鱼腥草石油醚超声波法提取物抑菌作用研究

1、研究论文 鱼腥草石油醚超声波法提取物抑菌作用研究 余海忠 刘慧宏 雷思远 肖作安杨 霄 ， （襄樊学院化学与生物科学系，襄樊） 摘要：本文研究了鱼腥草石油醚超声波法提取物对五种真菌茵丝生长和孢子萌发的抑 制作用。结果表明：在抑制茵丝生长方面，在最高处理浓度为时，对终极腐霉 聊砌砌册抑制率最高，为，对齐整小核茵如硼田骆豇的最低，为， 对灰葡萄孢茵川括舱嘲、立枯丝核茵肋扔幻乃如即如耐、尖镰孢茵黄瓜专化型凡塔叫打姗卜 卿。九肌聊玎击盯的抑制率则位于中间，分别为、；在最低处 理浓度为 时，同样对终极腐霉抑制率最高，为，对立枯丝核茵、灰葡 萄孢菌、尖镰孢茵黄瓜专化型的抑制率依次为、，对齐整小核茵的最 低

2、，为。鱼腥草对五种真菌茵丝的抑制作用均随提取物浓度的升高而增强。在抑制 孢子萌发方面，在最高处理浓度为时，对灰葡萄孢茵的抑制率最高，为， 对齐整小核茵的抑制率最小，为；在最低处理浓度为 时对灰葡萄孢茵 的抑制率最高，为，对齐整小核茵的抑制率最小，为；鱼腥草对五种真菌孢 子的抑制作用均随提取物浓度的升高而增强。 关键词：鱼腥草；石油醚；超声波法；抑茵 鱼腥草胁口舶以妒伽是一种鄂西北山区常见的地道植物种。医学研究证明其含鱼腥草素、月桂醛、甲基正壬基酮等挥发油成分，对金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、痢疾杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌、副大肠杆菌、革兰阳性芽孢杆菌等均有一定抑制作用。目前，对鱼腥草的研究主要集

3、中在医药用中药材的种植、医药开发及食品开发上，但对其活性物质参与农业用药剂这方面的研究为数不多，鲜见报道。因此，本文从抑制菌丝生长和孢子萌发两个方面探讨了鱼腥草石油醚超声波法提取物对几种植物病原真菌的抑制作用。 。 一材料与方法 供试植物 鱼腥草全草，采自湖北枣阳吴店山区。蒸馏水冲洗晾干后置电热恒温鼓风干燥箱中干燥，然后用微型植物粉碎机粉碎，过目筛后装入广口瓶密封，置于冰箱中保存待用。供试病原物 立枯丝核菌尼口历，灰葡萄孢菌鹏口，齐整小核菌蜘托，终极腐霉 基金项目：湖北省襄樊市科技攻关项日（）及襄樊学院科研基金项目（） 作者简介：余海忠（一），男，湖北枣阳人，襄樊学院化学与生物科学系讲师，硕士

4、，主要从事生物活性物质与有害生物防治，：。四 植物保护与现代农业 如溉“，尖镰孢菌黄瓜专化型 ，以上五个菌株由浙江大学生物技术研 究所董波博士惠赠。 供试试剂及仪器 葡萄糖分析纯；琼脂粉生化纯；石油醚分析纯；丙酮分析纯；微型植物粉碎 机；一电热恒温干燥箱；一压力蒸汽灭菌器；旋转蒸发 仪；电子天平；热电微量移液器；一型超声波清洗器； 恒温振荡 器；血细胞计数板；型显微镜。 提取方法 称鱼腥草粉末，用石油醚浸泡，再经超声波提取。然后用滤纸过滤，收 集滤液置旋转蒸发器内减压浓缩得浸膏，置冰箱备用。生长速率测定法曙 在无菌操作台中，将鱼腥草浸膏分别用丙酮配成初始浓度为、叭、 、 的药液。将供试菌种平板

5、培养后用的打孔器 打出一定数量的菌饼备用。加热事先已灭菌的，待培养基溶化后，将药液或丙酮 （）分别与混匀使总体积达到，然后趁热倒入培养皿中制成薄厚均匀的平板。则处理药液终浓度分别为、 、 、 、 。然后用接种针小心将菌饼放置在含药液培养基和对照培养基上，菌丝一面向下，每皿接两块，最后加盖并标记，置于光照培养箱中培养。待培养一定时间后（生长快的菌培养，然后每隔测量次；生长慢的菌培养，然后每隔测量次）取出培养基，用卡尺量菌落直径（十字交叉量取次，用其平均数）。重复以上 生长抑制率挝照直萼熹磊函篡产，步骤，对五种供试菌种分别定时进行测定。菌丝生长抑制率的计算方法： 菌落直径（砌）菌落直径平均数一（菌

6、饼的直径）孢子悬浮液测定法旧 用无菌生理盐水冲洗长满孢子的培养基，将孢子冲进锥形瓶中，用纱布滤去杂质。在个装有液体培养基的锥形瓶中加入孢子悬浮液，其中瓶分别加入不同浓度鱼腥草提取液，另瓶加对照液（），使药液终浓度分别为、 、 、 ，然后在摇床中培养。孢子萌发（以孢子芽管长度大于孢子短半径者为萌发）后，用无菌水稀释到适当浓度（以 低倍镜下，每个视野个孢子为宜），加到血细胞计数板上，在倍显微镜下观测。重复以上步骤，对五种供试菌种分别定时进行观测。孢子萌发抑制率的计算方法： 孢子抑制率（对照萌发数一处理萌发数）对照萌发数结果与讨论 对真菌菌丝生长的抑制作用 在抑制菌丝生长方面，在最高处理浓度为时，对

7、终极腐霉抑制率最高，为，对齐整小核菌的最低，为，对灰葡萄孢菌、立枯丝核菌、尖镰孢菌黄瓜专化型的抑制率则位于中间，分别为、；在最低处理浓度为 研究论文 时，同样对终极腐霉抑制率最高，为，对立枯丝核菌、灰葡萄孢菌、尖镰孢菌黄瓜专化型的抑制率依次为、，对齐整小核菌的最低，为。鱼腥草对五种真菌菌丝的抑制作用均随提取物浓度的升高而增强（见表）。 表 鱼腥草超声波石油醚提取液对病原真菌茵丝生长的抑制作用 注：菌落直径为次试验（每次个平行处理）的平均值。对真菌孢子萌发的抑制效果 由表可知，对五种真菌孢子萌发的抑制作用，鱼腥革超声波石油醚提取物在最高处理浓度为时，对灰葡萄孢菌的抑制率最高，为，对齐整小核菌的抑

8、制率最小，为；在最低处理浓度为 时，对灰葡萄孢菌的抑制率最高，为，对齐整小核菌的抑制率最小，为“；鱼腥草对五种真菌孢子的抑制作用均随提取物浓度的升高而增强。 表鱼腥草石油醚超声波法提取物对真菌孢子萌发的抑制效果小结与讨论 （）对五种真菌孢子萌发的抑制作用，鱼腥草超声波石油醚提取物在最高处理浓度为时，对灰葡萄孢菌的抑制率最高，为，对齐整小核菌的抑制率最小，为；在最低处理浓度为 时，对灰葡萄孢菌的抑制率最高，为，对齐整小核菌的抑制率最小，为；鱼腥草对五种真菌孢子的抑制作用均随提取物浓度的升高而增强。 植物保护与现代农业 （）对五种真菌孢子萌发的抑制作用，鱼腥草超声波石油醚提取物在最高处理浓度为时，对灰葡萄孢菌的抑制率最高，为，对齐整小核菌的抑制率最小，为；在最低处理浓度为 时，对灰葡萄孢菌的抑制率最高，为，对齐整小核菌的抑制率最小，为；鱼腥草对五种真菌孢子的抑制作用均