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文档简介
1、重组人胰岛素产品生产工艺流程对从菌种库中取出的菌种进行活化及初步扩大培养在种子罐中对菌种进行进一步的扩大培养,至菌种到对数生长期时转入发酵罐培养分两阶段进行控制,第一阶段主要通过控制溶氧和补加甘油使菌体达到富集的目的,第二阶段通过补加甲醇使菌体进行高密度表达目的产物,HPLC检测目的产物含量目的产物存在于发酵液上清中,此步骤主要控制目的产物收率通过两步柱层析,分别去除发酵上清液中的色素和杂蛋白利用紫外检测仪控制目的产物收率,主要试剂为乙醇与异丙醇调节PH值,使P1沉淀,再经离心干燥,得中间体I固体控温进行转肽反应,主要试剂为DMSO与1,4-丁二醇再通过柱层析进行提纯,主要试剂为异丙醇调节PH
2、值,使P2沉淀,再经离心干燥,得中间体II固体通过控制湿度与温度进行脱帽反应,得到终产物胰岛素 主要试剂为 丙酮,产品为半固体经过两步柱层析对胰岛素进行提纯,试剂为Tris-HCI和异丙醇通过超滤对提纯后的胰岛素进行浓缩,通过管道传递到下工序通过制备色谱对胰岛素粗品进行精制,主要试剂为色谱乙腈 然后经两步结晶后通过管道过滤除菌到百级区对胰岛素成品进行一次结晶和水洗对水洗后的胰岛素进行过滤除菌后冻干,即得胰岛素成品重组人胰岛素生产工艺流程功能间分布工序功能间名称主要操作菌种菌种室菌种储藏培养基准备间培养基配制、消毒、无菌服消毒接种室在超净工作台中进行无菌接种,菌种并瓶扩培室菌种的摇瓶培养菌种洗衣菌种区无菌服清洗发酵发酵室种子培养、发酵培养控制室发酵过程控制发酵配料室发酵配料固液分离过滤室发酵液过滤分离洗衣洗滤布间滤布清洗中间体1P1纯化区中间体1柱纯化沉淀干燥室1中间体1沉淀、干燥中间体IIP2纯化转肽操作、中间体II柱纯化沉淀干燥室II中间体II沉淀、干燥脱帽室脱帽操作成品粗纯化粗纯配液室P1、P2、粗纯化配液粗纯化区成品粗纯化柱纯化、超滤清洗室P1、P2、粗纯化区玻璃仪器及工具清洗成品精纯化精纯配液室精纯化区配液冷室结晶产物低温静置精纯化区胰岛素成品
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