果蝇综合大实验0001

1、果覲综合大实验摘要:一对同源染色体上的致死基因（I、Cy ）形成了平衡致死系，本实验研究在这种情况下的麋蝇基因分高定律、自由组合定律以及伴性遗传，选择研究的相对性状是正常翅（c）与卷翅（ 白眼（X-）与 後眼（XB），实验亲本为正常翅白眼与卷翅桜眼的正反交。通过使用X2检验（a=0.05）,聃定两个培养瓶 （正交直翅杂交组与反交卷翅杂交组）中的果媲统计值与理论值差异不显着，另外两培养瓶（正交卷翅杂交组与反交直翅杂交组）中果蝇得统计值与理论價显着不符合。第一部分果蝇性别鉴定、性状观察与饲养方法一、实验目的1、了解果蝇的生活史：2、堂握果蝇的麻醉及观察方法：3、通过实验7习掌握果蝇性别的鉴宦方法：

2、4、了解果蝇的饲养方法：5、仔细观察并记录实验室备品系果蝇的性状 .二、实验内容（- 果觐的生活史果蝇妃于昆虫纲，双翅目，与家蝇是不同的种.它的生活史包括：卵-幼虫-蛹-成虫。果蝇的生活周期长短与隘度关系很密17J.30X ?以上的温度能使果蝇不育和死亡，低沿则使它生活周期延长，同时生活力也减低，果蝇培养的最适温度20-25 Co10 is r20 C25X?卵T幼虫S人5天幼虫T成虫57天20天7天4天从表中可以看出259时，从卵到成虫约10天：在259时成虫约活15天.果蝇-般址培养在恒温箱内.盛复时.要注总降温.（二）果蝇是遗传学分析的好材料（1）生长迅速，生括史较短，短时间内可获得人虽

3、子代：C）容易饲养.在常温下以玉米粉做饲料就可使之生长繁殖：（3）染色体数目少.加之唾腺染色体巨大，是细胞学观察的好材料；（4）突变性状多，H多数是形态突变，便于观察。（三）果規的麻醉及观察方法（I）对果蝇进行检査时，可用乙瞇麻醉，使它保持挣止状态。因果蝇对乙张很敏感，易麻醉，麻醉的深度看实检要求而定（作种蝇以轻度麻醉为宜，做观察可深度麻醉，致死也无妨。果蝇翅膀外展45C角表示己死）。O）麻醉时将乙陋（2 3滴）滴到麻醉瓶塞的绵球上（注总不要让乙醍流到瓶内），同时麻醉瓶要保持燥，否则会粘住果就翅脐。（3） 将培养瓶倒置，让果娓向瓶底部运动，然后打开麻醉瓶和培养精塞，迅速将两者瓶口相接（麻醉瓶在

4、上，培养瓶在下），轻拍培养瓶壁使果蝇落入麻醉瓶中，迅速雀好两个瓶塞，并倒置麻醉瓶，一分钟后果蝇即处于昏迷状态.（4） 麻醉后的果蝇放在白瓷板匕用毛笔轻轻拨动进行观察。必要时可进行第二次麻貯。观察完毕后倒入煤油或 酒楮瓶中（死蝇盛留器）。（四）果铢的雌雄鉴别（1） 果蝇有雌椎之分，幼虫期区别较难，成虫区别容易.（2）雌性体型较大，腹部环纹 7节，末端尖，颜色浅，附节前端无黑色卑毛流苏。（3） 雄性体型较小，腹部环纹 5节，末端钝而圆，颜色深。笫一对脚的附节前端农而有黑色景毛流苏，称性梳.（五）果蝇的培养A、培养基的制备果蝇在水果摊或果园里常可见到但它并不是以水果为生，而圧食生长在水果上的酵母菌，

5、因此实验室内凡能发酵的基质，均可作为果蝇饲料.口前本实验室所用的果蝇培养基配方如F:A :匍简糖10克，琼脂15克，加水65毫升，煮沸溶解。B :玉米粉12克，加水50亳升，混介均匀.将B慢慢倒入A中，并不停搅动混合，加热成糊状后，再加一勺酵母膏，混合均匀，稍冷却后加入1亳升丙酸.调匀后即可分製到培养瓶中。B、培养容器培养果蝇的饲养粗？常用的有牛奶瓶，大中型指管，用纱布包袅的棉花球作瓶瘙（有条件的地方可改用泡沬型料作瓶塞）-饲养和先消帝，然后倒入饲料（2魁米卑），待冷却后，用酒梢棉擦瓶樂 .然后滴入酵母菌液数滴，再插 入消奇过的吸水纸作为幼虫化蛹时的干燥场所.C、原种培养在作为新的留种培养时.

6、取先检査一下果婉冇没冇混杂.以防原种丢失。亲本的数目一般每瓶 5-10对，移入新培养 瓶时，须将瓶横卧，然后将果娩挑入，待果姚消醍过来后，再把培养瓶竖起，以防果蝇粘 在培养基上。原种毎24周换一次培养基（按温度而定），毎一原种培养至少保留两套。培养瓶上标签要写明名称，培养口期等，作为原种培养，可控制到 10-15*0，培养时避免H光11射。第二部分果蝇设计实验一、实验目的1、理解基因分离定徐、门III组介定律的原理，正确认识件性遗传的正反交的筮别。2、在有致死基因的条件下验证基因分离定律、白山组合定律以及伴性遗传3、掌握果蝇两对基因杂交试验，学习实验数据收集和统计处理方法。二、实验原理卷翅甚因

7、（Cy控制果蝇的翅型为卷翅，位干常染色体上，隐性纯和致死.隐性基因（1）和卷翅基因（Cy）位于一对冋源染色体，也绘瞪性纯和致死.两个基因中间发生倒位，构建了平衡致死系，所以卷翅一FL绘 永久杂合子。实验采用用卷翅橙眼和血翅白眼为亲本验证基因分离、|1山组合和伴性遗传定律，在实验过程中根据杂交后代的性状分离比來对各个定律进行验证.1、验证基因分离定律：在验证基因分离定律时，选择正交组的翅型的性状作为研究对象，正交亲本交配后，子一代产生性状分离，出现两种表型，呈1:1之比如图：P 卷翅 CyL/cl X cL/c/L 直翅1Fl 卷翅 Cy L/cL d/cL II 翅1:12、验证基因I:由组合

8、定律:由于一对基因的分离与另一对基因的分离圧独立的.所以一对基因所决定的性状在杂种第二代产生一定的性状分离比.在验证此定律时幾选择位？非同源染色体上的两对基因。所以选择位常染色体上的控制翅型的基因和位亍性染色体上的控制眼色的基冈作为研宛对仪.还兄以正交组为例？ 1兮瓶为FI的11翅杂交，2号瓶为F1卷翅杂交.PXBXBCyL/cl x cL/cLX wY橙卷雌I白正雄Fl: XBXwCyL/cL X BYCyL/cL X BXwcL/cI X BYcL/cl橙卷雌橙卷雄橙正雌橙正雄1号：正帘翅杂交Fl: XBX*cL/cl x X BYcL/d橙正雌橙正雄F2：19 正:白 jl:=3 :12

9、号：卷翅杂交Fl: XBXCyL/cL x X BYCyL/cL橙卷雌橙卷雄F2:橙卷：橙直:白卷：白直=6:32:13、验证伴性遗传：伴性遗传定律：位于性染色体上的基因在遗传给子代时常伴随着性别的垫异。由F果蝇控制眼色的基肉位rx染色体匕所以，以此果蝇眼色作为研究对象观察性状。 正交 PXBXB x XWY橙雌 1 白雄F1:XBXWXBY橙雌蚩雄反交p白雌J橙傩XWXW xXBYFl:橙雌白雄XBXWXWY三、实验材料：1、橙眼卷翅果蝇、白眼直翅果蝇2、器几：解剖镜、毛笔、白瓷板、麻醉瓶、25*C恒温培养箱3、试剂：乙朋四、实验流程1.取橙眼卷翅雌性处女蝇与白眼正常翅雄性果蝇乞若F只作亲本

10、置于1号培养瓶中，取橙眼卷翅雄性果蝇与白眼正侖翅雌性处女蝇若干只作亲木装入2号培养瓶.然后将培养瓶呂于25C恒温箱中培养2. 待培养7-8天后，弃除亲本果蝇.继续培养.3. 再培养5天左右，收集F1代个体。准备4个心得培养啟.标号3、4、5、6。将1号瓶中的F1代果 蝇转移到另-?瓶中进行麻醉.选取其中的雄果蝇翅与卷翅*5-7只分别装入3、4号瓶，弃掉雌果蝇：将 2号瓶中的F1代果蝇转移 到另一瓶中进行麻醉？选収其中的雄杲撓n翅与卷翅各5-7只分别装入5、6弓瓶，弃抻雌果娩将6个培养瓶放入恒温箱继续培养？ Wh后，再次将1号瓶中的FI代果蝇转移到另一瓶中进 行麻醉，选取其中的雌果蝇直翅与卷翅各

11、5?7只分别装入3、4号对应培养瓶中，弃掉雄果蝇。将2号瓶中 的F1代果蝇转移到另-?瓶中进行麻醉，选収其中的雌果蝇H翅与卷翅乞5-7只分别装入5、6 I ；对应培养 瓶中，弃掉雄果蝇将4个培养瓶放入恒温箱进行培养.4培养7-8天后弃除F7代果娓，放入恒温箱继续培养。5培养5天左右，开始对瓶中的 F2代根据不同的性别和性状进行分类计数并进行记录。记录的总数应超过500只，一次记录的数目不到500只可以过几天进行第二次计数但从弃抻F1代果蝇开始，不得超过 20天，否则，F3代果蝇 出现,影响结果。6利用卡方检验对记录的实验结果进行检验，足否符合遗传定律。五、预期结果15卷雌与白直雄正交：PXBX

12、BCyUcl x XwY cL/cL橙卷雌I白直雄F1: XBXwCyL/cL X BYCyL/cL X BXwcL/cl X BYcL/cl橙卷雌橙卷雄橙ri雌橙直雄1号：直翅杂交Fi: XBXwcL/cl x X BYcL/cl橙直雌橙宜雄F2 : ttUt 白 n=3 : i2号，卷翅杂交F1: XBXwCyL/cL x X BYCyL/cL橙卷雌橙卷雄F2:橙卷：橙直：白卷:白直=6 3:2:1白n雌与橙卷雄反交：P:XwXwcL/cL x X BYCyL/cl白直雌1橙卷雄F】：XBXwCyL/cL X wYCyL/cL X BXwcL/cl XwYcL/cl橙卷雌白卷雄橙F雌白rr

13、?雄3号：亶翅杂交Fi: XBX wcL/cl x X wYcL/cl橙H雌白宜雄證直:白n=i 14号：卷翅杂交动物遗传学实验四川农业大学5/8Fi: XBXwCyL/cL x X wYCyL/cL 橙卷雌 白卷雄F?：橙卷：橙直：白卷：白 11=2:1:2:1六、实验结果与分析号瓶果蝇统计结果表型统计数量理论比例正常翅白眼641正常翅橙眼1603使用R软件进行*2检验得到结果如卜？（该试验W F 2x2列联丧独立性检验问题，町J进行X2检验须作连续性娇正)：A datav -matnx(A 2), chisq test(data.TURE)?Pears ons Chi-squared te

14、st with Y ates* con ti nuity correcti ondata: dataX-squared = 0.55772, df = 1, p-value = 0 4552根据软件所得结果 P0 05.说明该组果巍表熨比例与预期理论比例1: 3圣异不显著一号瓶果蝇统计结果表型统计数量理论比例正常翅白眼91卷翅白眼442正常翅橙眼473卷翅橙眼1226使用R软件进行X2检验得到结果如下： chisq test(x=c(l 22.47.44,9),p=c(6t3,2J).rescale p=T)Clu-squared test for give n probabilitiesda

15、ta c(122t 47, 44, 9)X-squared = 8.5946, df = 3t p-value = 0 0352根据软件所得结果0 OlvPvO 05,说明该组果蝇表型比例显著不符合预期理论比例1: 2: 3: 6二号瓶果蝇统计结果表型统计数量理论比例正常翅白眼261卷翅白眼662正常翅橙眼471卷翅橙眼842使用R软件进行*2检验得到结果如卜?： chisq test(x=c(84,47,66,26),p=c(2,1,2,1),rescale p=T)Chi-squared test for give n probabilitiesdata c(84, 47. 66, 26)

16、X-squared = 8.148, df= 3. p-value = 0 04305根据软件所得給果0 01P Av-c(70 5,70 5,66.75); datav-matnx(A2). chisq test(data.TURE),Pears ons Chi-squared test with Yates contin uity correcti on有在统计性.防止果蝇在救培养基.data: dataX-squared = 0.17394, df = 1, p-value = 0 6766根据伙件所得结果 P0 05?说明该组果蝇衣型比例与预期理论比例1:不显著。七、注总审项及实验总结：1. 挑选果蝇时，除了要注意雌雄外，还要注意性状，防出因果蝇混杂而引起实验结果失败.2. 接种换瓶过程中，注总不要麻醉过度，如果蝇翅和蝇体成45。角翘起，表明麻醉过度已死亡。只状的数星时.可以直接麻醉处死.3. 配制培养基时要将瓶中的水擦于