分子医学技能-免疫：血型鉴定与交叉配血

1、血型鉴定与交叉配血 p血型血型是人体血液的一种遗传性状，各种血液成分包括红细是人体血液的一种遗传性状，各种血液成分包括红细 胞、白细胞、血小板及某种血浆蛋白在个体之间均具有抗胞、白细胞、血小板及某种血浆蛋白在个体之间均具有抗 原成分的差异，受独特的遗传基因控制。原成分的差异，受独特的遗传基因控制。 p由若干个相互关联的抗原抗体组成的血型体系，称为由若干个相互关联的抗原抗体组成的血型体系，称为血型血型 系统系统。 p血型被认为是指各种血液成分的遗传多态性标记。血型被认为是指各种血液成分的遗传多态性标记。 p“免疫血液学免疫血液学”在临床医学、人类学、遗传学、法医学、在临床医学、人类学、遗传学、法

2、医学、 考古学等方面的应用日趋广泛，尤其是在输血、器官移植、考古学等方面的应用日趋广泛，尤其是在输血、器官移植、 骨髓移植等临床实践中发挥着重要作用。骨髓移植等临床实践中发挥着重要作用。 p重点讲述与输血工作有密切联系的红细胞血型系统。重点讲述与输血工作有密切联系的红细胞血型系统。 p红细胞血型系统红细胞血型系统 ABO血型系统血型系统 Rh血型系统血型系统 p其他血型系统其他血型系统 白细胞抗原系统白细胞抗原系统 血小板抗原及抗体血小板抗原及抗体 血清蛋白成分的抗原特异性血清蛋白成分的抗原特异性 一、红细胞血型系统 p人类红细胞血型有20多个系统，400多种血型抗 原。 p其中最重要的是AB

3、O血型系统血型系统，在输血、骨髓 移植等方面的临床意义大，其次是Rh血型系统。血型系统。 ABOABO血型系统血型系统 1 1、 ABOABO血型系统的抗原和抗体血型系统的抗原和抗体 p根据红细胞表面是否具有根据红细胞表面是否具有A A或或B B抗原，血抗原，血 清中是否存在抗清中是否存在抗A A或抗或抗B B抗体抗体ABOABO血型系统血型系统 可分为四型：可分为四型： A A、B B、O O、ABAB四型四型 本质：糖蛋白的糖链组成不同本质：糖蛋白的糖链组成不同 A A型型N-N-乙酰半乳糖乙酰半乳糖 B B型型半乳糖半乳糖 ABO血型分类血型分类 血型血型红细胞上抗原红细胞上抗原血清中抗

4、体血清中抗体 AA抗B BB抗A O无抗A，抗B ABA、B无 ABOABO血型系统血型系统 1 1、 ABOABO血型系统的抗原和抗体血型系统的抗原和抗体 pA或B抗原在胚胎期及出生时便能检出，但敏感性较低，到 20岁左右时才达高峰。抗原性终身不变，但到老年敏感性 有所下降。 pABO血型系统抗体有免疫抗体和天然抗体之分。 抗体有抗A和抗B两种。 人在出生前尚未产生抗体，出生后3-6个月才开始出现， 至青春期达高峰。产生抗体的功能可延续终身，但其效价 随着年龄增长而逐渐降低。 天然抗体可能是由一种无觉察的抗原刺激而产生。 血型抗体是免疫球蛋白，免疫性抗体主要是IgG，天然抗 体主要是IgM。

5、 ABO血型系统血型系统 1、 ABO血型系统的抗原和抗体血型系统的抗原和抗体 pA和B血型物质除存在于红细胞和其他组织细胞表 面外，还广泛存在于体液和分泌液中，以唾液中 含量最丰富，脑脊液中无。 ABO血型系统血型系统 2、 ABO血型的亚型血型的亚型 （1）A亚型亚型 pA1亚型的红细胞上有A1和A抗原，其血清中含用 抗B抗体。 pA2亚型红细胞上只有A抗原，血清中含用抗B抗体 和少量抗A1抗体。 pAX亚型红细胞与B型血清不发生凝集或凝集反应 甚弱，但却能与O型血清发生凝集。血型鉴定时， 应加O型血清，以防将AX型误定为O型。 ABO血型系统血型系统 2、 ABO血型的亚型血型的亚型 （

6、1）B亚型亚型 p亚型不多见，临床意义不大。 ABO血型系统血型系统 3、 ABO血型鉴定和交叉配血试验血型鉴定和交叉配血试验 pABO血型鉴定： ABO血型抗体能在生理盐水中 与相应红细胞抗原结合而发生凝集反应。 p直接试验：采用标准的抗A及抗B血清以鉴定被检 者红细胞上的抗原。 p反转试验：用标准的A型及B型红细胞鉴定被检者 血清中的抗体。 p只有抗原鉴定和抗体鉴定完全相符才能肯定其血 型类别。 表4-2-12 用标准血清及标准红细胞鉴定ABO血型结果 加入加入O型血清：检出抗原性较弱的型血清：检出抗原性较弱的AX亚型红细胞。亚型红细胞。 加入加入O型红细胞：检出被检者血清中是否含有与型红

7、细胞：检出被检者血清中是否含有与ABO血型血型 系统无关的红细胞异常抗体。系统无关的红细胞异常抗体。 ABO血型的鉴定血型的鉴定 （直接实验）（直接实验） ABO血型系统血型系统 3、 ABO血型鉴定和交叉配血试验血型鉴定和交叉配血试验 p交叉配血的目的是什么？ p第一是进一步验证供血者与受血者的ABO血型鉴 定是否正确，避免血型鉴定错误而导致输血后严 重溶血反应，第二可以查明有无不规则抗体、亚 型、免疫性抗体以及ABO血型系统以外的其他血 型抗体存在，保证血液在输注人体内不发生不相 合的抗原抗体反应。可以说“交叉配血”是保证 输血安全的关键措施。 交叉配血试验交叉配血试验 输血前必须进行交叉

8、配血实验。输血前必须进行交叉配血实验。 试管法试管法 主侧主侧：受血者血清加供血者红细胞悬液相配的一管。：受血者血清加供血者红细胞悬液相配的一管。 次侧次侧：供血者血清加受血者红细胞相配的一管。：供血者血清加受血者红细胞相配的一管。 两者合称为交叉配血。两者合称为交叉配血。 红细胞红细胞 红细胞红细胞 血清血清血清血清 （主侧）（主侧） （次侧）（次侧） （供血者）（供血者） （受血者）（受血者） 交叉配血试验示意图交叉配血试验示意图 两侧两侧均无凝集反应，均无凝集反应， 可以输血。可以输血。 主侧主侧有凝集反应，有凝集反应， 绝对不能输血。绝对不能输血。 次侧次侧有凝集反应，有凝集反应， 一

9、般不宜输血。一般不宜输血。 结果判读 ABO血型系统血型系统 3、 ABO血型鉴定和交叉配血试验血型鉴定和交叉配血试验 配血方法的选择配血方法的选择 1、生理盐水法生理盐水法：无输血史及妊娠史：无输血史及妊娠史 2、间接抗人球蛋白法间接抗人球蛋白法：有反复输血史及妊娠史，：有反复输血史及妊娠史， 尤其是有输血反应史、生育过新生儿溶血病婴儿尤其是有输血反应史、生育过新生儿溶血病婴儿 的妇女。的妇女。 大量输血时须同时做供血者之间的交叉配血实验。大量输血时须同时做供血者之间的交叉配血实验。 ABO血型系统血型系统 4、ABO血型系统的临床意义血型系统的临床意义 p在输血上的意义在输血上的意义：应用

10、广泛，如严重失血、某些 手术时。必须坚持同型输血，避免引起严重的溶 血反应。一般保证供血者与受血者ABO血型相合， 生育年龄妇女和须反复输血病人，还必须Rh血型 相合。 p新生儿同种免疫溶血病新生儿同种免疫溶血病：是指母亲与胎儿血型不 合引起血型抗原免疫所致的一种溶血疾病。ABO血 型系统和Rh系统引起的溶血病常见。 pABOABO血型与器官移植血型与器官移植。 p其他其他：亲缘鉴定、法医鉴定、疾病相关性调查。 （二）Rh血型系统 Rh血型系统的抗原和抗体血型系统的抗原和抗体 p抗原抗原主要有5种。抗原性强弱依次为D、E、C、c、e，以 D抗原性最强。 粗略地称含D抗原的红细胞为Rh阳性，不含

11、D抗原的为Rh 阴性。我国人中Rh阴性者甚为少见。 p天然抗体极少 p抗D抗体最常见 pRh抗体抗体有完全抗体和不完全抗体两种。完全抗体在机体 受抗原刺激初期出现，一般属IgM型，分子量大，不能通 过胎盘，存留时间短。机体继续受抗原刺激，则出现不完 全抗体，属IgG型，分子量小，可通过胎盘，存留时间长， 常在完全抗体出现后出现，引起新生儿溶血病。 （二）Rh血型系统 Rh血型系统的鉴定血型系统的鉴定 p仅用抗D血清进行鉴定，粗略地分为Rh阳性和阴 性两类。 p鉴定方法鉴定方法 完全抗体：生理盐水凝集试验 不完全抗体：胶体介质法、木瓜酶法、抗人球蛋 白法等 （二）Rh血型系统 Rh血型系统的临床

12、意义血型系统的临床意义 pRhRh血型系统所致的溶血性输血反应血型系统所致的溶血性输血反应：第一次输血 不必考虑Rh血型，第二次输血需考虑Rh血型是否 相同。 p新生儿新生儿RhRh溶血病溶血病：Rh-的母亲 若输过血，怀孕 后其孕儿为Rh+者，孕妇的抗Rh的抗体，可通过胎 盘导致胎儿溶血。第一次孕儿为Rh+，胎儿的 RBC因某种原因(如胎盘绒毛脱落)进入母体，或分 娩时进行胎盘剥离过程中血液挤入母体,孕妇体内 产生抗Rh的抗体。第二次妊娠时,孕妇体内的抗Rh 的抗体，通过胎盘导致胎儿溶血。 三、输血的原则三、输血的原则 1.1.输血前必须鉴定血型，坚持同型输血。输血前必须鉴定血型，坚持同型输血。 一般保证供血者与受血者一般保证供血者与受血者ABOABO血型相合，血型相合， 生育年龄妇女和须反复输血病人，还必须生育年龄妇女和须反复输血病人，还必须RhRh血型相合。血型相合。 2.2.必须进行交叉配血实验必须进行