在线凝胶色谱―气相色谱质谱测定菠菜中55种农药残留

1、在线凝胶色谱气相色谱质谱测定菠菜中 55 种农药 残留分类号 S482.4Method for the determination of 55 pesticide multiresidues in spinach by On-line GPC-GC/MS was developed. The sample was extracted with acetonitrile ， and cleaned by PSA powder after salting out. The final purified extract was analyzed by GPC-GC/MS. The average r

2、ecoveries of 55 kinds of pesticide at three spiked concentration levels ( 0.025 ，0.05 and 0.10 mg/kg) rangedfrom 81.3 106.2% with the relative standard deviations (RSDs) below 10.3%. Good linearity which correlation coefficient was greater than 0.995 3 was observed in the range of 0.01 to 0.5 卩 g/mL

3、. The limits of detection(LODSof 55 pesticides were 0.0050.5 卩 g/kg. The method iseasy， fast ， and more sensitive. It also indicated that this method can meet the requirements for determination of 55 pesticide multiresidues in spinach.Keywords pesticide ； residues ； on line gel permeation chromatogr

4、aphy coupled with gas chromatography-mass spectrometry( GPC-GC/M)S ； spinach目前，国内外报道的农药残留检测多采用气相色谱法、 气相色谱 -质谱联用法等 1-2 。由于气相色谱法一般只能同时分析检 测一类化合物，难以满足多类多残留分析的发展趋势 3-4 ；传 统的气相色谱 - 质谱联用仪，由于进样体积的限制，检出限比较 高5。在线凝胶色谱串联气相色谱质谱技术是由GPC屯化前处理装置与GC/MS在线联接组成，采用微型GPC色谱柱的分离能力 与新开发的GC/MS大体积进样法，实现了农药残留多组份同时快 速分析。杨惠琴 6-8

5、 利用在线凝胶色谱串联气相色谱 -质谱技术 对食品中的杀菌剂进行了分析，检出限为0.01卩g/kg ;郑健琨等9 通过在线凝胶色谱串联气相色谱 -质谱技术，对土壤中 36 种农药进行了研究。 但这类文献往往仅限于几种或一类农药残留 进行分析检测 10-16 ，通过在线凝胶色谱串联气相色谱 -质谱技 术分析蔬菜中的多类农药残留，至今未见报道。本研究采用在线凝胶色谱串联气相色谱 -质谱（ GPC-GC/M）S 同时对菠菜中的 55种有机磷、有机氯及除虫菊酯类农药残留进 行定性、定量研究。建立了高效、灵敏、可靠的GPC-GC/M同时测定菠菜中 55 种农药多残留的快速分析方法。1 材料与方法1.1

6、材料1.1.1 药品与试剂丙酮、环己烷（均为 HPLC级，Merk）；乙腈，正己烷，乙 酸乙酯等均为分析纯（广州化学试剂厂）;无水硫酸钠，氯化钠（140C烘烤4 h,放入干燥器中冷却备用）;PSA固相萃取填料。 百菌清、三唑酮、氯氰菊酯等 55 种农药标准溶液均购自天津环 境保护科学研究所，纯度大于 98%。农药混合标准储备溶液浓度 为100卩g/mL （丙酮溶液），于4C冰箱保存，混合基质标准工 作液根据需要用空白菠菜样品净化定容液逐级稀释成工作液， 现 用现配o GPC-GCM为在线凝胶渗透色谱-气相色谱质谱联用仪（岛 津）；离心机为 UNIVERAL 32R（ Hettich 公司）。1

7、.1.2 仪器工作条件GPC条件：色谱柱为 Shodex CLNpak EV-200 （2.1 mmx 150 mm ;流动相为丙酮/环己烷（体积比3 : 7,下同）；流速0.1 mL/min；柱温40C ；进样量10卩L。GCM条件：色谱柱为惰性石英管 5 mx 0.53 mm预柱Rtx-5 MS 5 mx 0.25 mmx 0.25 卩 m 分析柱 Rtx-5 MS , 25 mx 0.25 mnx 0.25卩m PTV进样口温度120C；柱温程序82C （5 min） 8C/min300C（ 7.75 min ）;载气为氦气；不分流进样时间7min ;溶剂延迟9.7 min ;接口温度3

8、00C ;离子源温度230C; 采集方式选择离子监测模式。1.2 方法称取 10.0 g 菠菜样品,于 50.0 mL 聚丙烯塑料离心管中，加入5.0 mL去离子水，浸泡10 min,加入20.0 mL乙腈，15 000 r/min 均质2 min，均质后加入5.0 g氯化钠 和5.0 g无水硫酸钠，9 000 r/min 离心10 min，吸取上清液5 mL于离心管中；在离心管中加入 PSA填料50 mg,涡旋2.0 min 后，9 000 r/min离心10 min,吸取上清液于10 mL试管中；45C 水浴，氮气吹至近干；用 1 mL丙酮/环己烷定容，经0.2卩m微 孔有机滤膜过滤，供分

9、析。2 结果与分析2.1 样品前处理的优化由于菠菜样品中富含色素， 这类物质是导致样品基质复杂的 主要因素。为有效提取菠菜样品中的 55种农药，本文分别考察 了乙腈、正己烷、乙酸乙酯作为提取溶剂时 55种农药的加标回 收率。在样品净化前，分别对所提取的样品进行吹干，然后用 1 mL丙酮/环己烷定容，过膜，进行 GPC-GC/M上机分析（图1 ）。 结果表明， 正己烷与乙酸乙酯的回收率相当， 难以满足菠菜样品 中 55 种农药残留检测要求；乙腈作为提取溶剂时，回收率满足 方法要求，且提取出来的色素杂质相对较少。因此，本文选择乙 腈作为菠菜样品的提取溶剂。2.2 空白实验取空白蔬菜（菠菜）样品 1

10、 份（不添加 55 种农药标准溶液） ， 称取 10.0 g ，按照 1.2 的操作步骤，提取、净化蔬菜样品，用 GPC-GCM测定，所得的检测图谱在 55种农药标准品的出峰保留 时间出处未出现色谱干扰峰（图 2）。2.3 回收率与精密度准确称取空白菠菜样品 10.0 g （精确至 0.01 g ），加适量55种农药标准工作液，使加标水平分别为0.025、0.05、0.10mg/kg，按1.2的方法处理后进行质谱分析。每个浓度做5份重复，以外标法计算菠菜样品中农药残留量。 回收率及精密度计算 结果见表1。在3个添加水平，55种农药的回收率在81.3% 106.2%,相对标准偏差为0.5%10.

11、3%。典型空白菠菜样品添加 55 种农药的总离子流见图 3。2.4 方法线性与检出限准确配制 6个浓度梯度（ 0.010、0.025、0.05、0.1 、0.25、0.5卩g/mL）的55种农药基质匹配标准溶液进样，以溶液质量 浓度为横坐标，以相应的峰面积为纵坐标作出标准曲线，测得 55种农药的回归系数见表 2。在0.0100.5卩g/mL浓度范围内， 55种农药的相关系数均大于 0.99，线性关系良好。以 3倍信噪 比计算方法检出限， 55 种农药的检出限见表 2，菠菜样品中 55 种农药的检出限远低于植物性食品中 55 种农药所规定的最高残 留限量。2.5 GPC与GC-MS线化的效果传统的GC-MS进样量不超过2卩L,在线凝胶色谱-气相色 谱质谱系统的进样量可以达到10卩L,是普通气质联用仪的 5倍，该系统提高了检测药物的灵敏度， 降低了检测组分的检出限， 结果见表 2。由于在线凝胶色谱系统在样品提取、净化后，能够 进一步去除样品中的干扰物质，减少 55种农药基质效应影响， 降低背景干扰、改善峰形，从而更好地实现菠菜样品中 55种农 药定性与定量。2.6 实际样品测定 采用本方法对采自广东湛江的批发市场、 大型超市和农贸市 场的菠菜 10 个样品中 55 种目标物进行检测， 高效氯氟氰菊酯在 2 个蔬菜样品中被检出，检出