U大弹涂鱼肝脏蛋白质双向电泳技术的建立及优化._第1页
U大弹涂鱼肝脏蛋白质双向电泳技术的建立及优化._第2页
U大弹涂鱼肝脏蛋白质双向电泳技术的建立及优化._第3页
U大弹涂鱼肝脏蛋白质双向电泳技术的建立及优化._第4页
全文预览已结束

下载本文档

版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领

文档简介

1、大弹涂鱼肝脏蛋白质双向电泳技术的建立及优化昊灣氏丰明云叶代东.lft(TMkT 1iiS2ilM那电AXrtt比实* .Y*KttT人押It.HXSI白*QUA电徐的*WTn.farBP. Wi4itKKrttHW码豪廉柚和功 dt 2h HVftKAUA 电禅團希的外* mmh. wr?j#h a0Pfei*M.A-inr hfaMpH 胶条的虽用.ttU 一技术H D完It从雨絶今天的叢白隔 利实 Hr, AK7nMewft rrs 旋用并ju码r整列的硒舉海目前住m洋水产方面 的硏究如不名.HrWaihz5Utpr W.VK. tt 1KH( 4n/XMir/I foft lt 混I V

2、iMtrrnir* nv/7/irdtwc/ruwp* 的aiW、Q (Crfopbyc“d” M口的肖 IF l*X 及鮒 I /7*yiA/A4jrAxA 林“ml#AuS 的III 肉等进行 HU* 双向电 j*tt*G5MGftfflTWl: 但不同电沐时条件也 崗电播衆用大J徐f Boleophthalmu pzMzrx)MianiHisa 向电 tiMMW 大 t敷的口向电凍的各种忧化w庠竄不純茯阳好的牧果. 为向电idMitwiHi.通计时不 WWM*RA 电.ttffFrftsns PAGE方式耳的 时比实阶.建立r大并矗儼辭ik “向电汰塁*技术为 后纸大”渝倫肝軸甫理实貝般

3、倶”术条件和平什.也 为Kft的肝齡爱门质爼学研丸烬供參乌尢评涂 ft ( IMmphthjtJnw /MV7rjii/M/u I 划 F 胪 形 11 ( /Wrt/irwr* )% 押涼 fit 科 Bftink与仪817 *n (Mffl pirf pll grtdru. IPG) 0 条、二atMDWiwhmZlHTk 体质性电解 I BWr pH 5-8 )和也ttd Bio-iud;过*俺.抑肚索、rw油如横乙隈蛾弟购fl AMRESCO公吩3-(3-(IPKM 丙勒:屮氯摹丙卷(3(3Ybohmidopropyl) dimrthvlitm-cmio-1 -pmpanr *idph

4、a(Mtr. (-H AISl、二 羚 甲 甲烷TTri 叭 +SttlMED) ItW HEIL CH匕粼怜界1Hfin M t ltfr4Nn.E-ml Inmiwpu.AMMK.屮更双AMttW. H、三希IK、和巧qMUG-25O 袴刿自 BBI 公uh 低分fttS白标战.甲解和 上*.Tl烏速CUB高心机为Vfi Eppen-dorf公可. 尊电聚魚仪、険。电泳系统ntAUGS800和 PDO-h 分析白 B_Ri 公询,1.3 白样品的与庄取3份保存人刑徐收人加尙筋氮的 WR6W*中.砂成枪末伏快轴你取OJk与17釣 KK匀 4X:IMt23h *M 每半蚀HM讹匀一次.i200

5、0 r/mm處心40 mm取 上清浪;W 15000 r/mm 心60imnl上MA; 用 Bradford te ( 1976 尸曲定肝K2H*度.W*5个対比:裂解険I为R|f7M. ew 2* CHAPS4SH/R用前每 ml现fill DTT 0.0两 件电PMSF IOhL. EDTA 2L IOlL.抑钛K 10lLi fiMMtll 为BE7M . AW 2M . CH APS 4 % (w/v), Tm 40 mM.用 J?毎 ml现加 ET 0.01 TBP IOilL. RnHlMMf5iL PMSHOjiL. EDTA 21. ttt IOKL.IOiU1.4 KM电泳(

6、2- DE)1.4 1令一向等电t焦电泳4 IFF)丰要參考 BIO R ADPKO TEAS lEFcril电IK U作tSiU遇行J用mlAl相f制线性T胶条技頫比例与上惮壇冲液 (TwxM.HElt、hwM.WJW. 4%(wA)QiAfSUIT. 0.001% 漬酯童.02%)现匀.总上样25O.总上悻体fll I5OHU !EF. 主的力法衿电囊條序设2个对 比:卑电【为30V主动水化Mh、2S0Vtt 性KO-Sh. 5OOVttttO.5h. 4000、线性升 FK3h. WOOVtt速議|t20000Vkr 500V保持;等 电議廉!8庠II为50V主渤水化14h. 25OV线

7、性除址 I 5h.5OO Vttitttttt 1.5 h、45O(八跌件升乐6 h .4500 2500DV.hr. 500Y 保捋.ttx 橫限电 it 为50u3L 4电S为 on One Gel MctlMwi ( MSOG ): Mulli-Mfif* (Ml Owe Gel Methcxl ( MSOG ) 用在 SDS-PA(;Lftt2上同时道行二条我多第IPC胶条 K电泳主是为电涼的Sftftfa分 解事.I作*taT:胡备一块20血貝低;型血 切1.4.4-250%色采用婭禽的弓4斯亮矗法.20%的定 ik 色液(0.1 % (W/230.40鼻O/町*丙l10常(訂町冰恳

8、酸)您色2h然 后祀4色蔽(40 % W八)乙畔.10 * (/)冰E強)中 脫色.立全MR#*变为Xft.&l (w/v * flKtitft以伶扫榻图恃.I A3 談阳象分析采用G5U00n仪打ML PDQAU740闇像分 析枚件进抒分析透行atnsEAiftM. u胶匹比 Nocmalued V4umr位的变化来列麟覆白現点农达.的 变化。2结果与讨伦2.1 SMie方对IHM*白複取质的影an分别辑用取爱门样品.WlpHJ-10 的12条运行筝电处H用I进行实簸“色13.图31结采见陌一比are a和b发現賓箴1提歐僵白虞所得2 DEfflmA)BA点数少.农达低.并且大厦白 质在分戾

9、胶的低pWN成堆停附这有可ft肚离1廈蛋 fl.也可住呈蛊门质况淀所序成“而ffirtkBitt用裂划 n. sn/A明从堪多.说达断MumarftpH 分戾效果蛋白l9MMTha可以增DU企 白质样品的幣斜樽制轩器*门的障并H徒绸冲 IWpH的蛮化但加也引MTM子.会适成 IEF过輕W电(M丈电爪达彳、餌1诚0L在英*慄 羸过軽中左氏便用住桥和超长除肚时何町以解决盐廉 子*多的问% tMAiJK白裂駢池U Kfte好的裂 白WAiMftftM电注操ft的割一步.也是 灰再髙分麟車和AnKRdi的关步叭a 口相比 JfrTneHTBP.还 MUHTBP不希电倫第电时tt的TBP不仝ItDITP

10、i帯 动W此“性保捋着圮的还原! 从而MM9电魚过程中滋白的縞第件*- 2.2 WmmSloiPGttpHJ5 的 fiftrfSA i*Sil 的S2 7n*ffiuepKtBxnMnnB 图2旦不的是不同“电不同pHRUfl较 *t向电汰阳常的响.BCJEPJ-pHK度胶条 不同序所鮒图ML Wftff序II比1迭当増勵了 间.巌焦电压及总的*焦功cfflMtt明, 比Hffi幷nat白点的分uh度:和iw虔也明回壤 Cttore分別量同WftffFTlI不同PH悌度* 的电泳图谣冷pH胶*图谓的低度置白酬旦多 于Cffli#并从枪第也明星裁少存第件 尤为W l Mrthod)采用恋 Sl

11、-PAGERt MH进行一条 电療.主自电泳时不仪可以ig免由J MRWfi#引&的仪型. M11AA的起起專及有效性间时注阳ttT2-DEfflmj:i9人为修饰的am质点.曲大文搽 2-PE的复住和分講F也ftT2.M:的ififlh 3 MSOGHW敵I图是竹者用製酒配方II等电ttWitll. pHS-8的7cm R* MSOG方法分峭炖正常条件和偶 粉迫的大丼徐血所做口自电MISUI.艸对比样品的艮 白虞点HKK*A90*通过址一3进方払 同lJJKft色的动念变化更鲁親亍一敦,人为怖 的31白点降列最低.Mffft的处舁衣达盘白点也工 发UL iStn于M少兀用的效样力侨 髙实,

12、R时也M少了务动担廈时刪.3小结金*白Iftffl研克中.責门样品制备比収向电讹中 图itflfilt及版碼分俞结轧 同时.高亀复性.岛週和高分績球41:技术艮成 功的分厲厦杂的蛋白质段合钩的关储作石通过对 ML等电嚴初F和pH范9鋅条件的複索优化.W 出俺*升*白製K液中妙加40mMTrw10 IOi! TRP, 白样砒的质; i&IS长7cnpH3O IR;Kftl7wPH5IPG|R条的除盐肘何.焦底圧和功亭鏡St*改的横枚问題;并 HAA了gPAGE的力式.使用MSOGW序耒虞 凑少实*iIWrP作和环115-8的7cn纯性胶条.MSOC野序. 进荷収向电冰.絵铁色后.2DW町再列52

13、0 23fi 白点.址厨大电汰的彼术已墓車 %.鑫为后第大押分龟的肝!*门債绍学研究般供 技术保*;考文欹:|1) Fetmam S R. WUU M H, HedMtmwd iMrtawV) TrtwU 3 BUy. IW7. 7 (4 Id 173.12) anWr B A. Xeverev. I. Btwn H A.Ha) Ophomb fwaein MhXibty J lw damrmwmJ 切 rlMtMhamae /hu um 7tw Hinwaml ktfqpknmm.J M Cbm. IW 2MMI0 4007-4021.HlEh IL Wrni PG.et aLkuvbrtn

14、r (urw ia Mamabih* pHpheripU. awtAa ok(w and w apfdraQI (JU MMex lA4:(S| MrahraMl K lUaidwt A L tlhataMu* JmjImK S.f al l*Wi andMh4a/ Uu(nl0*w with wKwrym IJtIJIToucm51眄 IUI MW|5 Sidb & VMin B Prokop s4yti (/ Pmi* 4r fMi (Vifwmrr fWMttMl mJ) Aaimd R*fNwMtMn Snmrr,XW.叫4 4) 2B7 297P) MytoMhsUnti S. Xa

15、lhoM W R. HfeiaUMAa M al. (xm jwrtw (VUnnaMni eMraaa tf male md kwmk Prwawi ufrco (ArafMwv F SeitM. M. 111(2-4):)61. Ml.|*| W* Y J. B*Rf S Y. Pti. X X Smn ocMt rwtptMe 1 APRPteiZ practmr (/ 7k | uwmJ|. FUi A SUlKwh 2RO4. |g): 91- MQw *er.r.*44W. 20Wv Wi4r 42S- 4HIO| TJZ.ZDY.avwLtfal Cttn(wie7、一4 ari

16、d nacnpewixn aa4 pcWmniroT 4 mwrlepmiKitt fra |w iHwte, Sthifcma clwMai L and H)yn0A 4t liira 5 如1M F4mb Chim. 2007. )| 6MM*di云訐ir冷化Nt欽化贰件的用生沖ie n)a-Bivm praMeMwimivw (rrtv-4mrRaimd IW. KM- Sk “0- 661(16) OwhKi J H Dm M J. 4,t d Ekrtrwww. IW 1205-1211.EsUblishment and Optimization of 2-DE Technique

17、in LiverProteome of Boleophthalnius pectiniroitrisHaimgWu Min-Yunir ShuYkmYo Dr-Wei Ji(l4(r Srtrnrr and BMtrrhmlnfy Academy. Smgtx Univrraty. Ningbo 315211. ChiBt)Abstract: In liu pafvr, iW 2-DE rdalrd lerWAyT ift iivet pnMrome of AaJtteAAW /wWMrd ramtrwfd td访rnafntm Mwwvi mat zirartoca ib)dk iacHwlrk fcnaMg h*nrwm and the f / SO-PACE IV midta 4imd tlut: Il maU Bi6rntlv MWW Ihr rmliMiui 2-D pfi/ak Wlrr Tru Mid TBP

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

评论

0/150

提交评论