恶性嗜铬细胞瘤相关标记物的研究进展

1、DOC格式论文，方便您的复制修改删减恶性嗜铬细胞瘤相关标记物的研究进展（作者：单位：邮编：）【关键词】恶性良、恶性嗜铬细胞瘤的细胞形态学差异无显著性，二者的临床鉴别主要依靠周围组织明显浸润和远处非嗜铬组织的转移，缺乏早期诊断意义。近十年来，许多学者致力于恶性嗜铬细胞瘤相关标记物的研 究并取得了较大成绩，分类综述如下。1细胞周期蛋白抗体：MIB-1抗原性Ki-67蛋白是一种具有蛋白酶性质的碱性蛋白，是维持细胞周期的绝对必需物质，表达于 G 1、S、G 2、M期的细胞核 中。Ki-67核染色与许多癌的生物侵袭性密切相关。MIB-1是一种单克隆抗体，分子量为275kD,能够识别Ki-67抗原，可作为

2、反映细胞 增殖程度的标记物，因而被引入嗜铬细胞瘤良恶性的研究。Clark应用多元素逻辑回归方法分析临床标本后发现，MIB-1与恶性嗜铬细胞瘤显著相关（P=0.005），如果MIB-1标记指数超过3%则预测恶性 嗜铬细胞瘤的临床意义是：特异性100%敏感性50% : 1。Brown 也发现MIB-1在恶性嗜铬细胞瘤中的染色阳性率为 50%在良性中的 染色全部为阴性（P0.01），说明MIB-1可用于嗜铬细胞瘤的恶性预测:2。Gupta的研究提示恶性嗜铬细胞瘤 MIB-1的过度表达比良性者常见（P=0.019）: 3 。Ohji对比了良恶性嗜铬细胞瘤的细胞MIB-1评分，恶性平均5 （118） %

3、 良性平均1 （0.53） % 恶性 MIB-1评分明显高于良性，得出较高的MIB-1分值高度提示嗜铬细胞恶性行为的结论 4，与Kumaki的意见相似 5。2生长因子：血管内皮生长因子（VEGF血管形成被认为是早期肿瘤形成的重要前提，而且有利于肿瘤的进展和转移。VEGF是引起血管内皮细胞有丝分裂和趋化反应的 强力介质，因此在肿瘤组织的血管形成中发挥重要作用，从而与肿瘤的生长、浸润和转移密切相关。Kolomecki对比了手术前后良、恶性 肾上腺肿瘤患者的血VEGF浓度，发现术前良恶性肿瘤血 VEGF水平均 增高，但是恶性患者血VEGF水平显著高于良性患者，提示VEGF可作 为预测恶性嗜铬细胞瘤的

4、标记物；肿瘤切除后，血 VEGF水平显著下 降，因而又可监测肿瘤是否复发6 。Zielke研究了良恶性嗜铬细胞瘤标本的VEGF表达和血管表面密度，证实在恶性嗜铬细胞瘤中 两者显著增高，恶性：良性分别是37.1%： 20.7%和26.2%： 13.3%:7 。Salmenkivi对良、恶性嗜铬细胞瘤标本进行免疫组化染色， 发现所有恶性肿瘤显示 VEGF中度或强阳性，绝大多数良性肿瘤染色阴性或弱阳性，正常肾上腺髓质全部为阴性，提示当VEGF高表达时， 高度怀疑嗜铬细胞瘤为恶性8。3神经生物类：S-100蛋白、ACTH NSE CrgS-100蛋白是一种可溶性酸性蛋白，主要存在于肾上腺髓质、 神经组

5、织、垂体、颈动脉体和少数间叶组织中，用于恶性黑色素瘤、 嗜铬细胞瘤、神经母细胞瘤等的诊断和鉴别诊断。Van-der-Harst在评估嗜铬细胞瘤的潜在恶性时，研究了S-100阳性支持细胞的密度，发现S-100阳性支持细胞的缺失与恶性嗜铬细胞瘤显著相关 (P0.0005),因此说明S-100阳性支持细胞的缺失是预测恶性嗜铬细 胞瘤的阴性标记物9。在Tatic的试验中，良性嗜铬细胞瘤中S-100阳性支持细胞的存在率高，占90%29/32 )，而恶性肿瘤中S-100 阳性支持细胞往往缺失，得出了与Van-der-Harst相似的结论:10。嗜铬素(CrgA)是一种嗜铬颗粒递质，临床上常用于嗜铬细 胞瘤

6、的诊断。Rao : 11致力于CrgA在鉴别良恶性嗜铬细胞瘤方面 的意义研究，发现良性肿瘤血 CrgA平均浓度为188 40.5ng/ml，恶 性肿瘤的血CrgA平均浓度为2932士 960ng/ml，两者的差异有显著性(P=0.0003)，而且良性肿瘤切除后血 CrgA基本恢复正常，但是恶性 肿瘤切除后血CrgA不能恢复正常，说明血CrgA浓度具有提示良恶性嗜铬细胞瘤的临床意义。除垂体外，嗜铬细胞瘤细胞也能合成ACTH通过研究不同种类嗜铬细胞瘤免疫组化时发现，恶性肿瘤ACTH过度表达显著高于良性，家族性嗜铬细胞瘤高于散发性。NSE阳性表达与良性嗜铬细胞 瘤呈正相关 12。由此推论，高度表达的

7、 ACTH提示恶性，NSE 表达越强烈，越能否定恶性。4细胞凋亡相关基因：P53、bcl-2和RbP53既是细胞凋亡中的调控因子，也是一种抑癌基因，在50% 以上的恶性肿瘤中此基因皆有突变。 正常细胞中P53蛋白水平低，随 着DNA破坏和细胞损伤信号的增加而升高，因此，P53阳性说明细胞预后不良。Yoshimoto应用PCR-SSC技术研究了嗜铬细胞瘤的 P53 基因外显子4-9的突变情况，发现在恶性嗜铬细胞瘤中P53基因突变 的发生率相对较高，提示P53突变在恶性嗜铬细胞瘤的形成中起重要 作用，可作为预测恶性的参考指标13 。De-Krijger研究了 29例恶性和85例良性嗜铬细胞瘤的P5

8、3,结果显示恶性肿瘤的P53阳 性率显著增高（P=0.042），有助于预测嗜铬细胞瘤的恶性行为14。bcl-2是B细胞淋巴瘤-2的缩写，是一种原癌基因，也是细 胞凋亡的一种抑制因子，参与细胞凋亡的调控。正常和增生的滤泡多 为阴性，肿瘤性滤泡多为阳性。在区别良恶性嗜铬细胞瘤的研究中，发现恶性嗜铬细胞瘤bcl-2的表达显著高于良性肿瘤（P=0.037）,提 示bcl-2有助于预测恶性嗜铬细胞瘤，如果结合P53作为共同标记物， 则预测恶性嗜铬细胞瘤的能力更强（P=0.004）: 14。视网膜母细胞瘤（Rb）基因蛋白广泛存在于神经内分泌系统中，良性嗜铬细胞瘤阳性表达，恶性肿瘤不表达或弱表达，P=0.0

9、01,说明不表达RB基因蛋白的嗜铬细胞瘤具有恶性倾向3。5染色体及相关合成酶异常：染色体6q和17p、拓扑异构酶Ha嗜铬细胞瘤的形成与染色体和基因的突变和相关合成酶的异常有关，已得到某些学者的研究，但是良恶性嗜铬细胞瘤之间染色 体的对比研究较少。Dannenberg 15应用基因杂交的技术分析了 19例良性和10例恶性嗜铬细胞瘤的基因，发现恶性肿瘤中染色体6q 的缺失率高达60%良性为21%两者的差异有显著性（P=0.0368）;恶性肿瘤染色体17p的缺失率是50%良性为21%提示染色体6q和 17p的缺失意味着恶性嗜铬细胞瘤的可能性大。Gupta :3应用免疫组化方法对比研究了 30例良性和

10、20例恶性嗜铬细胞瘤的拓扑异构酶Ha表达，恶性病例拓扑异构酶Ha 的过度表达显著高于良性病例，P=0.012，说明此酶的过度表达可用 于嗜铬细胞瘤恶性行为的预测。6结构蛋白：抑制素/激活素B B亚单位抑制素和激活素是两种糖蛋白，有不同的亚单位组成。应用 免疫组化方法显示，抑制素/激活素B B亚单位在正常肾上腺髓质中 强烈表达，皮质不表达。大部分良性嗜铬细胞瘤（27/30 ）强或中度 阳性，恶性肿瘤阴性或弱阳性，两者差异有显著性。因此，抑制素/激活素B B亚单位不表达的嗜铬细胞瘤往往是恶性的16。7信号递质:肝素酶-1肿瘤细胞只有降解细胞外基质才能穿透组织屏障，发生转移。硫酸乙酰肝素蛋白多糖是细

11、胞外基质的主要成分。肝素酶-1是一种糖苷内酶，特异性降解硫酸乙酰肝素蛋白多糖。Quiros : 17研 究了肝素酶-1在嗜铬细胞瘤中的表达。应用原位杂交方法，恶性嗜 铬细胞瘤的表达率是50%良性为21% P=0.11。应用免疫组化方法， 恶性嗜铬细胞瘤的表达率是 80%良性为32% P=0.01。同时应用上 述两种方法，所有恶性肿瘤均阳性表达，37%的良性肿 瘤阳性，P=0.001。说明恶性嗜铬细胞瘤较高地表达肝素酶 -1，有助于诊断恶 性嗜铬细胞瘤，预测其浸润性。虽然上述的标记物具有鉴别良恶性嗜铬细胞瘤的提示意义, 但是它们的敏感性和特异性普遍较低，缺乏如PSA那样的诊断前列腺 癌的理想标记

12、物。因此，在将来的研究中一方面可联合应用多种标记 物提高诊断恶性嗜铬细胞瘤的临床价值，另一方面需要继续努力寻找 高敏的瘤标。参考文献1 Clark MR ， Weya nt RJ， Wats on CG, et al.Prog no Stic markers in pheochromocytoma.Hum-Pathol，1998, 29( 5) :522-526.2 Brow n HM Komorowski RA Wils on SD, et al.Predict ingmetastasis of pheochromocytomas using DNA flow cytometry and i

13、mmunohistoche-mical markers of cell proliferation:Apositivecorrelati onbetwee n MIB-1stai ningand malig nant tumorbehavior.Cancer ， 1999，86 (8):1583-1589.3 Gupta D, ShidhamV Holden J，et al.Prognosticvalueof immuno his-tochemical expressi on of topoisomerase alphaII，MIB-1， p53， E-cadherin ， retinobla

14、stoma gene protein product，and HER-2/neu in a-dre nal andextra-adre nalpheochromocytomas.Appl-Immunohis-tochem-Mol-Morphol ，2000，8(4) :267-274.4 Ohji H, Sasagawa I , Iciyanagi O, et al.Tumor angiogenesis and Ki-67expression in pheochromocytoma.BJU-lnt , 2001, 87 (4) :381-385.5 Kumaki N, Kajiwara H ,

15、 Kameyama , et al.Predictionof malignant behavior of pheochromocytomas and paragangliomas using immunohisto-chemical thchniques.Endocr-Pathol, 2002,13 (2) :149-156.6 Kolomecki K , Stepien H , Bartos M , et al.Usefulnessof VEGF MMP-2 MMP-3and TIMP-2serum levelevaluationinpatients with a-drenal tumors

16、.Endocr-Regul , 2001 , 35( 1) :9-16.7 Zielke A, Middeke M, Hoffmann S , et al.VEGF-mediated angiogen-esis of human pheochromocytomas is associated to malig nancy and in-habited by an ti-VEGF an tibodies in experimental tumors.Surgery , 2002 , 132 (6) :1056-1063.8 Salmenkivi K , Heikkila P , Liu J ,

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