7氯醋酸AS-D萘酚酯酶染色液(AS-DCE)(20210311151427)

1、红河州第一人民医院检验科质量管理体系文件SOP文件 第四篇：第7节 氯醋酸AS-D萘酚酯酶染 色液（AS-DCE） 文件编号：JYK-LCS-SG-007 版本/修订号：2012/01 生效日期：2012/10/01 文件页数：2 1.检验原理 氯醋酸AS-D萘酚能被酯酶水解生成 AS-D萘酚，再与稳定的重氮盐偶联，生成不溶性的红 棕色沉淀定位于细胞浆中。阳性反应通常仅出现于粒细胞中，故又称特异性酯酶染色。 2主要组成成分 组成 主要成分 甲醛 畐U品红 亚硝酸钠 磷酸盐 氯醋酸AS-D萘酚 甲基绿 2.1、固定剂（A液） 2.2、偶氮溶液（B液） 2.3、亚硝酸钠溶液（C液） 2.4、磷酸盐

2、缓冲溶液（D液） 2.5、氯醋酸AS-D萘酚溶液（E液） 2.6、甲基绿溶液（F液） 3. 储存条件及有效期 有效期：一年（十二个月）。 储存条件：本试剂盒应储存于28 C低温环境。 4. 样本要求 新鲜的骨髓细胞涂片及血液细胞涂片。 5. 检验方法 42.8ml,至少可同时放置 8-10张涂片）： 重氮盐溶液的准备：B液0.4ml与C液0.4ml彻底混匀，静置 2分钟； 染缸（自备染液缸）内加入 D液40ml; 将重氮盐溶液倒入染缸内，混匀； 再加E液2ml入染缸内，轻轻混匀。 5.1、工作液配制： 5.1.1、浸染工作液配制（一份浸染工作液量为 5.1.1.1、 5.1.1.2、 5.1.

3、1.3、 5.1.1.4、 5.1.2. 滴染工作液配制（一份滴染工作液量为2.14ml）: 使用器材：一次性塑料试管、微量移液器、一次性吸嘴、滴管。 操作：取B液20ul、C液20ul混匀，静置1分钟；再加 D液2ml、E液100ul，混匀。 注：100Tests中的20mlD液（浓缩缓冲液）用蒸馏水稀释成200ml缓冲液使用。 5.2. 染色步骤： 5.2.1、干燥涂片，滴加 A液布满涂片固定 30秒，蒸馏水冲洗，待干或滤纸吸干。 5.2.2、 滴加或浸入工作液室温（如冬天室温低，需用37C孵育）染色1520分钟，蒸馏水 冲洗，待干。 5.2.3、F液复染12分钟，蒸馏水冲洗，干后镜检。

4、6. 临床意义 临床上主要用于急性白血病类型的鉴别急性粒细胞白血病和急性早幼粒细胞白血病原粒细 -（ + + + ） ； 急 原、幼淋巴细胞 胞NAS DCE染色多呈（+ ）- （ + + ），白血病性早幼粒细胞呈（+ + ） 性单核细胞白血病 原、幼单核细胞多呈阴性反应；急性淋巴细胞白血病 呈阴性反应。 7. 注意事项 编写：杨松钱 审核：黄萱 批准：白云辉 页码：19 第四篇：第7节 氯醋酸AS-D萘酚酯酶染 色液（AS-DCE） 文件编号：JYK-LCS-SG-007 版本/修订号：2012/01 生效日期：2012/10/01 文件页数：2 7.1 使用前应恢复至室温，用前摇匀。 7.2 每次使用后，请迅速盖好密封保存，以免挥发影响效果 7.3 .应由专业人使用和进行判读. 7.4在涂片上两液混匀时，动作要轻，以免将阳性颗粒吹散到阴性细胞上； 7.5 制片不能太厚，涂片要新鲜. 7.6基质液配制过程中要振摇，以促使基质溶解.冬天配制时应适当加温（置于37C水箱操作）. 基质液现配现用，不能保存,过滤后应尽快试验，以免大量沉淀物析出，影响染色效果. 8. 参考文献 8.1、 中华人民共和国卫生部医政司.全国临床检验操作规程M.第3版.南京：东南