荧光定量PCR仪使用说明

1、7500荧光定量PCR仪使用说明注意事项:按压此处注：关闭仪器托盘时，应按一个角度推压托盘的右侧。实验过程必须戴干净的一次性乳胶手套 进行操作。PCR反应所用的96孔板、8联管或单管必须为ABI7500专用，凸盖PCR管禁止使用。 使用8联管两侧需用空管支撑，使用单管四角需用空管支撑，以防止板槽受力不均。实验数据用光盘刻录，禁止 U盘拷取，数据可暂存于本机电脑硬盘中，各实验室 D盘中有 指定文件夹，中心外部人员数据存于 FUWU文件夹下的子文件夹中。操作步骤?开机依次打开电脑显示屏、主机，输入开机密码“7500”待电脑启动稳定后，按压 7500仪器电源按扭，等待仪 器启动（约30 s）。当仪器

2、只显示Power状态指 示灯时，方可按压托盘以打 开它。放入反应板（以下过程按字母顺序a- q进行操作）?创建反应板文件双击电脑桌面上SDS软件图标打开SDS软件;在对话框中选择 Create New Document，或选择菜单栏 File New；XNew Docuinnent Wizard padcr: |AdmmistratDra.从 Assay下拉列表中选择反应板类型反应板文件类型有以下几种:1.2.3.4.Relative Quantification （ddCt） Plate （相对定 量）Absolute Quantification （Standard Curve）（绝对定量

3、，标准曲线）Allelic Discrimination （等位基因鉴别）Plus/Minus （阳性/阴性实验）b.为反应板文件命名 c.单击 Nextd.选择要添加到反应板文件的探针（引物）， 单击Add添加选中探 针e.如果在列表中未列出 所需探针，请单击NewDetector创建新探针4 f.单击 Next?为每个反应孔指定探针和任务hgkg. 选取探针相同的反应孔h. 点击反应孔对应的探针。i. 单击Task栏的下边指定探 针任务。j. 选择Use （使用）。k. 单击Finish （完成）。?为反应孔设置样品名I.选取反应孔，直接输入 相应样品名（也可右键， 调出反 Well In

4、spector 对 话框，在 Sample Name 中进行修改）r* Jr” ： ViiLQ-i-iarliF?设定PCR循环参数、运行程序J tiM t JlJBtrnlZJL医E卿InstSvkgft-rnrt stnrtg 750C SymteF S XftBE - PlalsL 洛lardedp 日1令 过力萨 工gk Jnstrjrnnt Anlyis Wndow HlpELiltM TLlwm.选择 Instrument 选项卡，默认条件下显示标准PCR条件，可跟据实 验具体情况修改；n.单击 Add DissociationStage添加溶解曲线循环；o.修改PCR反应体积；p.将反应板文件保存至指定路径。q.点击Start运行程序?结束实验1. 实验结束后关闭软件。（确认反应板文件数据已保存）2. 打开拖盘，将反应板取出，关闭拖盘。3. 按下7500仪器电源开关关闭机器。4. 关