ABO血型系统及定型正反不符dy课件

1、ABO血型系统及定型正反不符dy1 ABO血型系统及 定型 上海市血液中心 ABO血型系统及定型正反不符dy2 l正定型（细胞定型） l用已知抗体特异性的试剂血清检查红细胞的抗 原 玻片法 试管法 微量板法 ABO常规定型常规定型 ABO血型系统及定型正反不符dy3 ABO常规定型常规定型 l反定型（血清定型） l用已知血型的试剂红细胞检查血清中的抗体 试管法 微量板法 ABO血型系统及定型正反不符dy4 正反定型结果相符时，才可以记录血型结果。 ABO血型系统及定型正反不符dy5 ABO正反不符时正反不符时 l受检红细胞是洗涤后悬浮于NS.吗? l是用最敏感的试管法吗? l受检者年龄60吗?

2、 l病人的丙种球蛋白减低吗? l病人血清与O型普检红细胞的反应与试剂红细胞一样 吗? l病人是白血病、肠道阻塞、胃癌、结肠或直肠癌吗？ l混合视野反应是输血后标本吗？ ABO血型系统及定型正反不符dy6 技术上错误的常见来源技术上错误的常见来源 l血液标本或试管鉴定不当 l红细胞悬浮液过浓或过淡及纤维蛋白、小血凝块的干扰 l人为的书写错误 l标本混乱 l忽略观察溶血现象 l未加入试剂 l未按照试剂生产商的说明操作 l离心机校准不良 l试剂受到污染 l温度在离心过程中增高 ABO血型系统及定型正反不符dy7 造成正反定型不符的造成正反定型不符的4种变异情况种变异情况 l减弱的或减少的抗原反应 l

3、未知的抗原反应 l减弱的或缺少的抗体反应 l未知的抗体反应 ABO血型系统及定型正反不符dy8 减弱或减少的抗原反应减弱或减少的抗原反应 lA或B抗原的亚血型 lA、B及AB型RBC与试剂抗血清作实验时，预 期反应：4 l细胞分型法减弱的凝集反应：健康献血员可能 A/B亚型 l抗AB 血清能检出某些不与抗A/抗B试剂发生 反应的A/B亚型 ABO血型系统及定型正反不符dy9 减弱或减少的抗原反应减弱或减少的抗原反应 l疾病状态下,抗原强度减弱 l如:A型白血病/肿瘤患者在疾病活动期改变为 A2或A3亚型 ,疾病缓解期复原 l疾病状态下,血型物质过量,中和抗A/抗B试剂, 造成假阴性/弱凝集:

4、卵巢囊肿 胃癌 胰腺癌 肠 道阻塞 l对策:试管法 红细胞三洗 ABO血型系统及定型正反不符dy10 未知抗原反应未知抗原反应 l获得性A l奇异变形杆菌感染的O/B: 与抗A反应呈混合视野 ABO血型系统及定型正反不符dy11 未知抗原反应未知抗原反应 l获得性B lRBC反应象AB型,血清中有抗B抗体 l细胞分型法: A抗原B抗原 ABO血型系统及定型正反不符dy12 获得性获得性B的成因的成因 lGerbal等假设细菌的脱乙酰基酶deactetylases 可以将A的免疫结构域糖N乙酰氨基半乳糖胺转 化为半乳糖胺。 l这个半乳糖胺与B的免疫多糖半乳糖非常的相似， 可以与某些抗B发生反应。

5、 ABO血型系统及定型正反不符dy13 抗体致敏的红细胞抗体致敏的红细胞 l抗体吸附于红细胞表面，可显示直抗阳性 l自身免疫性溶血性贫血 l抗高血压药物 l输血反应 l新生儿溶血病 l放散技术移去抗体 ABO血型系统及定型正反不符dy14 减弱或缺少抗体反应减弱或缺少抗体反应 l年龄70 l丙球蛋白过低血症 l丙球蛋白缺乏血症 ABO血型系统及定型正反不符dy15 未知的抗体反应未知的抗体反应 l缗钱状凝集 l冷自身抗体 l未知的ABO同种抗体 l未知的其它同种抗体 ABO血型系统及定型正反不符dy16 ABO抗体的区别抗体的区别 特异性血清其它来源 血型频率性 质 抗BA全部常属IgM效价

6、8-512初乳 唾液泪液 (IgA) 抗ABO、 Oh全部常属IgG,与Ax,A3凝集抗A在蜗牛鱼卵中 也可发现 抗AB全部常属IgM效价 32-2048 抗A1A2B A2 Ax 22-35% 1-8% 大多数 少数报告有输血反应用A2细胞吸收过 的抗A血清;双花扁 豆(Doliekos biflorus) 抗HOh 非Oh 全部 部分 被H物质抑制欧洲荆豆(Ulex europaeus) ABO血型系统及定型正反不符dy17 天然抗体和免疫抗体天然抗体和免疫抗体 l天然抗体 l未经可察觉的抗原刺激而产生的抗体 lO型血清中多为IgG抗A和抗B lA/B型血清中大多为IgM抗体 l免疫抗体

7、l妊娠/输血等 ABO血型系统及定型正反不符dy18 缗钱状凝集缗钱状凝集 l球蛋白浓度增高:多发性骨髓瘤/原发性巨球蛋 白血症 l纤维蛋白原增高 l血管扩张剂 l霍奇金淋巴瘤 l新生儿脐带血中的华尔道胶 ABO血型系统及定型正反不符dy19 冷自身抗体冷自身抗体 l抗I是反定型中最常见的自身抗体 l有时也见抗i和抗Pr l抗I通常凝集所有供者RBC包括患者自身及反 定型所用RBC l抗I引起的凝集比抗A抗B所引起的凝集弱 l脐带血所带的I抗原量少通常不被凝集 ABO血型系统及定型正反不符dy20 抗抗HI l与冷凝集有关的最常见的特异性抗体是抗I l有些冷抗体与I和H抗原强的细胞如（O和A2

8、细 胞）反应最强，称之为抗HI联合抗体。 ABO血型系统及定型正反不符dy21 冷自身抗体之鉴别冷自身抗体之鉴别 l 抗I 抗i 抗H 抗HI 抗Pr 成OI + - + + + 成AI + - - - + 脐Oi - + + - + l酶OI + - + + + l抗HI： O成A2成B/A成脐O脐AB ABO血型系统及定型正反不符dy22 未知的同种抗体未知的同种抗体 lABO同种抗体:A2/A2B中的抗A1 l A1/A1B中的抗H l未知的同种抗体: l筛选细胞及反定型中的O细胞 l一组谱细胞鉴定抗体特异性 ABO血型系统及定型正反不符dy23 ABO亚型亚型 lA抗原中主要为A1和A

9、2 l其它A亚型：A3、Ax、Aend、Am、Ay、 和Ael lB亚型一般比A亚型更少：B3、Bx、Bm 和Bel等 ABO血型系统及定型正反不符dy24 ABO血型系统及定型正反不符dy25 判断判断ABO亚型亚型: l1 红细胞与抗A抗A1抗B及抗AB的凝集程度 l2 红细胞上H物质活性的强弱 l3 血清中是否存在抗A1 l4 分泌型人的唾液中A、B和H物质 ABO血型系统及定型正反不符dy26 ABO血型系统及定型正反不符dy27 A1和和A2的鉴别的鉴别 项目A1细胞A2细胞 与抗A反应42 与抗A1反应 成人抗原位点100万25万 脐血抗原位点31万25万 乙酰D半乳糖胺转 移酶

10、PH 6时最多PH 7时最多 ABO血型系统及定型正反不符dy28 各种弱各种弱A亚型的鉴别程序亚型的鉴别程序 红细胞 弱凝集 混合外观(Mf）A60 A3 与抗A A3 Ax 10 红细胞呈十分弱的mf凝集 Aend 及/或抗 Aend 只与抗AB呈弱凝集 Ax A1B反应 不凝集 容易吸附放散抗A Am 能吸附 分泌型唾液中有一定量的A物质 及放散 不容易吸附放散抗A Ay 抗A 分泌型唾液含少量的A物质 Am Ay 吸附放散抗A Ael Ael 分泌型唾液只含H物质无A物质 ABO血型系统及定型正反不符dy29 A2 l与人源性抗A试剂的反应强度为4, 与抗 H+/2+ l可能有不规则抗

11、A1存在 (sometimes) l1-8% A2和22-35%的A2B存在抗 A1 l血型物质 A H l举例 抗A 抗B Ac Bc Oc l 4+ 4+ + - - ABO血型系统及定型正反不符dy30 A2 lA1和A2决定簇的区别是仅存在量的差异 l还是抗原决定簇结构不同？ l用A2细胞重复吸收来源于B型个体的抗A血清 可以移去所有抗体，表明二者之间仅是量的差 别。 lA2和A2B个体常常产生抗A1，说明A2细胞上 缺乏A1细胞上的一种决定簇。 ABO血型系统及定型正反不符dy31 血型前体物质：血型前体物质： lType1 Gal13GlcNAc 1R（血清） lType2 Gal

12、14GlcNAc 1R （红细胞） lType3 Gal13GalNAc1R（红细胞） lType4 Gal13GalNAc 1R （红细胞） lType5 Gal13Gal 1R（人工合成） lType6 Gal14Glc 1R ABO血型系统及定型正反不符dy32 ABO血型系统及定型正反不符dy33 A1和和A2同样存在质的区别同样存在质的区别 lA1细胞出现重复的3型A抗原结构，但A2细胞 却没有。 l抗A1是3型或4型A特异性的，或者抗A1可以 优先与3型或4型A反应。 ABO血型系统及定型正反不符dy34 l只有A1转移酶能够转化3型H加一个N乙酰 氨基半乳糖基成为3型A l因此A

13、2细胞上可以检测到3型H而不是3型A抗 原。 ABO血型系统及定型正反不符dy35 l双花扁豆植物血凝素检测N乙酰氨基半乳糖 胺，当过量的浓度下，它可以凝集A2细胞， 因此将它用作A亚型分型试剂更多是依赖A1和 A2表现型数量上的差异。 ABO血型系统及定型正反不符dy36 A3 l最早由Friedenreich在1936年描述 l与抗A和抗AB共同孵育时：“混合视野外观” （mixed field agglutination）。即：小的凝集块周围 是大量未凝集的细胞。 l与抗A反应强度低于A2 l与抗AB反应呈混合视野,但并不增强 l偶有抗A1 (occasionally) l血型物质 A

14、H lA3不像是A2和O细胞的嵌合体 ABO血型系统及定型正反不符dy37 Aend（Afinn，Abantu） lAend最早由Weiner 等于1959年描述 l类似于A3细胞：它们与一些抗A和抗AB表现 很弱的混合视野外观 lAend分泌型的唾液中只有H物质，但是无A 物质 l抗A1出现在部分Aend个体的血清中 l10细胞凝集（Mf） ABO血型系统及定型正反不符dy38 Am lAm细胞不能被抗A和抗AB凝集，或者仅能发生很弱的 凝集。Am细胞可以吸附放散抗A 。 lAm分泌型的唾液中包含正常含量的A和H物质，Am血 清中通常无抗A1。 lAm作为ABO位点上一个稀有的等位基因遗传

15、lAm在法国献血者的频率是150 000中有1例。（A型人 中占0.0015%），中国台湾的数据是400 000万人中1 例。 ABO血型系统及定型正反不符dy39 Am l抗原性较弱 抗A: - / w+ l抗H 4+(甚至会超过Oc) l无抗A1产生,与抗AB反应不增强 l血型物质: A H ABO血型系统及定型正反不符dy40 Ax lAx表现型最初由Fischer和Hahn于1935年报道， 它的主要血清学特点是： l红细胞与多数来源于B型血清的抗A不发生反 应，但是可以被大多数来源于O型个体的抗AB 凝集，没有混合视野表现。 l血清中含有抗A1，后者有时候可以凝集A1和 A2细胞。

16、l除了H物质，Ax分泌型个体唾液中可以捡出痕 量的A物质 ABO血型系统及定型正反不符dy41 Ax l抗A: -/ w+ l抗H:4+(与Oc的抗H差不多) l常有抗A1(Frequently) ,比A2 A3都高 l与抗A+B的反应比抗A明显增强 l血型物质 H ABO血型系统及定型正反不符dy42 Ax lAx表现型具有很高的遗传异质性： l许多家系资料表明Ax以ABO位点上一种稀有 的等位基因的方式遗传 l在一些家庭中遗传背景不清楚 l在两项独立的研究中，法国Ax的频率为 1/77000 (A型人中的0.003%)和1/44000 ABO血型系统及定型正反不符dy43 Aint l与抗

17、A1反应较弱 2+ l与抗A及抗H反应较强 4+/3+ l仅有A1和Aint的细胞与抗A1发生反应 ABO血型系统及定型正反不符dy44 Aint lLandsteiner和Levine：有些A型个体的红细胞 既不能定义为A1也不能定义为A2 lAint在黑人中较白人更为常见， lAint是作为ABO位点上的一个等位基因遗传的。 l它的H抗原强度象A2一样强，甚至更强。 ABO血型系统及定型正反不符dy45 Ael l在通常的条件下，Ael细胞与抗A和抗AB不发 生凝集，虽然它们可以结合这些抗体，结合的 抗体可以通过吸收放散技术检测到 lAel分泌型唾液中无A物质，仅有H物质，血清 中常含有抗

18、A1，也可以含有能够凝集A2细胞 的抗体 ABO血型系统及定型正反不符dy46 Ael l在Ael血清和红细胞膜上不能检出A转移酶。 l在法国150000例献血者中，没有检测到Ael表 现型，在中国台湾400000人中捡出5例Ael个 体 lAel以ABO位点上的一种稀有的等位基因遗传 的。 ABO血型系统及定型正反不符dy47 Aw lOlsson等 l对其它弱A亚型的ABO基因的外显子、剪切部 位和启动子进行序列测定 l那些表现型不太容易被划分到任何现存的分类 中。这些异常的基因被称作Aw（15）。 ABO血型系统及定型正反不符dy48 Subgroups of A Phen o- typ

19、e Red cells testedWith anti- sera Serum tested withKnown red cells Salivaof secretors Anti-A-B-AB-A1-HA1A2BO A1V_VV_V_A and H Aint+_V+_V_A and H A2+_V_+Some- times. + _V_A and H A3+mf_+mf_+Occa- sionally. + _V_A and H Am-/w+_-/w+_V_V_A and H Ax-/W+_+/+_VFre- quently + _V_H ABO血型系统及定型正反不符dy49 B亚型亚型 l

20、弱的B变异型是很少的。 l可能是由于在许多群体中B基因的频率要相对 低得多。 l弱B亚型较难以分类。 lSalmon做出结论：B亚型最好的分类应参照A 变异型：B3、Bx、Bm和Bel，另外加上那些 不符合其它4种类型的Bw。 ABO血型系统及定型正反不符dy50 B3 l1972年 Wiener和Cioffi首先报道一例ABH非分 泌型B3。 l它被作为最稀少的一种B亚型 l这种表现型以与抗B和抗AB呈现混合视野反应 为特点 l血清中缺乏抗B l唾液中含有正常含量的B抗原 lB3通常是由于ABO位点上的稀有等位基因所 致。 ABO血型系统及定型正反不符dy51 Bx l一种异质性的血型 l典

21、型的Bx红细胞与抗B和抗AB呈弱凝集。 l血清中含有弱的抗B lBx分泌型唾液中含有一些B物质，后者常常 仅能通过Bx细胞与抗B的凝集抑制试验才能 检测到 lBx是ABO位点上的一种稀有的等位基因。 ABO血型系统及定型正反不符dy52 Bm lBm细胞不能被抗B或抗AB凝集 lB抗原仅能通过敏感的技术比如吸收放散抗B 才能检测到。 lBm分泌型唾液中B物质的含量接近正常B lBm个体的血清中不含有抗B。 l通常Bm是作为ABO位点上一个变异的基因来 遗传的，但是有几个例外报道。 ABO血型系统及定型正反不符dy53 Bel lBel红细胞与抗B和AB不发生凝集反应，但是 它们的确可以结合抗B，抗体可以通过放散技 术被检测到。 lBel分泌型唾液中不出现B物质，血清中可能存 在抗B抗体。 lBel作为ABO位点上的稀有基因而遗传， ABO血型系统及定型正反不符dy54