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1、生物化学问答题苏州大学生化期末复习1 受试大鼠注射 dnp(二硝基苯酚)可能引起什么 现象?其机理何在?解偶联剂大部分是脂溶性物质,最早被发现的是 2, 4-二硝基苯酚(dnp)。给受试动物注射 dnp 后,产 生的主要现象是体温升高、氧耗增加、p/o 比值下降、 atp 的合成减少。其机理在于, dnp 虽对呼吸链电子 传递无抑制作用,但可使线粒体内膜对 h+的通透性升 高,影响了 adp+pi atp 的进行,使产能过程与储能 过程脱离,线粒体对氧的需求增加,呼吸链的氧化作 用加强,但不能偶联 atp 的生成,能量以热能形式释 放。2 复制中为什么会出现领头链和随从链?dna 复制是半不连

2、续的,顺着解链方向生成的子链, 复制是连续进行的,这股链称为领头链。另一股链因 为复制的方向与解链方向相反,不能顺着解链方向连 续延长,这股不连续复制的链称为随从链。原因有.链延长特点只能从5 3.同一复制叉只有一个解链方向。 dna 单链走向是相反的。因 此在沿35 方向上解开的母链上,子链就沿 5 32方向延长,另一股母链5 3解开,子链不可能沿5 3。复制的方向与解链方向相反而出现随从链。3 简述乳糖操纵子的结构及其调节机制。乳糖操纵子含 z、y、及 a 三个结构基因,编码降解乳 糖的酶,此外还有一个操纵序列 o、一个启动序列 p 和一个调节基因 i,在 p 序列上游还有一个 cap 结

3、合 位点。由 p 序列、o 序列和 cap 结合位点共同构成 lac 操纵子的调控区,三个编码基因由同一个调控区调 节。乳糖操纵子的调节机制可分为三个方面:(1) 阻遏蛋白的负性调节没有乳糖时 , 阻遏蛋白与 o 序列结合,阻碍 rna 聚合酶与 p 序列结合,抑制 转录起动;有乳糖时 ,少量半乳糖作为诱导剂结合阻 遏蛋白,改变了它的构象,使它与 o 序列解离 ,rna 聚合酶与 p 序列结合,转录起动。(2) cap 的正性调节没有葡萄糖时,camp 浓度高,结合 camp 的 cap 与 lac 操纵子启动序列附近的 cap 结合位点结合,激活 rna 转录活性;有葡萄糖时, camp 浓

4、度低,camp 与 cap 结合受阻,cap 不能与 cap 结合位点结合,rna 转录活性降低。3(3)协调调节当阻遏蛋白封闭转录时,cap 对该系统不能发挥作用;如无 cap 存在,即使没有阻 遏蛋白与操纵序列结合,操纵子仍无转录活性。4 何谓限制性核酸内切酶?写出大多数限制性核酸 内切酶识别 dna 序列的结构特点。限制性核酸内切酶 :识别 dna 的特异性序列,并在识 别点或其周围切割双链 dna 的一类内切酶。 酶识别 dna 位点的核苷酸序列呈回文结构。5.讨论复制保真性的机制1. 遵守严格的碱基配对规律;2. 聚 合 酶 在 复 制 延 长 时 对 碱 基 的 选 择 功 能 ;

5、 dna-pol 依据碱基表现的亲和力,实现正确的碱基 选择。3. 复制出错时 dna-pol i 的及时校读功能。46胞浆中的 nadh 如何参加氧化磷酸化过程?试述其 具体机制。线粒体内生成的 nadph 可直接参加氧化磷酸化过程, 但在胞浆中生成的 nadph 不能自由透过线粒体内膜, 故线粒体外 nadph 所带的氢必须通过某种转运机制 才能进入线粒体,然后再经呼吸链进行氧化磷酸化 过程。这种转运机制主要有 -磷酸甘油穿梭和苹果 酸-天冬氨酸穿梭两种机制。(1 )- 磷酸甘油穿梭:这种穿梭途径主要存在 于脑和骨骼肌中,胞浆中的 nadh 在磷酸甘油脱氢酶 催化下,使磷酸二羟丙酮还原成

6、-磷酸甘油,后者 通过线粒体外膜,再经位于线粒体内膜近胞浆侧的 磷酸甘油脱氢酶催化下氧化生成磷酸二羟丙酮和 fadh ,磷酸二羟丙酮可穿出线粒体外膜至胞浆,参2与下一轮穿梭,而 fadh2 则进入琥珀酸氧化呼吸链, 生成 2 分子 atp(2 )苹果酸 - 天冬氨酸穿梭:这种穿梭途径主要 存在于肝和心肌中,胞浆中的 nadh 在苹果酸脱氢酶 催化下,使草酰乙酸还原为苹果酸,后者通过线粒 体外膜上的-酮戊二酸转运蛋白进入线粒体,又在 线粒体内苹果酸脱氢酶的作用下重新生成草酰乙酸5和 nadh 。nadh 进入 nadh 氧化呼吸链,生成 3 分子 atp。可见,在不同组织,通过不同穿梭机制,胞浆

7、中的 nadh 进入线粒体的过程不一样,参与氧化呼吸链的途 径不一样,生成的 atp 数目不一样。7试述复制和转录的异同点。相同点:复制和转录都以 dna 为模板,都需依赖 dna 的聚合酶,聚合过程都是在核苷酸之间生成磷酸二酯 键,合成的核酸链都从 5向 3方向延长,都需遵 从碱基配对规律。复制和转录最根本的不同是:1 通过复制使子代保留杂代全部遗传信息,而转录只 需按生存需要部分信息表达。因此可以从模板和产物 的不同来理解这一重大区别。2 聚合酶分别是 dna pol 和 rna pol,底物分别是 dntp 和 ntp ,还有碱基配对的差别,都可从二者产物结构 性质不同上理解。8人体生成

8、 atp 的方法有哪几种?请详述具体生成 过程。6atp 是生物体能量的储存和利用中心,其生成或来源 主要有两种,一种是底物水平磷酸化,另一种是氧化 磷酸化。具体过程如下:(1) 底物水平磷酸化:利用代谢分子中的能量使 adp 磷酸化生成 atp 的过程,称为底物水平磷酸化, 在物质分解利用过程中,有三个典型的底物水平 磷酸化反应,糖酵解过程中,磷酸甘油酸激酶催 化 1,3 二磷酸甘油酸生成 3 磷酸甘油酸以及丙酮 酸羧激酶催化磷酸烯醇式丙酮酸生成烯醇式丙酮 酸这两步反应均伴有 adp 磷酸化生成 atp,三羧 酸循环中琥珀酰 coa 合成酶催化琥珀酰 coa 生成 琥珀酸,同时催化 pi 和

9、 gdp 生成 gtp,而 gtp 又 可在酶促作用下能量转移生成 atp;(2) 氧化磷酸化:即在呼吸链电子传递过程中偶联 adp 磷酸化,生成 atp。如物质脱下的 2h 经 nadh 氧化呼吸链可偶联生成 3 个 atp;经琥珀酸氧化 呼吸链则偶联生成 2 个 atp。这是机体内 atp 生 成的主要方式。9. 何谓基因克隆?简述基因克隆的基本过程。在体外将各种来源的遗传物质同源的或异源的、 原核的或真核的、天然的或人工的 dna 与载体 dna7结合成一具有自我复制能力的 dna 分子复制子, 继而通过转化或转染宿主细胞、筛选出含有目的基因 的转化子细胞,再进行扩增、提取获得大量同一

10、dna 分子,即基因克隆。以质粒为载体进行 dna 克隆的过程(为例)。基本 过程:包括:目的基因的获取,基因载体的选择与构 建,目的基因与载体的拼接,重组 dna 分子导入受 体细胞,筛选并无性繁殖含重组分子的受体细胞。 10. 原核生物复制中的引发体是如何形成的?复制的起始需要解生成引发体和合成引物。原核生物 在复制起始点 dna 上结合 dna a dna b、 dna c 蛋白。 含有解螺旋酶、dnac 蛋白、引物酶和 dna 复制起始区 域的复合结构称为引发体。在引发体上 dnag 催化 ntp 聚合生成引物。11.简述谷氨酸在体内转变成尿素、 co 与水的主要代2谢过程谷氨酸在 l

11、-谷氨酸脱氢酶的作用下生成酮戊二酸、nadh+h+和 nh3;酮戊二酸经三羧酸循环产生草酰乙酸、co 、fadh 、nadh+h+ ;2 2草酰乙酸在磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶作用下生成磷 酸烯醇式丙酮酸和 co ;磷酸烯醇式丙酮酸在丙酮酸28激酶的作用下生成丙酮酸,在丙酮酸脱氢酶的作用下 生成乙酰辅酶 a;乙酰辅酶 a 经三羧酸循环生成 2co 、21fadh 、3 nadh+h+ 和 atp;经氧化呼吸链生成 atp 和 2h o2nh +co +atp 生成氨基甲酰磷酸,经鸟氨酸循环生成尿 3 2素12.已知人类细胞基因组的大小约 30 亿 bp,试计算一 个二倍体细胞中 dna 的总长度,

12、这么长的 dna 分子是 如何装配到直径只有几微米的细胞核内的? 约 2 米(10bp 的长度为 3.4nm,二倍体)。在真核细 胞内,dna 以非常致密的形式存在于细胞核内,在细 胞生活周期的大部分时间里以染色质的形式出现,在 细胞分裂期形成染色体。染色体是由 dna 和蛋白质构 成的,是 dna 的超级结构形式。染色体的基本单位是 核小体。核小体由 dna 和组蛋白共同构成。组蛋白分 子构成核小体的核心, dna 双螺旋分子缠绕在这一核 心上构成了核小体的核心颗粒。核小体的核心颗粒之 间再由 dna(约 60bp)和组蛋白 h1 构成的连接区连 接起来形成串珠样结构。在此基础上,核小体又可

13、进 一步旋转折叠,经过形成 30nm 纤维状结构、 300nm9襻状结构、最后形成棒状的染色体。13. 原核生物和真核生物翻译起始复合物的生成有何 异同?原核生物 mrna 先与小亚基结合,通过 mrna 起始密码 上游 s-d 序列与小亚基 16s-rrna3 端短序列互补。 s-d 序列后小核苷酸序列,被核蛋白体 rps-1 结合。 核蛋白体小亚基和 mrna、起始氨基酰-trna 、大亚基 依次结合,形成翻译起始复合物。真核生物起始与原核生物相似但更复杂,真核生物 mrna 没有 s-d 序列,帽子结合蛋白复合物结合 mrna5 帽子和 3polya 尾,消耗 atp 从 mrna5 端

14、起扫描, 最终使 mrna 在小亚基正确定位。核蛋白体小亚基和 起始氨基酰 -trna 、mrna 、大亚基依次结合,形成翻 译起始复合物。14.试讨论各类核苷酸抗代谢物的作用原理。5-氟尿嘧啶、 6-巯基嘌呤、氨基蝶呤和氨甲蝶呤、氮 杂丝氨酸等核苷酸抗代谢物均可作为临床抗肿瘤药 物,其各自的机理如下表所示:抗肿5-氟尿嘧6-巯基嘌呤 氨基蝶 氨杂丝10瘤药物啶呤和氨甲蝶氨酸呤核苷酸代谢中类似胸腺嘧啶次黄嘌呤叶酸谷氨酰胺物抑 制 胸 腺嘧 核 苷 酸 作用 合成酶;影 机理 响 rna 的正 常 结 构和功能抑制 imp 转变为 amp 和 干扰嘌 gmp 的 反 抑制二 呤、嘧 应;抑制 i

15、mp 氢叶酸 啶核苷 和 gmp 的补 还原酶 酸的合 救 合 成 和 从 成 头合成15. 为 什 么 说 真 核 生 物 基 因 是 断 裂 基 因 ? 请 讨 论 hnrna 的剪接过程。基因是指为生物大分子编码的核酸片段。在真核生物 中,编码序列只占少数,可称为外显子。非编码序列 可称为内含子,它是阻断基因线性表达的 dna 片段。 这种在同一基因外显子被内含子分隔的现象就是断111 22 6裂基因。此外,基因与基因之间还有间隔序列,也是 基因断裂性的表现。mrna 剪接实际上是切除内含子,把外显子互相连接 起来,剪接体由 snrnp 与 hnrna 结合组成。snrna 的 u u

16、结合一个内含子的两端,使内含子弯曲及两 个相邻外显子互相靠近。u u 形成催化中心,发生转 酯反应。由含鸟苷的辅酶亲电子攻击使第一外显子切 出,再由第一外显子 3-oh 亲电子攻击内含子与第二 外显子的磷酸二酯键,使内含子去除而两外显子相 接。16.何谓目的基因?写出其主要来源或途径。目的基因:应用重组 dna 技术有时是为分离、获得某 一感兴趣的基因或 dna 序列,或是为获得感兴趣基因 的表达产物蛋白质。这些感兴趣的基因或 dna 序 列就是目的基因,又称目的 dna。目的 dna 有两种类 型,即 cdna 和基因组 dna.来源:cdna 是指经反转录合成的、与 rna 互补的单链 d

17、na 。以单链 cdna 为模板、经聚合反应可合成双链 cdna. 基因组 dna 是指代表一个细胞或生物体整套遗 传信息的所有序列;进行 dna 克隆时,所构建12的嵌合分子由载体与某一来源的 或基因组 dna 连接而成。17.试述原核生物的转录终止。rna-pol 在 dna 模板上停顿下来不再前进,转录产 物 rna 链从转录复合物上脱落下来,就是转录终止。 依据是否需要蛋白质因子的参与,原核生物转录终止 分为依赖因子与非依赖因子两大类。依赖因子的转录终止中,因子与转录产物结合, 因子和 rna-pol 都发生构象改变,从而使 rna 聚 合酶停顿,解螺旋酶活性使 dna/rna 杂化双

18、链拆离, 利于产物从转录复合物中释放。非依赖因子的转录终止中, dna 模板上靠近终止 处有些特殊碱基序列,转录出 rna 后,产物形成特 殊的结构来终止转录。18物质在体内氧化和体外氧化有哪些异同点?请加 以说明。物质在生物体内氧化的过程被称为生物氧化,主要指 糖、脂肪、蛋白质等通过氧化作用逐步释放能量,最13终生成 co 和 h o 这一过程。与物质的体外氧化相比 2 2主要有以下异同点:相同点:(1) 两种氧化方式都遵循氧化还原反应的一般 规律,有加氧、脱氢、失电子过程;(2) 两种氧化方式所消耗的氧量、总产物(co ,2h o)和释放的能量均相同。2不同点:(1) 反应的环境与条件不同

19、,生物氧化是在生物 细胞内进行的,恒温, ph 接近中性,可有水 参与,而体外氧化则需高温和干燥的环境;(2) 反应的方式不同,生物氧化在一系列酶的催化下逐步进行,o 接受电子后与 h+ 生成水,co22由脱羧基产生;而体外氧化无需酶催化,反应 剧烈,h 和 c 直接与 o 化合成 h o 及 co ;2 2 2(3) 释放能量过程不同,生物氧化能量逐步释 放,能量部分以化学能方式储存,部分以热能 释放,而体外氧化全部以热和光的形式骤然释 放。1419. 为什么说逆转录现象的发现在生命科学研究中有 重大的研究价值?是 rna 病毒以其 rna 为模板合成 dna 的过程,意 义有:1. 补充完

20、善了中心法则2. 逆转录病毒中有致癌病毒,其研究关系到严重危害 人类健康的某些疾病发病机理、诊断和治疗; 3. 是分子生物学研究中的重大工具酶,应用于 cdna 制备,rt-pcr 制备上。20.简述 dna 双螺旋结构模式的要点及其与 dna 生物 学功能的关系。dna 双螺旋结构模型的要点:(1)dna 是以反向平行 的双链结构,脱氧核糖基和磷酸基骨架位于双链的外 侧,碱基位于内侧,两条链的碱基之间以氢键相接触。 腺嘌呤始终与胸腺嘧啶配对存在,形成两个氢键 (a=t ),鸟嘌呤始终与胞嘧啶配对存在,形成三个氢 键(gc)。碱基平面与线性分子结构的长轴相垂直。 一条链的走向是 53,另一条链

21、的走向就一定是 35;(2)dna 是一右手螺旋结构。螺旋每旋转 一周包含了 10 对碱基,每个碱基的旋转角度为 36。15螺距为 3.4nm,每个碱基平面之间的距离为 0.34nm。 dna 双螺旋分子存在一个大沟和一个小沟;(3 )dna 双螺旋结构稳定的维系横向靠两条链间互补碱基的 氢键维系,纵向则靠碱基平面间的疏水性堆积力维 持。21.说明高氨血症导致昏迷的生化基础。高氨血症时,脑中的反应为 氨+-酮戊二酸 生成谷 氨酸,氨+谷氨酸 生成谷氨酰胺, 脑内-酮戊二酸 减少导致了三羧酸循环减慢,从而使 atp 生成减少, 脑组织供能缺乏表现为昏迷。22.有哪些方法可获得目的基因?包括:限制

22、性内切酶; cdna 合成法;基因人工合成 法;pcr 法以特异性引物扩增目的基因。23.简述乳酸循环形成的原因及其生理意义。乳酸循环的形成是由于肝脏和肌肉组织中酶的特性 所致。肝内糖异生很活跃,又有葡萄糖 6 磷酸酶 可水解 6磷酸葡萄糖,释放出葡萄糖。肌肉组织中 除糖异生的活性很低外,又没有葡萄糖 6 磷酸酶;肌肉组织内生成的乳酸既不能异生成糖,更16不能释放出葡萄糖。乳酸循环的生理意义:在于避免损失乳酸(能源物质) 以及防止因乳酸堆积引起酸中毒。24.原核生物 mrna 在小亚基上的定位涉及哪些机制? 原核生物 mrna 在小亚基上的定位涉及两种机制。其 一,原核生物 mrna 起始密码

23、上游 s-d 序列与小亚基 16s-rrna3 端短序列互补;其二,s-d 序列后小核苷 酸序列,被核蛋白体 rps-1 结合。通过上述 rna-rna 、 rna-蛋白质相互作用使 mrna 的起始 aug 在核蛋白体 小亚基上精确定位,形成翻译起始复合物。25比较脑、肝、骨骼肌在糖、脂代谢和能量代谢上 的主要特点。脑:是机体耗能的主要器官,一般主要以葡萄糖供能, 耗用葡萄糖由血糖供应,不能直接分解脂肪酸,糖供 给不足时,可以酮体作为能源物质。肝:是机体糖脂代谢的主要器官,对维持血糖恒定起 到重要作用。合成储存糖原可达肝重的 10%;糖异生; 具有葡萄糖 -6- 磷酸酶,可使储存的糖原分解为

24、葡萄 糖释放入血,维持血糖恒定。合成甘油三酯、胆固醇、 磷脂的主要器官,合成的脂类主要以 vldl 运输到其17他组织储存;肝合成 hdl 具有胆固醇逆向转运及抗 ldl 氧化的作用,有抗动脉粥样硬化的作用;具有高 活性的脂酸 - 氧化酶类,可大量合成酮体供肝外组 织利用。肝是机体耗能的主要器官之一。肌肉:通常以氧化脂肪酸为主,剧烈运动时,以糖无 氧酵解补充能量,能合成糖原,但缺乏葡萄糖 -6- 磷 酸酶,因此肌糖原基本不能分解成葡萄糖以补充血 糖。26. 叙述呼吸链的组成与排列,这样排列的依据是什 么?机体氧化呼吸链有两条,分别为 nadh 氧化呼吸链与 琥珀酸氧化呼吸链,其组成与排列顺序于

25、下图:nadh复合体 icoq 复 合 体 cytc复合体琥珀酸复合体这两条呼吸链的排列顺序是由一系列的实验及其结 果确定的:1 根据呼吸链各组分的标准氧化还原电位,由低到高 的顺序排列;2 在体外将呼吸链拆开和重组,鉴定四种复合体的组18成与排列;3 利用呼吸链特异的抑制剂阻断某一组分的电子传 递,在阻断部位以前的组分处于还原状态,后面则 处于氧化状态;4 根据吸收光谱的改变进行检测;以离体线粒体无氧 时处于还原状态作为对照,缓慢给氧,观察各组分 被氧化的顺序。当然,有些组分的具体位置还有待进一步研究确 定。27.遗传密码有哪些主要特性?方向性,连续性,简并性,通用性,摆动性28. 给动物以

26、丙氨酸,它在体内可转变为哪些物质? 写出可转变的代谢途径名称。丙酮酸转氨基丙酮酸(2)丙酮酸 (3)丙酮酸 (4 )丙酮酸甘油无氧酵解糖异生酵解逆行乳酸葡萄糖 磷酸二羟丙酮(5)丙酮酸氧化脱羧乙酰 coa呼吸链 co2+h2o19(6)丙酮酸氧化脱羧乙酰 coa脂肪酸合成脂肪酸(7)丙酮酸 成酮体 (8)丙酮酸合成胆固醇氧化脱羧氧化脱羧乙酰 coa乙酰 coa酮体合胆固醇(9)丙酮酸羧化草酰乙酸29解释基因载体,说出哪些 dna 可作为基因的载 体。又称克隆载体,是在基因工程中为“携带”感兴趣的 外源 dna 、实现外源 dna 的无性繁殖或表达有意 义的蛋白质所采用的一些 dna 分子,具有

27、自我复制 和表达功能。其中,为使插入的外源 dna 序列可转 录、进而翻译成多肽链而特意设计的克隆载体又称表 达载体。基因载体有质粒 dna、噬菌体 dna 和病毒 dna, 它们经适当改造后仍具有自我复制能力,或兼有表达 外源基因的能力 .2030举例说明竞争性抑制作用在临床上的应用。 以磺胺类药物为例。1) 对磺胺类药物敏感的细菌在生长繁殖时,不能直 接利用环境中的叶酸,而是在菌体内二氢叶酸合成酶 的催化下,以对氨基苯甲酸、二氢蝶呤和谷氨酸为底 物合成二氢叶酸。二氢叶酸是核苷酸合成过程中饿辅 酶之一四氢叶酸的前体 (2)。2) 磺胺类药物的化学结构与对氨基苯甲酸相似,是 二氢叶酸合成酶的竞

28、争性抑制剂,抑制二氢叶酸的合 成。细菌则因核苷酸乃至核酸的合成受阻而影响其生 长繁殖。人类能直接利用食物中的叶酸,体内的核酸 合成不受磺胺类药物的干扰 (4)。3) 根据竞争性抑制的特点,服用磺胺类药物时必须 保持血液中药物的高浓度,以发挥其有效的竞争性抑 菌作用(2)。许多属于抗代谢物的抗癌药物,如氨甲蝶呤、 5-氟尿 嘧啶、6-巯基嘌呤等,几乎都是酶的竞争性抑制剂, 它们分别抑制四氢叶酸、脱氧胸苷酸及嘌呤核苷酸的 合成,以抑制肿瘤的生长 (2)。31一种 dna 分子含 40%的腺嘌呤核苷酸,另一种 dna21分子含 30%的胞嘧啶核苷酸,请问那一种 dna 的 tm 值高?为什么?第一种

29、 dna 的 tm 值高于第二种(1)。因为第一种 dna 含有较高的(60%鸟嘌呤和胞嘧啶配对 (1),因而碱基 互补所形成的氢键多于第二种 dna(1)。32.解释质粒,为什么质粒可作为基因的载体。质粒,是存在于细菌染色体外的小型环状双链 dna 分 子。质粒分子本身是含有复制功能的遗传结构,能在 宿主细胞独立地进行复制,并在细胞分裂时恒定的传 给子代细胞。质粒带有某些遗传信息,所以赋予宿主 细胞一些遗传性状。因为质粒 dna 有自我复制功能及 所携带的遗传信息等特征,故可作为 dna 操作的载体。 质粒的复制及表达功能、选择标志基因。33 讨论鸟氨酸循环、丙氨酸 - 葡萄糖循环、甲硫氨

30、酸循环的基本过程与生理意义。鸟氨酸循环:经鸟氨酸、瓜氨酸及精氨酸等步骤合成 尿素后,又重新回到鸟氨酸的一种循环过程。 不断 地将体内有毒性的氨转变成尿素,达到解除氨毒的作 用。22丙氨酸-葡萄糖循环:将肌肉蛋白分解的氨经丙酮 酸转氨基生成丙氨酸后随血液转运到肝,丙氨酸经肝 脱氨基生成丙酮酸和氨,丙酮酸经肝糖异生形成葡萄 糖,而氨经肝鸟氨酸循环合成尿素,葡萄糖经血液回 到肌肉经肌肉经酵解过程再生成丙酮酸。 将肌肉中 代谢产生的氨通过丙酮酸形式转运到肝而合成尿素。甲硫氨酸:甲硫氨酸经 sam、同型半胱氨酸等中间 代谢,进而重新生成甲硫氨酸的循环过程。 为体内 甲基化反应提供活性甲基的供体( sam

31、)34.简述真核生物 mrna的结构特点。成熟的真核生物 mrna 的结构特点是:(1) 大多数真核 mrna 在 5-端以 m7gpppn 为分子的 起始结构。这种结构称为帽子结构。帽子结构在 mrna 作为模板翻译成蛋白质的过程中具有促进核糖体与 mrna 的结合,加速翻译起始速度的作用,同时可以增 强 mrna 的稳定性;(2) 在真核 mrna 的 3末端,大多数有一段长短不 一的多聚腺苷酸结构,通常称为多聚 a 尾。一般有数 十个至一百几十个腺苷酸连接而成。因为在基因内没 有找到它相应的序列,因此认为它是在 rna 生成后才23加上去的。随着 mrna 存在的时间延续,这段多聚 a

32、尾巴慢慢变短。因此,目前认为这种 3-末端结构可 能与 mrna 从细胞核向细胞质的转位及 mrna 的稳定性 有关。35. 概述体内氨基酸的来源和主要代谢去路体内氨基酸主要来源:食物蛋白质的消化吸收;组织 蛋白质的分解;经转氨基反应合成非必需氨基酸。主 要的去路有:合成组织蛋白质;脱氨基作用产生的氨 合成尿素;-酮酸转变成糖和 /或酮体,并氧化产能; 脱羧基作用生成胺类;转变为嘌呤、嘧啶等其他含氮 化合物。36.简述多肽链生物合成的延长过程。.肽链延长在核蛋白体上连续性循环。(1)进位:氨基酰-trna 进入核蛋白体 a 位; (2)成肽:转肽酶催化成肽;( 3 ) 转 位 : 由 ef-g

33、 转 位 酶 催 化 , 新 生 肽 酰 -trna-mrna 位移入 p 位,a 位空留,卸载 trna 移入 e 位并脱离。37.简述 e. coli 和真核表达体系各自的优、缺点。24原核表达体系如 e. coli 是当前采用最多的原核表 达载体系,其优点是培养方法简单、迅速、经济而适合大规模生 产工艺;不足之处是只能表达克隆的 c dna,不宜 表达真核基因组 dna(即含有内含子的 dna);表 达的真核蛋白质不能形成适当的折叠或进行糖基化 修饰;表达的蛋白质常常形成不溶性的包涵体,欲 使其具有活性尚需进行复杂的复兴复性处理;很难 在 e. coli 表达体系表达大量的可溶性蛋白,与

34、原核 表达体系比较,真核表达体系如酵母、昆虫及哺乳类 动物细胞表达体系,尤其是哺乳类动物细胞表达体 系,不仅可表达克隆的 c dan, 而且还可以表达真核 基因组 dna; 哺乳类细胞表达的蛋白质通常总是被适 当修饰,因此表达产物直接就有功能。操作技术难、 费时、不经济是哺乳类动物细胞表达体系的缺点。38. 你认为转录和复制哪一种保真性更高?请说明理 由。复制有更高的保真性;复制:碱基配对。 dna-pol 即时校读修复。dna-pol 碱基选择功能。转录:碱 基配对,但 rna-pol 无核酸外切酶活性,无碱基选择 功能。39.用两种不同的 方式写出一段长 8bp,含有四种碱 基成分的 dn

35、a 序列(任意排列)。255papcptpgpcptpgpc-oh 3 5actgctgc 31.简述酶的“诱导契合假说”。酶在发挥其催化作用之前,必须先与底物密切结合 , 在酶与底物相互接近时,其结构相互诱导、相互变形 和相互适应,这一过程称为酶底物结合的诱导契合假 说。酶的构象改变有利于与底物结合;底物也在酶的 诱导下发生变形,处于不稳定状态,易受酶的催化攻 击。这种不稳定状态称为过渡态。过渡态的底物与酶 的活性中心在结构上最相吻合,从而降低反应的活化 能。2.酮体是如何产生和利用的?酮体是脂肪酸在肝脏经氧化分解后转化形成的中 间产物,包括乙酰乙酸、-羟丁酸和丙酮。肝细胞 以-氧化所产生的

36、乙酰辅酶 a 为原料,先将其缩合成羟甲戊二酸单酰coa ( hmg-coa ),接着hmg-coa 被 hmg-coa 裂解酶裂解产生乙酰乙 酸。乙酰乙酸被还原产生 -羟丁酸,乙酰乙酸脱羧 生成丙酮。 hmg-coa 合成酶是酮体生成的关键 酶。肝脏没有利用酮体的酶类,酮体不能在肝内被 氧化。酮体在肝内生成后,通过血液运往肝外组织,26作为能源物质被氧化利用。丙酮量很少,又具有挥 发性,主要通过肺呼出和肾排出。乙酰乙酸和 - 羟丁酸都先被转化成乙酰辅酶 a,最终通过三羧酸 循环彻底氧化。3.为什么测定血清中转氨酶活性可以作为肝、心组织 损伤的参考指标?正常时体内多种转氨酶主要存在于相应组织细胞

37、 中,血清含量极低,如谷丙转氨酶( gpt )在肝细 胞中活性最高,而谷草转氨酶( got )在心机细胞 中活性最高,当肝细胞或心机细胞损伤时上述转氨 酶分别释放入血。4试述乳酸异生为葡萄糖的主要反应过程及其酶。 (1)乳酸经 ldh 催化生成丙酮酸。(2)丙酮酸在线 粒体内经丙酮酸羧化酶催化生成草酰乙酸,后者经 got 催化生成天冬氨酸出线粒体,在胞液中经 got 催 化生成草酰乙酸,后者在磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶作 用下生成磷酸烯醇式丙酮酸。(3)磷酸烯醇式丙酮酸 循酵解途径至 1,6二磷酸果糖。(4)1,6二磷酸 果糖经果糖二磷酸酶 1 催化生成 6磷酸果糖,再 异构为 6磷酸葡萄糖。(5

38、)6磷酸葡萄糖在葡萄糖276磷酸酶作用下生成葡萄糖。5举例说明蛋白质一级结构、空间构象与功能之间 的关系。蛋白质一级结构是高级结构的基础。有相似一级结 构的蛋白质,其空间构象和功能也有相似之处。如 垂体前叶分泌的肾上腺皮质激素的第 4 至第 10 个 氨基酸残基与促黑激素有相同序列,因此 acth 有 较弱的促黑激素作用。6.胞浆中的 nadh 如何参加氧化磷酸化过程?试述其 具体机制。7.举例说明蛋白质的变构效应。当配体与蛋白质亚基结合引起亚基构象变化,从而改 变蛋白质的生物活性,此种现象称为变构效应。变 构效应也可发生与亚基之间,即当一个亚基构象的 改变引起相邻的另一个亚基的构象和功能的变

39、化。 例如一个氧分子与 hb 分子中一个亚基结合,导致其 构象变化,进一步影响第二个亚基的构象变化,使 之更易与氧分子结合,依次使四个亚基均发生构象 改变而与氧分子结合,起到运输氧的作用。28脂肪酸8 糖、脂、蛋白质在体内是否可以相互转变?简要 说明可转变的途径及不能转变的原因。糖与脂:糖容易转变为脂类糖磷 酸 二 羟 丙 酮 乙酰 coa甘油三酯或 胆固醇脂变糖可能性小,仅甘油,丙酮,丙酰 coa 可异 生成糖,其量甚微。蛋白质与糖、脂:蛋白质可 以转变为糖、脂,但数量较小,生糖氨基酸异生 成糖,生酮、生糖氨基酸可生成脂类。糖、脂不能转变为蛋白质,糖、脂不能转变为必 需氨基酸,虽可提供非必需

40、氨基酸的碳骨架,但 缺乏氮源。9.试述人体胆固醇的来源与去路。人体胆固醇的来源有:从食物中摄取。机体细 胞自身合成。去路有:用于构成细胞膜。在肝 脏可转化成胆汁酸。在性腺、肾上腺皮质可转化 成性激素、肾上腺皮质激素。在皮肤可转化成维 生素 d 。还可酯化成胆固醇酯,储存在胞液及血329浆脂蛋白中。10. 细胞内有哪几类主要的 rna ?其主要功能是什 么?种类细胞核和 线粒体 胞液功能核蛋白体rnarrna mt rrna 核 蛋 白 体 组 成成分信使 rna转运 rna不均一核rna核内小rna核仁小rna胞质小rnamrnatrnahnrnasnrnasnornascrna/7sl-rn

41、amt mrna 蛋 白 质 合 成 模 板mt trna 转运氨基酸 成熟 mrna 的前 体参与 hnrna 的剪 接、转运 rrna 的加工和 修饰蛋 白 质 内 质 网 定 位 合 成 的 信 号 识 别 体 的 组 成成分3011.脂肪酸的-氧化与生物合成的主要区别是什么? 脂肪酸的 -氧化与生物合成的主要区别有:进行 的部位不同,脂肪酸-氧化在线粒体内进行,脂肪酸 的合成在胞液中进行。主要中间代谢物不同,脂肪 酸 -氧化的主要中间产物是乙酰 coa,脂肪酸合成 的主要中间产物是丙二酸单酰 coa。脂肪酰基的运 载体不同,脂肪酸-氧化的脂肪酰基运载体是 coa, 脂肪酸合成的脂肪酰基

42、运载体是 acp。参与的辅酶不同,参与脂肪酸 -氧化的辅酶是 fad 和 nad+,参与脂肪酸合成的辅酶是 nadph+h+。脂肪酸-氧化不需要 hco -3,而脂肪酸的合成需要 hco -3。adp/atp 比值不同,脂肪酸-氧化在 adp/atp 比值增 高是发生,而脂肪酸合成在 adp/atp 比值降低时进行。 柠檬酸发挥的作用不同,柠檬酸对脂肪酸 -氧化没 有激活作用,但能激活脂肪酸的生物合成。脂酰 coa 的作用不同,脂酰 coa 对-氧化无抑制作用, 但能抑制脂肪酸的生物合成。所处膳食状况不同, -氧化通常是在禁食或饥饿时进行,而合成通常是在 高膳食状况下进行。12. 什么是血浆脂

43、蛋白,它们的来源及主要功能是什 么?31血浆脂蛋白主要包括 cm、vldl、ldl 和 hdl 四 类。 cm 的功能是运输外源性甘油三酯和胆固醇; vldl 运输内源性甘油三酯和胆固醇;ldl 转运内源 性胆固醇;hdl 逆向转运胆固醇。13. 什么是蛋白质的二级结构?它主要有哪几种?各 有何结构特征?蛋白质二级结构是指多肽链主链原子的局部空间排 布,不包括侧链的构象。它主要有螺旋、折 叠、转角和无规卷曲四种。在螺旋结构中, 多肽链主链围绕中心轴以右手螺旋方式旋转上升,每 隔 3.6 个氨基酸残基上升一圈。氨基酸残基的侧链伸 向螺旋外侧。每个氨基酸残基的亚氨基上的氢与第四 个氨基酸残基上的氧

44、形成氢键,以维持螺旋稳 定。在折叠结构中,多肽链的肽键平面折叠成锯 齿状结构,侧链交错位于锯齿状结构的上下方。两条 以上肽链或一条肽链内的若干肽段平行排列,通过链 间羰基氧和亚氨基氢形成氢键,维持折叠构象稳 定。在球状蛋白质分子中,肽链主链常出现 180 度回 折,回折部分称为转角。转角通常有 4 个氨 基残基组成,第二个残基常为脯氨酸。无规卷曲是指 肽链中没有确定规律的结构。3214.简述肝糖原合成代谢的直接途径与间接途径。肝糖原合成时由葡萄糖经 udpg 合成糖原的过程称为 直接途径 .由葡萄糖先分解成三碳化合物如乳酸、丙 酮酸,再运至肝脏异生成糖原的过程称为三碳途径或 间接途径。15.概

45、述肾上腺素对血糖水平调节的分子机制。肾上腺素通过促进肝脏和肌肉组织中的糖原分解而 抑制糖原合成,使血糖水平升高。其分子机制如下: 肾上腺素作用于肝及肌细胞膜上的受体后,促使 g 蛋白与 gdp 解离而与 gtp 结合,从而激活 g 蛋白。活 化的 g 蛋白能激活腺苷酸环化酶,使 camp 生成增加, camp 激活蛋白激酶 a;后者催化细胞中许多酶类和功 能蛋白质的磷酸化,从而引起肾上腺素的生理效应。(1) 使无活性的磷酸化酶 b 激酶磷酸化为有活性 的磷酸化酶 b 激酶。后者催化无活性的磷酸化酶 b 磷 酸化为磷酸化酶 a;则可促进糖原分解,升高血糖。(2) 使有活性的糖原合酶 a 磷酸化成

46、无活性的糖 原合酶 b。从而抑制糖原合成,致使血糖浓度升高。(3) camp蛋白激酶系统还通过磷酸化改变某些 酶的活性调节血糖水平。如抑制肝丙酮酸激酶减少糖33的分解代谢,激活果糖双磷酸酶 1 促进糖异生,升 高血糖。161mol 软脂酸彻底氧化分解净生成多少 atp?129 17.简述糖异生的生理意义。(1) 空腹或饥饿时利用非糖化合物异生成葡萄糖, 以维持血糖水平恒定。(2) 糖异生是肝脏补充或恢复糖原储备的重要途径。 (3)饥饿时,糖异生增强有利于维持酸碱平衡。18.试述乙酰 coa 在脂质代谢中的作用。在脂质代谢中,乙酰 coa 主要来自脂肪酸的 -氧化, 也可来自甘油的氧化分解。在肝

47、脏,乙酰 coa 可被 转化成酮体向肝外输送。在脂肪酸生物合成中,乙酰 coa 是基本原料之一。乙酰 coa 也是胆固醇合成的 基本原料之一。19.酶与一般催化剂相比有何异同?相同点:1)反应前后无质和量的改变;2)只催化热 力学允许的反应; 3)不改变反应的平衡点;4)作用的机理都是降低反应的活化能。 不同点:1)酶的催化效率高;2)对底物有高度特异34性;3)酶在体内处于不断的更新之中; 4) 酶的催化作用受多种因素的调节; 5)酶是 蛋白质,对热不稳定,对反应的条件要求严 格。20. 蛋白质的基本组成单位是什么?其结构特征是什 么?蛋白质的基本组成单位是氨基酸,均为 l氨基 酸,即在碳原

48、子上连有一个氨基、一个羧基、一 个氢原子和一个侧链。每个氨基酸的侧链各不相同, 是其表现不同性质的结构特征。21. 举例说明竞争性抑制作用在临床上的应用。21. 简述天冬氨酸在体内转变成葡萄糖的主要代谢途 径。天冬氨酸 +酮戊二酸在谷草转氨酶作用下生成草酰 乙酸和谷氨酸,草酰乙酸在磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶 的作用下生成磷酸烯醇式丙酮酸,磷酸烯醇式丙酮酸 经糖异生生成 1,6-二磷酸果糖,最后生成葡萄糖。 23. .血糖的来源:(1)食物经消化吸收的葡萄糖;(2) 肝糖原的分解;(3)糖异生。35血糖的去路:(1)氧化供能;(2)合成糖原;(3) 转变为脂肪某些非必需氨基酸;(4)转变为其他糖类

49、物质。24.何谓肽键和肽链及蛋白质的一级结构?一个氨基酸的羧基和另一个氨基酸的氨基, 进行脱水缩合反应,生成的酰胺键称为肽键。由许多 氨基酸通过肽键相连而形成长链,称为肽链。肽链有 两端,游离氨基的一端称为 n末端,游离羧基 的一端称为 c末端。蛋白质一级结构是指多肽链中 氨基酸的排列顺序,它的主要化学键为肽键。25. 为何蛋白质的含氮量能表示蛋白质相对量?实 验中又是如何依此原理计算蛋白质含量的?25. 试列表比较糖酵解与有氧氧化进行的部位、反应 条件、关键酶、产物、能量生成及生理意义。氧氧化反应条件氧情况糖酵解供氧不足糖有有进行部位胞液胞36液和线粒体 关键酶 列的 3 个酶酸脱氢酶系檬酸

50、脱氢酶己糖激酶(或葡萄糖激酶)磷酸果糖激酶 1丙酮酸激酶有左丙酮异柠戊二酸脱氢酶系檬酸合酶产 物atp 酮柠乳酸、atp h o、co 、2 2能 量 1mol 葡萄糖净得 2molatp 1mol 葡萄糖净得36或337生理意义迅速供能;某些组织依赖 获取能量的主要方式8molatp是机体27.简述各种 rna 在肽链合成过程中的作用。mrna 携带遗传信息作为指导和合成多肽链的模板; trna 以氨基酰-trna 方式结合并运载各种氨基酸, 使氨基酸进入核蛋白体对号入座合成肽链; rrna 和 多种蛋白质构成核蛋白体作为合成多肽链的场所。28.说明酶原与酶原激活的意义。有些酶在细胞内合成或

51、初分泌时只是酶的无活性前 体,必须在一定的条件下,这些酶的前体水解开一个 或几个特定的肽键,致使其构象发生改变,表现出酶 的活性。这种无活性的酶的前体称为酶原。酶原向酶 的转化过程称为酶原的激活。酶原的激活实质上是酶38的活性中心形成或暴露的过程。酶原的激活具有重要的生理意义。保护消化器官 本身不遭酶的水解破坏保证酶在其特定的部位和 环境发挥其催化作用酶原还可视为酶的贮存形式。 如凝血和纤维蛋白溶解酶类以酶原的形式在血液循 环中运行,一旦需要便不失时机地转化为有活性的 酶,发挥其对机体的保护作用。29. 在糖代谢过程中生成的丙酮酸可进入哪些代谢途 径?在糖代谢过程中生成的丙酮酸具有多条代谢途

52、径:(1) 在供氧不足时,丙酮酸在 ldh 催化下,接受 nadh+h+ 的氢原子还原生成乳酸。(2) 在供氧充足时,丙酮酸进入线粒体,在丙酮 酸脱氢酶复合体的催化下,氧化脱羧生成乙酰 coa ,再经三羧酸循环和氧化磷酸化,彻底氧化 生成 co 、h o 和 atp。2 2(3 )丙酮酸进入线粒体在丙酮酸羧化酶催化下生 成草酰乙酸,后者经磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶催 化生成磷酸烯醇式丙酮酸,再异生为糖。39(4) 丙酮酸进入线粒体在丙酮酸羧化酶催化下生 成草酰乙酸,后者与乙酰 coa 缩合成柠檬酸,可 促进乙酰 coa 进入三羧酸循环彻底氧化。(5) 丙酮酸进入线粒体在丙酮酸羧化酶催化下生 成草酰乙酸,后者与乙酰 coa 缩合成柠檬酸;柠 檬酸出线粒体在胞液中经柠檬酸裂解酶催化生 成乙酰 coa,后者可作为脂肪酸、胆固醇等的合 成原料。(6) 丙酮酸可经还原性氨基化生成丙氨酸等非必 需氨基酸。3

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