿 血糖增高性糖尿血糖增高性糖尿 血糖正常性糖尿血糖正常性糖尿- -肾性肾性 糖尿病糖尿病-代谢性代谢性 内分泌性糖尿内分泌性糖尿 饮食性糖尿饮食性糖尿 应激性糖尿应激性糖尿 饥饿饥饿-糖耐量糖尿糖耐量糖尿 糖尿糖尿 乳糖尿:乳糖尿: 半乳糖尿半乳糖尿 果糖尿果糖尿 肝功障碍肝功障碍 哺乳期哺乳期 ( (三三) )临床意义临床意义 暂时性暂时性 ( (胰岛素分泌不足胰岛素分泌不足) ) 饥饿饥饿- -糖耐量糖尿:见于晚期食道肿瘤、低营养状态和妊娠剧吐者糖耐量糖尿:见于晚期食道肿瘤、低营养状态和妊娠

27、剧吐者 做糖耐量试验。做糖耐量试验。 表表5-10 5-10 内分泌性糖尿常见原因及检查结果内分泌性糖尿常见原因及检查结果 疾疾 病病原原 因因检查结果检查结果 甲状腺功能甲状腺功能 亢进亢进 甲状腺素甲状腺素分泌过多,食欲亢分泌过多,食欲亢 进、肠壁血流加速,葡萄糖进、肠壁血流加速,葡萄糖 吸收率增加吸收率增加 餐后血糖增高,餐餐后血糖增高,餐 后尿糖阳性后尿糖阳性 空腹血糖、餐后空腹血糖、餐后2h2h 血糖正常血糖正常 垂体前叶功垂体前叶功 能亢进能亢进 生长激素生长激素分泌过多分泌过多, ,对抗胰岛对抗胰岛 素作用素作用 血糖增高血糖增高, ,尿糖阳性尿糖阳性 嗜铬细胞瘤嗜铬细胞瘤肾上腺

28、素、去甲肾上腺素肾上腺素、去甲肾上腺素大大 量分泌,肝糖原降解为葡萄量分泌,肝糖原降解为葡萄 糖加速糖加速 血糖增高血糖增高, ,尿糖阳性尿糖阳性 CushingCushing综综 合征合征 糖皮质激素糖皮质激素大量分泌大量分泌, ,糖原异糖原异 生作用旺盛生作用旺盛, ,葡萄糖磷酸激酶葡萄糖磷酸激酶 和对抗胰岛素作用受抑制和对抗胰岛素作用受抑制 血糖增高血糖增高, ,尿糖阳性尿糖阳性 表表5-11 5-11 血糖正常性糖尿常见原因及检查结果血糖正常性糖尿常见原因及检查结果 疾疾 病病原原 因因检查结果检查结果 家族性家族性 糖尿糖尿 先天性先天性近曲小管对糖重吸收功近曲小管对糖重吸收功 能缺

29、损(能缺损(5.51mmol/L2g/L,2g/L,亚硝酸盐亚硝酸盐0.05g/L0.05g/L灵敏度灵敏度 (1)(1)检测前:标本新鲜检测前:标本新鲜, ,避光保存;避光保存; 口服口服NaHCONaHCO3 3碱化尿液碱化尿液, ,午餐后午餐后2-4h2-4h尿标本。尿标本。 (2)(2)检测中检测中: :口服口服NaHCONaHCO3 3碱化尿液碱化尿液, ,先用乙酸调节先用乙酸调节 为弱酸性为弱酸性. . 试带法试带法: :规范规范, ,高低室内质控高低室内质控, ,定检定检. . 阴凉干燥阴凉干燥, ,密闭避光密闭避光, ,有效期有效期. . 4.4.质量控制质量控制 六、尿胆原和

30、尿胆素定性检查六、尿胆原和尿胆素定性检查 (3)(3)检测后:正确评价尿三胆检测后:正确评价尿三胆; ; 尿胆原阴性可疑尿胆原阴性可疑尿胆素定性验证尿胆素定性验证. . 尿胆原:阴性或弱阳性;尿胆原:阴性或弱阳性; 1:201:20稀释阴性稀释阴性. . 尿胆素:阴性尿胆素:阴性 (1)(1)鉴别黄疸种类鉴别黄疸种类. . 尿二胆尿二胆正常正常溶血性黄疸溶血性黄疸肝细胞性黄疸肝细胞性黄疸阻塞性黄疸阻塞性黄疸 尿胆红素尿胆红素+ + + + 尿胆原尿胆原少量少量 (+ +) (+ +)(+)(+)(-)(-) (2)(2)反映肝细胞损伤敏感指标反映肝细胞损伤敏感指标. . (3)(3)长期便秘易

31、使尿胆原阳性程度增加长期便秘易使尿胆原阳性程度增加. . 六、尿胆原和尿胆素定性检查六、尿胆原和尿胆素定性检查 5.5.参考值参考值 6.6.临床意义临床意义 表表5-15 5-15 不同类型黄疸的鉴别诊断不同类型黄疸的鉴别诊断 标本标本指指 标标正常人正常人溶血性黄溶血性黄 疸疸 肝细胞性肝细胞性 黄疸黄疸 梗阻性黄梗阻性黄 疸疸 血清血清 总胆红素总胆红素正常正常增高增高增高增高增高增高 未结合胆红素未结合胆红素正常正常增高增高增高增高正常正常/ /增高增高 结合胆红素结合胆红素正常正常增高增高/ /正常正常 增高增高增高增高 尿液尿液 颜色颜色浅黄浅黄深黄深黄深黄深黄深黄深黄 尿胆原尿胆

32、原1:201:20阴性阴性强阳性强阳性阳性阳性阴性阴性 尿胆素尿胆素阴性阴性阳性阳性阳性阳性阴性阴性 胆红素胆红素阴性阴性阴性阴性阳性阳性阳性阳性 粪便粪便 颜色颜色黄褐黄褐深色深色黄褐黄褐/ / 变浅变浅 变浅变浅/ / 白陶土色白陶土色 粪胆素粪胆素正常正常增高增高减低减低/ / 正常正常 减低减低/ / 消失消失 尿液中尿液中HbHb来源:来源: 血管内溶血血管内溶血 尿路出血尿路出血 七、尿血红蛋白定性检查七、尿血红蛋白定性检查 正常人血浆中游离正常人血浆中游离HbHb微量微量(50mg/L),(50mg/L),与结合与结合 珠蛋白形成珠蛋白形成HbHb-Hp-Hp复合物,在单核复合物

33、,在单核- -巨噬细胞巨噬细胞 系统代谢,故尿中系统代谢,故尿中HbHb极微。定性:阴性极微。定性:阴性 验证尿液潜在出血的试验验证尿液潜在出血的试验: : 隐血试验隐血试验(occult blood test) 1.1.概述概述 (1)(1)试带法试带法 (2)(2)湿化学法湿化学法 (3)(3)免疫法:单克隆抗体法免疫法:单克隆抗体法 利用胶体金标记的抗人利用胶体金标记的抗人HbHb单克隆抗体检测。单克隆抗体检测。 2.2.测定方法测定方法 原理相同原理相同 七、尿血红蛋白定性检查七、尿血红蛋白定性检查 H H2 2O O2 2 亚铁血红素亚铁血红素 O Hb Y1-Hb- Y2 Y1=胶

34、体金标记抗人胶体金标记抗人Hb单克隆抗体单克隆抗体 Y2=抗人抗人Hb单克隆抗体单克隆抗体 Y3=羊抗鼠羊抗鼠IgG抗体抗体 胶体金单克隆抗体法胶体金单克隆抗体法: : (1)(1)试带法:试带法: (2)(2)湿化学法:湿化学法: (3)(3)免疫法:免疫法: 试剂稳定性差试剂稳定性差, ,特异性较低特异性较低, ,假阳性多假阳性多.0.3-0.6mg/L.0.3-0.6mg/L 简便快速简便快速, ,灵敏度高灵敏度高(0.15-0.3mg/L),(0.15-0.3mg/L),影响多影响多, ,筛检筛检. . 简便简便, ,灵敏度高灵敏度高(0.2mg/L),(0.2mg/L),特异性强,特

35、异性强,验证验证 3.3.方法学评价方法学评价 七、尿血红蛋白定性检查七、尿血红蛋白定性检查 3.3.方法学评价方法学评价 七、尿血红蛋白定性检查七、尿血红蛋白定性检查 方法方法干扰因素干扰因素 试带法试带法 假阳性:热不稳定酶、氧化剂污染、尿路感染假阳性:热不稳定酶、氧化剂污染、尿路感染 假阴性假阴性:大量大量VitCVitC、甲醛、亚硝酸盐,还原剂、甲醛、亚硝酸盐,还原剂 化学法化学法 假阳性:热不稳定酶及过氧化物酶,铁剂、硝酸、铜锌、假阳性:热不稳定酶及过氧化物酶,铁剂、硝酸、铜锌、 碘化物碘化物 免疫法免疫法 不受鸡牛猪羊兔不受鸡牛猪羊兔Hb(500ug/ml)Hb(500ug/ml)

36、、辣根过氧化物酶、辣根过氧化物酶 (200ug/ml)(200ug/ml)干扰干扰. . 【干扰因素干扰因素】 阴性阴性 (1)(1)检测前:标本新鲜检测前:标本新鲜, ,煮沸煮沸2 2分分破坏破坏WBCWBC过氧化物酶过氧化物酶 和其他对热不稳定酶和其他对热不稳定酶. . (2)(2)检测中:高低室内质控,阳性对照;检测中:高低室内质控,阳性对照;3%H3%H2 2O O2 2或试或试 带验证所用试剂的有效期和可靠性。带验证所用试剂的有效期和可靠性。 4.4.质量控制质量控制 5.5.参考值参考值 七、尿血红蛋白定性检查七、尿血红蛋白定性检查 (3)(3)检测后:审核,沟通,验证。检测后:审

37、核,沟通,验证。 (2)(2)辅助诊断泌尿系统疾病辅助诊断泌尿系统疾病. . (1)(1)辅助诊断肾前性溶血性疾病辅助诊断肾前性溶血性疾病. . 各种血管内溶血性疾病各种血管内溶血性疾病:PNH, :PNH, 血型不合输血血型不合输血, , AIHA,AIHA,行军性行军性HbHb尿尿; ;各种病毒感染、疟疾各种病毒感染、疟疾; ;大面大面 积烧伤、体外循环、术后所致的积烧伤、体外循环、术后所致的RBCRBC大量破坏大量破坏. . 隐匿性肾炎隐匿性肾炎尿中少量尿中少量RBC破坏破坏隐血试验隐血试验( ();); 镜检时镜检时RBCRBC少少. . 6.6.临床意义临床意义 七、尿血红蛋白定性检

38、查七、尿血红蛋白定性检查 八、亚硝酸盐八、亚硝酸盐(NIT)(NIT) 硝酸盐硝酸盐亚硝酸盐亚硝酸盐 (nitrate)(nitrite) 硝酸盐还原酶硝酸盐还原酶 G杆菌杆菌 对氨基苯磺对氨基苯磺( (砷砷) )酸酸 重氮盐重氮盐 a-a-萘胺萘胺 偶氮化合物偶氮化合物 ( (红色红色) ) 1.1.检测原理:亚硝酸盐还原法检测原理:亚硝酸盐还原法 (1)(1)亚硝酸盐检出率的亚硝酸盐检出率的3 3个影响因素:个影响因素: 尿中尿中G G- -杆菌要有硝酸盐还原酶杆菌要有硝酸盐还原酶; ; 尿尿潴留时间潴留时间4h;4h; 尿中有尿中有硝酸盐硝酸盐. . 八、亚硝酸盐八、亚硝酸盐(NIT)(

39、NIT) 2.2.方法学评价方法学评价 (2)(2)灵敏度:灵敏度:0.3-0.6mg/L0.3-0.6mg/L (3)(3)干扰因素干扰因素 表表5-16 5-16 亚硝酸盐检测的干扰因素及评价亚硝酸盐检测的干扰因素及评价 因因 素素评评 价价 标标 本本高比重尿使试验灵敏度降低;高比重尿使试验灵敏度降低; 假阳性:陈旧尿、偶氮剂污染尿假阳性:陈旧尿、偶氮剂污染尿 食食 物物尿中硝酸盐主要来源于尿中硝酸盐主要来源于正常饮食、体内蛋白质代谢、或正常饮食、体内蛋白质代谢、或 由氨内源性合成由氨内源性合成。不能正常饮食的患者,体内缺乏硝酸。不能正常饮食的患者,体内缺乏硝酸 盐,即使有细菌感染,也可

40、出现阴性盐,即使有细菌感染,也可出现阴性 致病菌致病菌 常见致病菌:大肠杆菌属(致病率最高)、常见致病菌:大肠杆菌属(致病率最高)、KlebsKlebs杆菌属、杆菌属、 变形杆菌属、葡萄球菌属、假单胞菌属等。变形杆菌属、葡萄球菌属、假单胞菌属等。 阳性阳性:大肠埃希菌感染大肠埃希菌感染符合率约为符合率约为80%80%。 阴性:肠球菌属、粪链球菌属感染阴性:肠球菌属、粪链球菌属感染 药药 物物假阳性:非那吡啶假阳性:非那吡啶 假阴性假阴性:利尿剂、:利尿剂、硝基呋喃硝基呋喃、大量维生素大量维生素C C; 尿停留尿停留 膀胱内膀胱内 时间时间 晨尿晨尿标本较好,尿在膀胱内停留时间长,细菌有充分作标

41、本较好,尿在膀胱内停留时间长,细菌有充分作 用时间,否则,试验呈假阴性用时间,否则,试验呈假阴性 (1)(1)检测前:晨尿,尽快检测。检测前:晨尿,尽快检测。 八、亚硝酸盐八、亚硝酸盐(NIT)(NIT) 3.3.质量控制质量控制 (2)(2)检测中:高低室内质控检测中:高低室内质控, ,定时阳性标本验证定时阳性标本验证; ; 试带干燥避光,有效期。试带干燥避光,有效期。 (3)(3)检测后:审核检测后:审核, ,结合结合LEULEU、镜检分析。、镜检分析。 阴性阴性4.4.参考值参考值 快速筛检尿路感染快速筛检尿路感染 NITNIT阳性阳性: :泌尿系统有细菌感染泌尿系统有细菌感染.(.(排

42、除假阳性排除假阳性) ) NITNIT阴性阴性: :不能排除泌尿系统有细菌感染不能排除泌尿系统有细菌感染. . 八、亚硝酸盐八、亚硝酸盐(NIT)(NIT) 5.5.临床意义临床意义 NITNIT试带试带LEULEU镜检镜检准确诊断准确诊断. . 确证试验:尿细菌培养阳性确证试验:尿细菌培养阳性 九、白细胞九、白细胞(WBC,LEU)(leukocyte)(WBC,LEU)(leukocyte) 1.1.检测原理:酯酶检测原理:酯酶(esterase)(esterase)法法 吲哚酚酯吲哚酚酯 吲哚酚吲哚酚+有机酸有机酸 粒细胞酯酶粒细胞酯酶 + + 重氮盐重氮盐 重氮色素重氮色素 (紫红色紫

43、红色缩合物)缩合物) 九、白细胞九、白细胞(WBC,LEU)(WBC,LEU) 2.2.方法学评价方法学评价 (1)(1)灵敏度灵敏度10102525个个/ul/ul或或5 51515个个/HPF./HPF. 特异性强:特异性强:中性粒细胞中性粒细胞. . (2)(2)【干扰因素干扰因素】 假阳性假阳性污染阴道分泌物、甲醛;污染阴道分泌物、甲醛; 高浓度高浓度BILBIL、非那吡啶、呋喃坦啶、非那吡啶、呋喃坦啶. . 假阴性假阴性 WBC10WBC1025/l,PRO25/l,PRO5g/L,GLU30g/L;5g/L,GLU30g/L; 大量青霉素、先锋霉素大量青霉素、先锋霉素、庆大霉素;、庆大霉素; VitC? VitC? 尿尿pH4.4pH4.0pH4.0时内源性酚、巯基化合物、半胱时内源性酚、巯基化合物、半胱 氨酸、硫代硫酸钠氨酸、硫代硫酸钠. . 假阴性假阴性 碱性尿

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