1.1DNA重组技术的基本工具知识点_第1页
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文档简介

1、1.1DNA重组技术的基本工具1、( a)基因工程的诞生(一)基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望, 进行严格的设计,通过技术,赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在 水平上进行设计和施工的,又叫做 。2、( a)基因工程的原理及技术原理:基因重组技术:(一)基因工程的基本工具1“分子手术刀” 一一(1) 来源:主要是从 中分离纯化出来的。(2) 功能:能够识别双链DNA分子的某种的核苷酸序列,并且使每一条链中部位的两个核苷酸之间的断开,因此具有性。(3)结果:经限制酶切割产生的 DNA片段末端通常有两种形式: 和。2. “分子缝合针” 一一两种

2、DNA连接酶(E- coliDNA连接酶和T4DNA连接酶)的比较: 相同点:都缝合键。 区别:E- coliDNA连接酶来源于 ,只能将双链DNA片段互补的.之间的磷酸二酯键连接起来;而 T4DNA连接酶能缝合,但连接平末端的之间的效率较。与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接的末端,形成磷酸二酯键。3. “分子运输车” 一一(1) 载体具备的条件:能在受体细胞中。具有限制酶切点,供外源 DNA片段插入。具有,供重组DNA的鉴定和选择。(2) 最常用的载体是 ,它是一种裸露的、结构简单的、独立于,并具有 的双链DNA分子。(

3、3)其它载体:.知识网络概念:又叫DNA重组技术,是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外DNA重组和转基因等技术, 赋予生物以新的遗传特性,创造出冬:人4 1 1 更符合人们需要的新的生物类型和生物产品基因工程(来源:主要从原核生物分离纯f限制性核酸内切酶(限制酶) 作用:识别双链 DNA中某种特 定的核苷酸序列,并使 特定部位的磷酸二酯键 断开结果:产生黏性末端或平末端(“分子手术刀”)I吐mi阳基本工 具/、DNA连接酶E coliDNA 连接酶 7-“分子缝合针” V来源:大肠杆菌作用:连接黏性末端T4 DNA连接酶来源:T4噬菌体作用:可连接两种末端常用载体:质粒Y八能在受体细胞中复制并稳定

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