各种耐药检测方法及注意事项 （课件）

1、2021/4/261 2021/4/262 v在2010年CLSI的表单M100-S20上找到并列 出其主要改变。 v为你的实验室日常工作制定合理的策略和指 导方针。 2021/4/263 vM100-S20列表（2010） vM02-A10纸片扩散法（2009） vM07-A8MIC方法（2009） vM100每年更新一次 vM02、M07每三年更新一次 2021/4/264 一 关于肠杆菌科细菌 2021/4/265 “药物测试和报告”表1 中 肠杆菌科细菌 关于头孢噻吩 CLSI M100-S20.2010 Group U CLSI M100-S19.2009 Group A 2021/

2、4/266 为什么头孢噻吩被移动位置? v在美国，注射头孢噻吩已经无效 v对于肠杆菌科细菌，口服头孢噻吩主要用于 尿路感染 v头孢噻吩敏感性测试可以代表其他口服头孢 菌素类头孢羟氨苄,头孢泊肟,头孢氨苄,氯碳 头孢 v仅尿路感染分离株报告头孢噻吩结果 2021/4/267 药物 CLSI M100-S19 2009 CLSI M100-S20 2010 S I R S I R 头孢唑啉 =32=4 头孢噻肟 =64=4 头孢唑肟 =64=4 头孢曲松 =64=4 头孢他啶 =32=16 氨曲南 =32=16 CLSI M100 -S20. Table 2A. 2021/4/268 药物 CLS

3、I M100-S20 2010 S I R 头孢呋辛 （非口服） =32 头孢吡肟=32 头孢替坦=64 头孢西丁=32 CLSI M100 -S20. Table 2A. 2021/4/269 药物 CLSI M100-S19 2009 CLSI M100-S20 2010 S I R S I R 头孢唑啉 =1815-17 =2315-22 =2623-25=2015-19 =2522-24=2114-20 =2320-22=1815-17 =2118-20=2216-21 =2118-20=17 2021/4/2610 v所研究地区范围内头孢唑啉MIC折点无可靠 结果 v需要进一步深入研

4、究 v纸片药物浓度有待修正 2021/4/2611 v先前的折点是20多年前制定的 v加强了对于以往的和新的-内酰胺酶的 耐药机制的认识，以及加上ESBLs的加 入 v确定折点有了新方法 药代动力学和药效动力学（PK/PD) 2021/4/2612 折点无需再评估 v在美国，大多药物都买不到或者没有批准使用 v对于E.coli，Klebsiella spp.和Proteus mirabilis， 检测他们中的任何一个，都必须继续完成 ESBLs筛选和确证实验 如果ESBLs阳性，要把cephalosporins、penicillins、 aztreonam 敏感的结果改为耐药敏感的结果改为耐药

5、 头孢孟多 头孢尼西 头孢哌酮 拉氧头孢 2021/4/2613 药物 CLSI M100-S19 2009 CLSI M100-S20 2010 S I R S I R 多利培南-=4 厄他培南=8=1 亚胺培南=16=4 美罗培南=16=4 2021/4/2614 v不，在化验单报告中，碳氢酶烯酶试验不是必需的。 v碳氢酶烯酶试验主要用于感染控制方面。 2021/4/2615 检测ESBLs（1） v最初的方法来源于： 某些分离株在敏感范围内提高了MIC值 得到关于病人的产ESBLs的分离菌株的数据 结果有限 对大肠埃希氏菌，克雷伯均属，奇异变形杆菌进行ESBLs的筛选和确证实验 2021

6、/4/2616 检测ESBLs（2） v现在我们认识到： ESBLs表型检测不是最理想的 1：在做确证实验时，多重耐药机制的出现会掩盖ESBLs 例如 -ESBLs+AmpC -ESBLs+porin mutation 2:ESBLs出现在除E.coli，Klebsiella spp.，Proteus mirabilis 之外的其他肠杆菌科细菌某些种时确证实验并不可行 3：一些实验室不做检测 相对于耐药机制的认识，MIC与统计输出结果关系更密切 2021/4/2617 检测ESBLs（3） 目的 如果使用 旧的折点 M100-S19 修正过的折点 M100-S20 用于标本处理 ESBL筛选和

7、确证实验YesNo 把头孢菌素类，青霉素类，氨 曲南由“S”改为“R” YesNo 用于感染控制 ESBL筛选和确证实验Yes(如果要求做.)Yes（如果要求做.) 把头孢菌素类，青霉素类，氨 曲南由“S”改为“R” YesNo 2021/4/2618 2021/4/2619 v在表1里删除粘菌素/多粘菌素 没有不动杆菌属的FDA临床指证 在表2B-2里折点没有变化 2021/4/2620 v对这类药物敏感的种类提示需要一个高浓度 治疗铜绿假单胞菌引起的严重感染。针对这 些感染，单一疗法往往造成临床治疗失败。 应考虑加入体外实验对铜绿假单胞菌有抗菌 活性的抗生素，例如喹诺酮类和氨基糖苷类 20

8、21/4/2621 2021/4/2622 万古霉素MIC vCLSI M100-S20(2010) v万古霉素纸片扩散法无抑菌环(=6mm)可检测含VanA的金黄色葡萄球 菌分离株 v万古霉素抑菌环=7mm，必须检测其MIC值 v纸片扩散法测万古霉素不可靠 v检测到万古霉素MIC=8ug/ml的任何金黄色葡萄球菌，应送到参考实 验室 2021/4/2623 vLinezolid不敏的S.aureus罕见0.05%(7 / 15,280 isolates) CLSI agenda book June 2009 耐药机制已经确定 rRNA突变、介导耐药（能被质粒编码） Mendes et al.

9、 2008. Antimicrob Agents Chemother. 52:2244. 2021/4/2624 vMRSA就是金葡的某些菌株表达mecA基因或是其 他耐甲氧西林机制，比如与青霉素结合蛋白亲和 力的改变 2021/4/2625 v机制 修饰青霉素结合蛋白位点(PBPs) 1,2,4 (MOD -SA) 编码blaZ的青霉素酶过度表达 Methicillinase？ 罕见 文献里有限的临床资料 re: 有关-内酰胺类药物的治疗 Croes, S et al. 2009. Clin Microbiol Infect. Epub. 10/09 Chambers, H. 1997. C

10、lin Microbiol Rev. 10:781. 2021/4/2626 v头孢西丁取代了检测苯唑西林耐药，报告苯 唑西林敏感或耐药必须以头孢西丁为准。如 果头孢西丁和苯唑西林同时耐药或是任何两 者之一耐药，此菌株需报告苯唑西林耐药 2021/4/2627 大多市场上的鉴定系统专家规则提示“耐药” OXCX耐药机制流行率报告-OX SS 无普遍 S RR 普遍 R RS 不常见 R SR PBP改变或是大量-内 酰胺酶（近似MRSA） 罕见 R 2021/4/2628 v打破了MRSA (and MR CoNS)耐所有-内酰胺类药物的规则 vCeftaroline and Ceftobip

11、role具有抑制MRSA的活性 *未经 FDA 认可 January 2010 CLSI M100-S20. pp 144. 种类 亚类药物名称 头孢烯 （Cephems） 抑制MRSA活性 的头孢菌素类 Ceftaroline Ceftobiprole头 孢比普酯 2021/4/2629 四 链球菌属 2021/4/2630 -溶血链球菌关于 青霉素结果的延伸 v-溶血链球菌的青霉素 “S”结果可以预测：见 左图 v每个-溶血链球菌分群在列表里 的药物都有临床指征（大菌落菌 株） CLSI M100S20.PP.93 A、B、C、G群A群另加. 氨苄西林 阿莫西林 阿莫西林/克拉维酸 氨苄西

12、林/舒巴坦 头孢唑啉 头孢吡肟 头孢噻吩 头孢拉定 头孢噻肟 头孢唑肟 头孢曲松 厄他培南 亚胺培南 美罗培南 头孢克洛 头孢地尼 头孢丙烯 头孢布烯 头孢呋辛 头孢泊肟 头孢匹林 2021/4/2631 v草绿色链球菌属包括： 5群，每个群有几个种 v变异链球菌群 v唾液链球菌群 v牛链球菌群 v米勒链球菌群 v温和链球菌群 2021/4/2632 为什么？ v虽然很少，但在青霉素与头孢菌素之间缺乏交叉敏感还是得 到了证实。 v近来的交叉敏感数据并不适宜于回顾。 v许多草绿色链球菌对-内酰胺类药物不敏感。 v许多草绿色菌的药敏试验主要来自于严重感染，需要MIC， 需要可靠的实验结果！ 202

13、1/4/2633 2021/4/2634 v仅有敏感解释标准的分离株由于耐药菌株极少被检出，种类 已经确定。分离菌株检测在MIC折点以上或是在抑菌环折点 以下应报告不敏。 v注解1：不敏的分离株并不意味着存在耐药机制，遇到MIC 值在敏感折点以上的分离株不存在耐药机制的原因可能是野 生型菌株，且发现在折点确定以后 v注解2：细菌变异导致出现不敏菌株，应证实其微生物鉴定 结果和抗生素敏感试验（附录A） CLSI M100 -S20. pp. 22. 2021/4/2635 v不敏感= MIC 1.0g/ml v出现任何不敏分离株 -重新进行AST检测 -保存菌株 -送往高一级实验室（用CLSI标

14、准MIC法检测） (查看 CLSI M100-S20 附录 A中不敏 “罕见 ” or “不存在” 记录) *Sader et al. 2009. Diagn Microbiol Infect Dis. 65:158. CLSI M100 -S20. 微生物药物 MIC(ug/ml) 备注 SIR 肺炎链球菌万古霉素=1.0-记录中仅有” 敏感“结果 葡萄球菌属达托霉素=8ug/ml的任何金黄色葡萄 球菌，应送到参考实验室 2：增加了Linezolid的耐药折点 3：定义MRSA MRSA是指含有macA基因或者苯唑西林MIC 2 g/m的 菌株. 2021/4/2660 小结（6） 4：如果

15、苯唑西林和头孢西丁在关于金黄色葡萄 球菌和路邓葡萄球菌药敏试验中其中一种是 耐药，分离菌株就要报苯唑西林耐药。 5：Ceftaroline 和ceftobiprole是头孢菌素类具 有抗-MRSA活性的药物。 2021/4/2661 小结（7） v肠球菌-内酰胺类试验非必需 v在做AST时，S. bovis应该被归为草绿色链球 菌一类 v在草绿色链球菌组，青霉素“S”结果不能用 来预测其它 - 内酰胺类药物。 2021/4/2662 . v9、 人的价值，在招收诱惑的一瞬间被决定。21.5.621.5.6Thursday, May 06, 2021 v10、低头要有勇气，抬头要有低气。*5/6

16、/2021 9:40:59 PM v11、人总是珍惜为得到。21.5.6*May-216-May-21 v12、人乱于心，不宽余请。*Thursday, May 06, 2021 v13、生气是拿别人做错的事来惩罚自己。21.5.621.5.6*May 6, 2021 v14、抱最大的希望，作最大的努力。2021年5月6日星期四*21.5.6 v15、一个人炫耀什么，说明他内心缺少什么。2021年5月*21.5.6*May 6, 2021 v16、业余生活要有意义，不要越轨。*5/6/2021 v17、一个人即使已登上顶峰，也仍要自强不息。*21.5.6 谢谢大家谢谢大家 2021/4/2664 v9、 人的价值，在招收诱惑的一瞬间被决定。2021-5-62021-5-6Thursday, May 06, 2021 v10、低头要有勇气，抬头要有低气。2021-5-62021-5-62021-5-65/6/2021 9:40:59 PM v11、人总是珍惜为得到。2021-5-62021-5-62021-5-6May-216-May-21 v12、人乱于心，不宽余请。2021-5-62021-5-62021-5-6Thursday, May 06, 2021 v13、生气是拿别人做错的事来惩罚自己。20