吉林大学核医学2体外分析技术课件

1、吉林大学核医学2-体外分析技术,吉林大学中日联谊医院 核医学科,体外分析技术In Vitro Analysis,吉林大学核医学2-体外分析技术,体内超微量生物活性物质定量分析技术,利用核素及其标记物诊断和治疗疾病的临床医学学科。,吉林大学核医学2-体外分析技术,待 测 物 质 浓 度 与 检 测 手 段,临床化学分析,pg/mL,ng/mL,mg/mL,mg/mL,g/L,免疫分析,治疗药物,甲状腺激素,性激素,变态反应,肿瘤标记物,传染性疾病,维生素,血清蛋白,常量,微量,超微量,吉林大学核医学2-体外分析技术,体外分析技术（in vitro analysis techniques） 泛指以

2、离体组织、血液或体液等作为生物样本，在人体外进行的、分析样本中成分或其含量的检测技术。 核医学中指有别于体内进行的放射性核素显像和核素治疗，在体外用放射性核素标记配体（ligand）为示踪剂，以结合反应为基础，在试管内或反应杯中进行的检测微量生物活性物质的免疫标记技术。,定义,吉林大学核医学2-体外分析技术,分类,标记物,反应机制,吉林大学核医学2-体外分析技术,4,概述,1,2,3,5,放射免疫分析,免疫放射分析,非放射性标记免疫分析,体外分析的临床应用,主要内容,吉林大学核医学2-体外分析技术,7,核医学中建立最早、应用最广泛的体外放射分析技术。 充分利用了放射性测定的高灵敏度和免疫反应的

3、高特异性的优点。 特点： 灵敏度高，可分析10-910-18g的微量生物活性物质。 操作简便、成本低。血清、血浆、体液等样本不加提纯就可直接测量。,第二节 放射免疫分析技术（radioimmunoassay, RIA）,吉林大学核医学2-体外分析技术,Berson 反应时间短，20分钟内可完成测定； 试剂稳定性好，25可保持1年以上。,吉林大学核医学2-体外分析技术,80,不同品牌化学发光分析仪,Roche 601：三联吡啶钌,Abbott i2000：吖啶酯,Siemens XP：吖啶酯,Beckman：金刚烷,吉林大学核医学2-体外分析技术,时间分辨荧光免疫分析技术（time-resolv

4、ed fluoroimmunoassay, TRFIA）是一种特殊的荧光分析法，其原理是将能发荧光的稀土元素（即镧系元素）原子标记抗原或抗体，通过测定荧光量，定性或定量分析抗原或抗体，也可标记蛋白质、多肽、激素、核酸探针等。,81,三、时间分辨荧光免疫分析技术,吉林大学核医学2-体外分析技术,基本原理：镧系元素在紫外线的激发下可产生持续一定时间、一定光峰的荧光，而其他非特异荧光寿命短，待其他光子衰减后探测特定波长的特异性荧光光子就可以检测复合物的量。,82,荧光衰退时间 铕：730000 ns 钐：50000 ns 一般荧光物质：10 ns,吉林大学核医学2-体外分析技术,83,时间分辨 荧光

5、免疫分析仪,吉林大学核医学2-体外分析技术,TRFIA的特点,优点：特异性强、稳定性好、适用范围宽、样品用量少、自动化高、且速度快。,缺点：仪器主要靠进口，试剂品种少，虽然国产的仪器已研制成功，试剂盒可兼容，但有待进一步完善。,吉林大学核医学2-体外分析技术,胶体金标记分析技术（Colloidal-gold immunoassay, CGIA）是以胶体金为标记物, 应用于免疫组织化学或免疫分析中，对抗原或抗体物质进行定位、定性乃至定量研究的标记技术, 它已成为继放射性核素、荧光素和酶等标记技术之后的又一种新的标记技术。,85,四、胶体金标记分析技术,吉林大学核医学2-体外分析技术,86,胶体金

6、（Colloidal gold）,氯金酸(HAuCl4)在还原剂作用下，金离子被还原后聚合成直径1150nm 的金颗粒, 由于静电作用，金颗粒之间相互排斥而悬浮成为一种稳定的胶体状态，形成带负电的疏水胶溶液, 故称胶体金。 胶体金标记实际上就是蛋白质等高分子物质被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。因胶体金溶液中的金离子所聚合形成的金颗粒直经小，仅以纳米计（1150nm），故又称纳米金。因此，CGIA又称为纳米金标记技术。,吉林大学核医学2-体外分析技术,87,胶体金试纸条示意图,有4个组分： 样品垫：为吸水滤纸。 胶体金垫：为玻璃纤维膜，膜上吸附着干燥的金标抗体。 硝酸纤维素膜：膜上包被着抗原或

7、抗体条带和能与标记物直接起反应的质控物条带（检测带）。 吸水垫：为吸水滤纸。,吉林大学核医学2-体外分析技术,胶体金标记分析技术的优缺点,吉林大学核医学2-体外分析技术,POCT,POCT 是Point of Care Testing 的简称，是体外诊断（IVD） 行业的子行业。通过简化设计和技术创新，POCT实现便捷、快速在患者身边现场检查，快速取得诊断结果。 与其他体外诊断产品相比，POCT产品具有三个方面的鲜明特色：检测时间，POCT产品缩短了从样本采集、检测到结果报告的检测周期；检测空间，POCT 属于在被检测对象身边的检测；检测的操作者，POCT 的操作者可以是非专业检验师，甚至是被

8、检测对象本人。 由于POCT仪器便携、操作简便、结果及时准确等一系列优点，POCT 产品的应用极为广泛。从检测项目来分，主要集中在血糖检测、血气和电解质分析、快速血凝检测、心脏标志物快速诊断、药物滥用筛检、尿液分析、干式生化检测、怀孕测试、粪便潜血血液分析、食品病原体筛查、血红蛋白检测、传染病检测、甘油三酯和胆固醇等血脂项目的检测等13 大项目。特别是对重症病人，POCT应用已深入到了到了检测生理功能的方方面面。,吉林大学核医学2-体外分析技术,90,五、放免和非放免标记分析技术性能比较,吉林大学核医学2-体外分析技术,非放射免疫分析的缺点,仪器价格昂贵（EIA除外） 配套药盒少、普及困难，只

9、在大医院应用。,吉林大学核医学2-体外分析技术,吉林大学核医学2-体外分析技术,第五节 体外分析的临床应用,体外标记免疫分析技术应用范围十分广泛，其应用可概括以下几方面： 蛋白质和肽类激素：肌红蛋白，白蛋白、糖蛋白，免疫球蛋白等 ；甲状腺激素、甲状旁腺激素、垂体激素、性激素、肾上腺激素、心钠素等。 肿瘤标志物：AFP、CEA、CA系列等。 维生素类：叶酸、维生素B12、维生素D等 药物类：地高辛、苯巴比妥等 半抗原、病原体抗原,吉林大学核医学2-体外分析技术,常规开展的检测项目,吉林大学核医学2-体外分析技术,甲状腺检测,吉林大学核医学2-体外分析技术,甲状腺是最大的内分泌腺体，生产分泌甲状腺

10、素、参与能量代谢。T4（95）和T3（5）。在体内T4可转化形成T3。 循环中大部分T4、T3因与甲状腺结合蛋白结合而无生物活性。极少数未结合的游离型激素具有极强的生物活性，尤其是FT3。,FT3T3 FT4T4,甲状腺,垂体前叶,下丘脑,吉林大学核医学2-体外分析技术, 发病率不断上升(人群发病率9.9%) 饮食和其他生活习惯的改变 精神压力的变化 平均期望寿命的提高 检测的灵敏度不断上升 甲状腺疾病与其他疾病密切相关,甲状腺疾病（常见病）,甲状腺功能性、炎症性、免疫性、占位性疾病,吉林大学核医学2-体外分析技术,在中国每15人中即存在1位甲减患者！全世界有近98%的甲减患者并不知道自己已经

11、患病，甲状腺疾病在女性和老年人中更常见 症状通常缓慢出现不引人注意，甲状腺疾病常被误诊为心脏病、抑郁月经问题绝经或者高脂血症。 美国最近的一项研究表明 “ 9.9%的人有甲状腺异常而绝大部分都被忽视 。”甲状腺疾病很常见不易发现且可能导致不良的后果 .。,甲状腺疾病 依赖“实验室检测”而诊断的疾病,检测体系的性能直接关系诊断的准确性,吉林大学核医学2-体外分析技术,甲状腺检测菜单, 甲状腺功能 甲状腺自身抗体检测 甲状腺癌监测, Free T3（游离T3） Free T4 （游离T4） Total T3 （总T3） Total T4（总T4） TSH（促甲状腺激素） TgAb （甲状腺球蛋白抗

12、体） TPOAb（甲状腺过氧化物酶抗体） TRAb （促甲状腺受体抗体） Tg（甲状腺球蛋白） PTH（甲状旁腺素） CT（降钙素）,吉林大学核医学2-体外分析技术,甲状腺素 甲状腺素是在甲状腺滤泡内由酪氨酸碘化生成,T3：T4脱碘 35%,甲状腺合成 65%。99.6%与TBG 结合。 FT3 0.3 %,有活性。,甲状腺素由T4、T3、FT3、FT4组成 ，由甲状腺合成并分泌入血。FT3 、FT4是有生物活性的激素；T3、T4是甲状腺素的储存形式、测定血清T4、T3、FT3、FT4含量用于判断甲状腺的功能。甲状腺素参与机体的能量代谢。,吉林大学核医学2-体外分析技术,超灵敏促甲状腺素（sT

13、SH-first）,甲 减,亚 临 床 甲 亢,严 重 Graves 病,4.0 3.0 2.5 1.0 0.5 0.4 0.1 0.01,轻 度 Graves 病,甲 减 风 险,甲 减 治 疗,妊 娠 上 限,低危DTC治疗,高危DTC治疗,甲 亢 风 险,TSH是反应甲状腺功能变化最敏感的指标，TSH灵敏度对检测至关重要。,吉林大学核医学2-体外分析技术,甲状腺自身抗体,甲状腺抗体是指由于自身免疫紊乱产生的针对甲状腺某些成分的免疫球蛋白。 临床主要分为两大类： 针对甲状腺细胞内容物的抗体 甲状腺球蛋白抗体（TgAb） 甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb） 针对甲状腺细胞表面TSH受体的抗体

14、 TSH受体抗体（TRAb）,吉林大学核医学2-体外分析技术,甲状腺球蛋白抗体、甲状腺过氧化物酶抗体,甲状腺球蛋白抗体（TgAb)和甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb)，是由于甲状腺细胞受损，胞浆内的“甲状腺球蛋白”及“过氧化物酶（合成甲状腺激素的关键酶）”溢入血液刺激机体而产生的，是自身免疫性甲状腺炎的标志性抗体，其水平升高表明甲状腺组织处于免疫性炎症活跃状态。 TPOAb与TGAb的临床意义相同，但TPOAb无论是敏感性还是特异性都要优于TGAb，是诊断甲状腺自身免疫性疾病的首选指标。为了提高检出率，临床通常采取两种抗体联合检测。,吉林大学核医学2-体外分析技术,甲状腺球蛋白抗体、甲状腺过氧

15、化物酶抗体,临床意义 病因诊断：此类抗体是诊断自身免疫甲状腺疾病（AITD）的主要依据，显著升高（强阳性）主要见于慢性淋巴细胞性甲状腺炎（桥本氏甲状腺炎）患者，中等程度升高常见于Graves病；还可用于AITD与非AITD的鉴别诊断，例如，原发性甲减与继发性甲减的鉴别，前者TPOAb、TgAb均阳性，后者则呈阴性。 疗效观察：Graves病患者经治疗后TPOAb及TgAb转阴或滴度下降提示疗效较好；如果抗体持续阳性且滴度较高，说明效果不好，停药后病情容易复发。 预后判断：TPOAb、TgAb升高，提示患者将来发生甲状腺功能减退的风险增加。 TgAb还可作为分化型甲状腺癌（DTC）的监测指标。正

16、常情况下，分化型甲状腺癌患者TgAb水平会在根治术后逐渐降低，并在14年内转阴，如果TgAb水平再次升高，往往提示肿瘤复发。,吉林大学核医学2-体外分析技术,TSH受体抗体（TRAb）,体液免疫B淋巴细胞产生的一类针对TSH受体的甲状腺特异免疫球蛋白 甲状腺刺激抗体(TSAb)：与甲状腺滤泡膜上的TSH受体结合，刺激甲状腺肿大，增强其功能活性，是导致Graves病（毒性弥漫性甲状腺肿）的主要病因。 TSH刺激阻断抗体(TSBAb)：与TSH受体结合后，可抑制甲状腺功能，引起甲低。,吉林大学核医学2-体外分析技术,TSH受体抗体（TRAb）,临床意义 TRAb对于Graves病的诊断、治疗以及预

17、后评估具有重要价值。 Graves病患者TRAb阳性率可达95%以上，故TRAb阳性可以作为Graves病的诊断依据，临床也常用于Graves病与其他甲状腺病的鉴别。Graves病患者经过治疗甲功恢复正常后，如果TRAb（指刺激性抗体，即TSAb）也随之转为阴性，则停药后复发的可能性小；若药物治疗后TRAb仍持续阳性，则说明治疗效果欠佳，停药后复发的可能性大。 对患有Graves 病的孕妇检测TRAb，有助于预测新生儿甲亢。TRAb能够通过胎盘，刺激胎儿甲状腺，引起新生儿一过性甲亢（发生率12%）。 有助于甲功正常的Graves眼病的诊断。临床上有些突眼病人，虽然甲状腺功能正常，但TRAb强阳

18、性，这种情况同样可以诊断为Graves眼病。 TRAb在甲减和自身免疫性甲状腺炎患者也可出现阳性，检测TRAb有助于上述疾病的病因学诊断。,吉林大学核医学2-体外分析技术, Tg是甲状腺合成的基质，正常情况下，外周血循环中含量极少，只有当甲状腺细胞大量破坏时才会从甲状腺细胞中释放入血。 对于甲状腺癌的治疗后监测极其重要。 在甲状腺炎中可以增高。,甲状腺球蛋白,吉林大学核医学2-体外分析技术,甲状旁腺素（PTH） 由甲状旁腺主细胞合成和分泌，和降钙素相互作用以维持血钙水平的稳定性，血钙升高抑制PTH的分泌，血钙降低则促进PTH的分泌。 PTH 原、继发甲旁亢 肾性骨病 异位性PTH分泌瘤 PTH

19、 非甲状旁腺的恶性肿瘤和维生素D中毒引起的高钙血症 甲旁腺功能减退 特发性甲旁腺机能低下 甲旁腺损伤,降钙素（CT） 由甲状腺滤泡旁C细胞分泌的，主要功能是抑制破骨细胞介导的骨质吸收。 CT 甲状腺髓样癌的诊断 继发性甲状旁腺机能亢进，是CT分泌过多所致 异位CT的分泌，其它部位的肿瘤如肺燕麦样细胞癌 高胃泌素血症、胰腺 CT 甲状腺缺如 手术切除后,吉林大学核医学2-体外分析技术,肿 瘤 标志物,吉林大学核医学2-体外分析技术,恶性肿瘤诊断方法,吉林大学核医学2-体外分析技术,肿瘤标志物（Tumor Marker，TM）的定义,存在于肿瘤细胞内或细胞膜表面物质，由肿瘤细胞表达分泌入血液等组织

20、。 由机体对肿瘤发生免疫反应而产生并进入体液或组织中的物质。 这两类物质都可以被临床检测到，并用于指导肿瘤的诊断和治疗。 敏感度（sensitivity）：肿瘤患者检测结果为正确阳性的百分比。 特异度（specificity）：健康的或良性病变的个体检测结果为阴性的百分比。,吉林大学核医学2-体外分析技术,肿瘤标志物升高早于临床检测,吉林大学核医学2-体外分析技术,肿瘤标志物的临床应用, 高危人群恶性肿瘤早期检测 肿瘤患者的初步诊断 预后判断 治疗监测 肿瘤复发的早期监测 由于TM特异性不强，个体差异大，应联合检测TM。 采用患者个体基础或达疗效后的水平动态观察变化更具意义。 同一种检测方法，

21、同一台仪器检验结果才有可比性；不同方法及仪器的结果比较只能看大体趋势。术前、治疗前的检验结果对后续治疗是必须的。,吉林大学核医学2-体外分析技术,吉林大学核医学2-体外分析技术,肿 瘤 标 志 物 检 测 常 用 组 套,1、肿瘤标志物(16项)： AFP、CEA、CA50、CA242、 Ferr、2-M、NSE,、SCC、Cyfra21-1、CA724、CA199、 CA125、CA153、PSA、f PSA、 Pro-GRP。 2、肿瘤标志物(15项、男)：AFP、CEA、CA50、CA242、 Ferr、2-M、NSE,、SCC、Cyfra21-1、CA724、CA199、 CA125、

22、PSA 、f PSA、 Pro-GRP。 3、肿瘤标志物(14项、女)：AFP、CEA、CA50、CA242、 Ferr、2-M、NSE,、SCC、Cyfra2-1、CA724、CA199、 CA125、CA153、 Pro-GRP。 4、肿瘤五项：AFP、CEA、CA50、 Ferr、2-M。 5、肿瘤标志物（甲状腺）：Tg、Anti-Tg、 PTH、CT、CEA。 6、肿瘤标志物（乳腺）：CEA、CA153。 7、肿瘤标志物（肺）：CEA、NSE、CA50、SCC、Cyfra21-1、CA125、 Pro-GRP。 8、肿瘤标志物（消化）：AFP、CEA、CA50、CA242、CA724、

23、CA199 9、肿瘤标志物（肝胆胰）：AFP、CEA、CA199、CA724、CA242、CA125。 10、肿瘤标志物（胃肠）：CEA、CA50、CA724、CA242、CA199。 11、肿瘤标志物（妇）：CEA、CA125、SCC 。 12、肿瘤标志物（卵巢癌）：CA125、HE4。 13、肿瘤标志物（前列腺）：t PSA、f PSA。 14、肿瘤标志物（胃）：CEA、CA724、PGI、PGII、PGI/PGII。,吉林大学核医学2-体外分析技术,吉林大学核医学2-体外分析技术,甲胎蛋白(AFP)肝癌首选肿瘤标志物,胎儿发育期由卵黄囊和肝细胞合成的糖蛋白。 参考值：7ng/mL 恶性疾

24、病： AFP是诊断原发性肝癌的最佳标志物，诊断阳性率为60%70%。血清AFP400g/L持续4周，或200400g/L持续8周者，结合影像检查，可作出原发性肝癌的诊断。 生殖胚胎性肿瘤（睾丸癌，畸胎瘤）可见AFP含量升高 良性疾病： 急慢性肝炎，肝硬化患者血清中AFP浓度可有不同程度升高，其水平常300ug/L。,吉林大学核医学2-体外分析技术,癌胚抗原(CEA)结直肠癌首选肿瘤标志物,从胎儿及结肠癌组织中发现的一种糖蛋白胚胎抗原，属于广谱性肿瘤标志物。 参考值5g/L。 恶性疾病 CEA在恶性肿瘤中的阳性率依次为结肠癌（70%）、胃癌（60）、胰腺癌（55）、肺癌（50）乳腺癌（40）、卵

25、巢癌（30）、子宫癌（30%）。 CEA属于粘附分子，是多种肿瘤转移复发的重要标志。 良性疾病 部分良性疾病直肠息肉，结肠炎，肝硬化，肺病疾病也有不同程度的CEA水平升高，但升高、程度和阳性率较低。 吸烟人群CEA升高(15ng/mL)。,吉林大学核医学2-体外分析技术,前列腺特异性抗原（PSA）前列腺癌首选肿瘤标志物,由人前列腺上皮细胞合成并分泌至精浆中的一种糖蛋白，PSA主要存在于前列腺组织中，女性体内不存在，正常男性血清中PSA的含量很低。 参考值4g/L； PSA具有器官特异性，但不具有肿瘤特异性。诊断前列腺癌的阳性率为80%。良性前列腺疾病也可见血清PSA水平不同程度升高。血清PSA

26、测定是前列腺癌术后复发转移和疗效观察的监测指标 在血液中以两种形式存在：结合PSA和游离PSA比值（F-PSA/T-PSA）是鉴别前列腺癌和良性前列腺疾病的有效指标：F-PSA/T-PSA0.25多为良性疾病；0.16高度提示前列腺癌。,吉林大学核医学2-体外分析技术,CA19-9胰腺癌首选肿瘤标志物,一种与胃肠道癌相关的糖类抗原，通常分布于正常胎儿胰腺、胆囊、肝、肠及正常成年人胰腺、胆管上皮等处。 检测患者血清CA19-9可作为胰腺癌、胆囊癌等恶性肿瘤的辅助诊断指标，对监测病情变化和复发有很大意义。胃癌、结/直肠癌、肝癌、乳腺癌、卵巢癌、肺癌等患者的血清CA19-9水平也有不同程度的升高。

27、某些消化道炎症CA19-9也有不同程度的升高，如：急性胰腺炎、胆囊炎、胆汁淤积性胆管炎、肝炎、肝硬化等,吉林大学核医学2-体外分析技术,CA72-4胃癌首选肿瘤标志物,高分子量的粘蛋白。 目前诊断胃癌的最佳肿瘤标志物之一，对胃癌具有较高的特异性，其敏感性可达28-80%，若与CA19-9及CEA联合检测可以监测70以上的胃癌。CA72-4水平与胃癌的分期有明显的相关性，一般在胃癌的-期增高，对伴有转移的胃癌病人，CA72-4的阳性率更远远高于非转移者。CA72-4水平在术后可迅速下降至正常。在70%的复发病例中，CA72-4浓度首先升高。与其它标志物相比，CA72-4最主要的优势是其对良性病变

28、的鉴别诊断有极高的特异性，在众多的良性胃病患者中，其检出率仅0.7。 结/直肠癌、胰腺癌、肝癌、肺癌、乳腺癌、卵巢癌也有一定的阳性率,吉林大学核医学2-体外分析技术,CA125卵巢癌首选肿瘤标志物,CA125存在于上皮卵巢癌组织和病人血清中，是研究最多的卵巢癌标记物，在早期筛查、诊断、治疗及预后的应用研究均有重要意义。 CA125对卵巢上皮癌的敏感性可达约70%。其他非卵巢恶性肿瘤（宫颈癌、宫体癌、子宫内膜癌、胰腺癌、肺癌、胃癌、结/直肠癌、乳腺癌）也有一定的阳性率。 良性妇科病（盆腔炎、卵巢囊肿等）和早期妊娠可出现不同程度的血清CA125含量升高。,吉林大学核医学2-体外分析技术,CA-50

29、 胰腺和结、直肠癌的标志物，是最常用的糖类抗原肿瘤标志物，因其广泛存在胰腺、胆囊、肝、胃、结直肠、膀胱、子宫，它的肿瘤识别谱比CA19-9广，因此它又是一种普遍的肿瘤标志相关抗原，而不是特指某个器官的肿瘤标志物。 CA50在多种恶性肿瘤中可检出不同的阳性率，对胰腺癌和胆囊癌的阳性检出率居首位，占94.4%；其它依次为肝癌（88%）、卵巢与子宫癌(88%)和恶性胸水（80%）等。可用于胰腺癌、胆囊癌等肿瘤的早期诊断，对肝癌、胃癌、结直肠癌及卵巢肿瘤诊断亦有较高价值,吉林大学核医学2-体外分析技术,CA242,CA242是一种粘蛋白型糖抗原，是胰腺癌和结肠癌较好的肿瘤标志物，但特异性、诊断效率则优

30、于CA19-9。 与CA50一起表达，用于胰腺癌、结直肠癌的诊断，在胰腺癌、胆囊癌和消化道癌中的灵敏度、特异性更高（CA50、CA19-9易受肝功能以及胆汁郁积的影响，在良性阻塞性黄疸以及肝实质性损害记疾病时常出现假阳性)。 对胰腺癌、大肠癌、肺腺癌、直肠腺癌、食管和乳腺癌、小细胞肺癌灵敏度较高,吉林大学核医学2-体外分析技术,由100个氨基酸组成的单链多肽。2-MG是人体白细胞抗原的一个轻链，是体内所有正常有核细胞合成的一种小分子蛋白质，体液中含量甚微且相当恒定。 临床上多用于诊断淋巴增殖性疾病，如白血病、淋巴瘤及多发性骨髓瘤。其水平与肿瘤细胞数量、生长速率、预后及疾病活动性有关。 此外，根

31、据此水平还可用于骨髓瘤患者分期。 血清2-MG可以在肾功能衰竭、炎症及多种疾病中均可增高。故应排除由于某些炎症性疾病或肾小球滤过功能减低所致的血清2-MG增高,2-MG (2-微球蛋白),吉林大学核医学2-体外分析技术,是人体内除血红蛋白外含铁最丰富的蛋白质，铁蛋白的含量能反映肝脏储铁量和体内储铁总量及营养状况，在铁代谢方面起着重要协调。主要存在肝、脾和骨髓等网状内皮系统内，具有重要的生理功能。 铁蛋白升高可见于下列肿瘤：急性白血病、何杰金氏病、肺癌、结肠癌、肝癌和前列腺癌。检测铁蛋白对肝脏转移性肿瘤有诊断价值，76%的肝转移病人铁蛋白含量高于400g/L，当肝癌时，AFP测定值较低的情况下，

32、可用铁蛋白测定值补充，以提高诊断率。 在色素沉着、炎症、肝炎时铁蛋白也会升高。升高的原因可能是由于细胞坏死，红细胞生成被阻断或肿瘤组织中合成增多。,Ferr(铁蛋白),吉林大学核医学2-体外分析技术,人附睾蛋白4-HE4卵巢癌早期诊断新指标,人附睾蛋白4（HE4，也称为WFDC2）属于乳清酸性四- 二硫化 物核心（WFDC）蛋白家族，可能具有胰蛋白酶抑制剂活性。 卵巢癌的早期诊断和治疗监测。 卵巢癌与子宫内膜异位症的鉴别诊断。 卵巢癌与子宫内膜癌的鉴别诊断。 良性疾病：肾功能不全，呼吸系统疾病，肝脏疾病。,吉林大学核医学2-体外分析技术,人附睾蛋白4（HE4）卵巢癌早期诊断的特异性指标,卵巢癌

33、早期诊断的高敏感性和高特异性的肿瘤标志物 更好的对妇科良性卵巢肿块与卵巢癌进行鉴别诊断。 HE4用于卵巢癌治疗的监测，早期发现复发和转移。 HE4 + CA 125联合应用可减少生物标志物阴性卵巢癌的漏诊。 CA125联合HE4可以减少30-50%单一肿瘤标志物阴性导致的卵巢癌漏诊。,吉林大学核医学2-体外分析技术,细胞角蛋白片段19（CYFRA21-1）非小细胞肺癌首选肿瘤标志物,是细胞角蛋白-19的可溶性片段。 Cyfra21-1是非小细胞肺癌，特别是肺鳞癌的首选标志物。与CEA和NSE联合检测对肺癌的鉴别诊断，病情监测有重要价值。 Cyfra21-1对乳腺癌，膀胱癌，卵巢癌也是很好的辅助

34、诊断和治疗监测指标。,吉林大学核医学2-体外分析技术,神经元特异性烯醇化酶-NSE小细胞肺癌首选肿瘤标志物,NSE为烯醇化酶的一种同工酶。 NSE是小细胞肺癌（SCLC）的肿瘤标志物，诊断阳性率为91%。有助于小细胞肺癌和非小细胞肺癌（NSCLC）的鉴别诊断。 对小细胞肺癌的疗效观察和复发监测也有重要价值。 神经母细胞瘤，神经内分泌细胞瘤的血清NSE浓度可明显升高。,吉林大学核医学2-体外分析技术,胃泌素释放肽前体（ProGRP）小细胞肺癌的最佳指标,胃泌素释放肽（GRP）是从猪内脏分离的27个氨基酸肽，在血液中不稳定存在。通过检测胃泌素释放肽前体（ProGRP）反应GRP的水平。 临床意义：

35、 恶性疾病： 小细胞肺癌（SCLC）早期诊断 NSCLC和SCLC的鉴别诊断 ProGRP结合NSE对SCLC治疗进行疗效的监测 SCLC的预后评估 良性疾病： 肾衰竭(350pg/mL) 肝脏疾病（100pg/mL）,吉林大学核医学2-体外分析技术,宫颈癌：85% 肺癌 ：30% 头部及颈部癌症：90% 食道癌：50% 肛门癌：85% 皮肤癌：20%,SCC:鳞状上皮细胞癌特异标志物,各类癌症中性质为鳞状上皮细胞癌的比例,SCC-Ag检测可用于各类鳞状上皮细胞癌的监测 “SCC-Ag 可作为鳞状上皮细胞癌特异的标志物。”,吉林大学核医学2-体外分析技术,CA15-3乳腺癌首选肿瘤标志物,CA

36、15-3可作为乳腺癌辅助诊断，术后随访和转移复发的指标。对早期乳腺癌的敏感性较低（60%），晚期的敏感性为80%，转移性乳腺癌的阳性率较高（80%）。 其他恶性肿瘤也有一定的阳性率，如：肺癌、结肠癌、胰腺癌、卵巢癌、子宫颈癌、原发性肝癌等。,吉林大学核医学2-体外分析技术,S100黑色素瘤首选肿瘤标志物,S100 蛋白分子量为10.5KD 的钙结合蛋白，S100A1 和S100B 是最先发现的成员。由中枢神经系统细胞 表达，特别是星形胶质细胞、黑色素瘤细胞和其他 一些组织也有表达，参考值：0.1ng/mL。 临床意义： 恶性肿瘤：恶性黑色素瘤，血清S100 浓度的升高提示疾病的进展，连续检测有

37、助于疗效的评估。 良性疾病：外伤性脑损伤，中风：脑出血或脑梗死，脑肿瘤，脓毒血症合并脑损伤，肝病，伴有坏死的脑病变。,吉林大学核医学2-体外分析技术,降钙素（Calcitonin)更好地诊断甲状腺髓样癌,来源：甲状腺C细胞分泌产生，调节钙磷平衡，具有拮抗甲状旁腺激素的功能。高血钙、胃肠激素和五肽促胃酸激素可刺激降钙素的释放。 临床意义： 恶性疾病：甲状腺C细胞癌（髓样癌）的筛查、早期诊断、治疗监测 、早期发现复发、预后评估。 良性疾病：高钙血症、高胃泌素血症、脓毒血症。,吉林大学核医学2-体外分析技术,何为甲状腺球蛋白（Tg）多种疾病可引起Tg升高，测定Tg时必须同时检测Anti-Tg,甲状腺

38、球蛋白（Tg）是甲状腺产生的特异性蛋白，由甲状腺滤泡上皮细胞分泌，是甲状腺激素合成和储存的载体。 多种甲状腺疾病均可引起血清Tg水平升高: 分化型甲状腺癌（DTC） 甲状腺肿 甲状腺组织炎症或损伤 甲亢,任何检测方法都不能完全避免Anti-Tg对于Tg测定的干扰，每次测定血清Tg时必须同时测定Anti-Tg（指南强烈推荐）,内容来源：甲状腺结节和分化型甲状腺癌诊治指南2012版,吉林大学核医学2-体外分析技术,Tg 主要临床应用临床必需的分化型甲状腺癌 (DTC) 诊断和术后评估监测指标,甲状腺癌术后 Tg1.0ng/ml 甲状腺癌131I清甲后Tg0.1ng/ml,吉林大学核医学2-体外分析

39、技术,肿瘤标志物的临床应用1) 防癌筛查和肿瘤早期诊断,吉林大学核医学2-体外分析技术,肿瘤标志物的临床应用2) 肿瘤的诊断与鉴别诊断,吉林大学核医学2-体外分析技术,肿瘤标志物的临床应用3) 肿瘤治疗的监测,初始治疗前即开始治疗的监测 肿瘤标志物的连续监测 采用同种试剂检测的结果才具有可比性 一旦更换试剂，需要进行平行试验评估 肿瘤标志物水平下降 与半衰期有关 手术或治疗有效 肿瘤标志物的检测 初治完成后的检测是必须的（对照水平） 不管患者肿瘤标志物的初始水平在正常范围之内或高于正常值 个体患者的基线值 后续随访的基础,疗效观察可参照下列标准： 无效： TM浓度与治疗前相比下降 50 改善：

40、 TM浓度与治疗前相比下降50 有效： TM浓度与治疗前相比下降90 显效： TM浓度下降至临界值以下,吉林大学核医学2-体外分析技术,肿瘤标志物的临床应用4)患者随访和复发的早期发现,注意: 对于个体患者，如果肿瘤标志物水平在正常范围之内，也未必提示正常。 肿瘤标志物的水平再次升高/ 肿瘤标志物升高的速度。 高度提示肿瘤发生复发和转移。 连续动态的监测以个体患者的基线水平为基础，可避免假阳性和假阴性的出现。 肿瘤标志物的诊断价值。 肿瘤的复发和转移的早期监测不依赖原发肿瘤标志物的释放! 与基线值相比，如出现100%的增长，具有100%的特异性 。 肿瘤标志物联合检测。 增加肿瘤发生转移的诊断

41、价值。,*Stieber et al, Tumor markers in metastatic breast cancer: High tumor specificity within the reference range. J Clin Oncol, 2006 ASCO Annual Meeting Proceedings Part I. Vol 24, No. 18S (June 20 Supplement): 1055,吉林大学核医学2-体外分析技术,肿瘤标志物的临床应用5) 预后评估,肿瘤发生部位 肿瘤分期 (无 - , 局部的 远处转移) 肿瘤分级 治疗前后肿瘤标志物的水平 肿瘤标

42、志物的高水平提示肿瘤晚期，预后不良。 正常或轻微升高提示无疾病复发时间长，生存期长。,有效治疗后无疾病复发时间的预后指标,吉林大学核医学2-体外分析技术,影响TM检测的因素,体内因素： 肿瘤标记物的浓度不仅依赖于其表达、合成、释放、分泌以及肿瘤的大小及其生长速度，而且也依赖于肿瘤组织的血液供应，侵犯的位置，采血的时间，病人的生活习惯的因素。 体外因素： 存储条件：标本的存放条件，存放时间会影响标本的结果。4适合短期保存，-20适合长期保存，更长时间保存需放置-80。 2. 标本血清分离的时间：NSE 尽快进行血清分离，60分钟会影响结果。 3. 溶血标本：NSE 4. 唾液、尿液的污染：CA1

43、9-9 5. 药物及生活方式的影响 化疗后肿瘤标志物会出现短暂升高 吸烟可致CEA轻微升高 5还原酶抑制剂，如保列治、非那雄胺等，导致PSA水平下降50% 大麻类毒品可引起hCG短暂升高,吉林大学核医学2-体外分析技术,理性面对,吉林大学核医学2-体外分析技术,降钙 素原,吉林大学核医学2-体外分析技术,感染诊断现状,WHO(2008,2011)的统计数据提示：感染是造成人类死亡最重要的因素，约占全球每年总体死亡率的25.5%(大约1500 万人）。其中呼吸道感染则是导致患者死亡最主要的感染性疾病，每年约造成430万人死亡。,每年全球死亡人数(单位: 百万),吉林大学核医学2-体外分析技术,感

44、染诊断现状：临床诊断方法,临床症状和体征：缺乏特异性 血常规：白细胞和中性粒细胞：严重感染时，由于骨髓抑制，白细胞反而不升高，不能客观的反应感染的真实情况。 胸部影像：胸片，敏感性和特异性较差，可能漏诊31%的疑似病例。胸部CT，敏感性和特异性优于胸片，但不适用于危重患者，且不便随访。 微生物学检查：“金标准” ，耗时长，急诊室的患者中多达30%已接受了抗感染治疗，影响病原体检出率。,吉林大学核医学2-体外分析技术,针对细菌感染存在的问题,细菌感染的快速鉴别诊断,减少抗生素滥用,吉林大学核医学2-体外分析技术,早期诊断细菌感染的理想标志物,WBC(白细胞） Endotoxin（细菌内毒素） I

45、L-6（白介素6） IL-10（白介素10） TNF（肿瘤坏死因子） CRP（c 反应蛋白） PCT,吉林大学核医学2-体外分析技术,PCT 的生物学特点,脓毒血症及促炎症细胞因子可诱导全身各种组织多种类型细胞表达和释放PCT。,血清降钙素(CT)的前肽物质，由116个氨基酸组成的糖蛋白质，无激素活性。,快速：感染开始后3小时即可测得，6-12小时后达到峰值，峰值最高可达1000 g/L，半衰期: 接近24 hrs，几乎不受肾功能状态影响。,正常情况下，是降钙素的前体，血液中浓度非常低， 0.05g/L。当细菌感染时，PCT可生成并释放入血液循环。,吉林大学核医学2-体外分析技术,PCT的血液

46、动力学,PCT浓度(ng/ml),时间(小时),时间(天),血浆PCT在不动杆菌属引起的脓毒症的血液动力学,快速反应：感染开始后3小时即可测得，6-12小时后达到峰值，非常有利于早期诊断 半衰期短：接近24小时，利于临床及时判断疗效,7.Brunkhorst FM et al, Kinetics of procalcitonin in iatrogenic sepsis. Intensive Care Medicine 1998;24(8):888-889,吉林大学核医学2-体外分析技术,PCT的动力学特点,C反应蛋白,快速、高特异性的增长 在脓毒症情况下，3-6小时即可检测到其水平的增长 快

47、速衰减 半衰期约20-24 小时 ，可以快速反映治疗效果,吉林大学核医学2-体外分析技术,与其他指标相比，PCT诊断脓毒症的正确性最高，可达 94 %,PCT是严重细菌感染诊断的有效生物标记物,PCT、CRP、IL-6和乳酸诊断脓毒症的性能比较,AUC: PCT: 0.94 CRP: 0.89 IL-6: 0.78,8.MULLER B et al. Calcitonin precursors are reliable markers of sepsis in a medical intensive care unit. Critical Care Medicine 2000;28(4):97

48、7-983,PCT与其他指 标相比 P均0.001,吉林大学核医学2-体外分析技术,不受肾上腺皮质激素治疗的影响,De Kruif MD et al., Intensive Care Med. 2008, 34(3):518-522,健康男性志愿者口服脱氢皮质醇3mg(圆形)、10mg(三角形)、30mg(正方形)对照组服用安慰剂(实心圆形),2.5小时后给予静脉注射脂多糖（4ng/Kg IV)，观察PCT水平的变化。,吉林大学核医学2-体外分析技术,PCT 的特性,特异性高由严重细菌感染诱发的PCT生成和释放 注：病毒感染时产生的细胞因子会抑制PCT的产生 升高快速细菌侵入后，6-12hr达

49、峰值, 利于早期诊断 半衰期24小时左右，利于临床判断疗效 PCT升高的水平与细菌感染的程度呈正相关 PCT升高只存在于真正的细菌感染，细菌污染后不会升高 性状稳定体内几乎不受肾功能的影响，体外可长期保存,吉林大学核医学2-体外分析技术,局部细菌感染时，局部组织仍然会产生PCT，但是，由于机体免疫功能的限制，这些PCT几乎不进入血液循环，因此血中PCT不/轻微升高。 只有当发生系统性细菌感染时，全身多器官组织生成PCT，此时免疫功能已不能阻止PCT释放入血，此时，PCT会明显升高。,PCT是判断系统性（全身性）细菌感染的有力工具,吉林大学核医学2-体外分析技术,脓毒症 Sepsis 严重脓毒症

50、 Severe Sepsis 感染性休克 Septic Shock,什么是系统性（全身性）感染？,吉林大学核医学2-体外分析技术,PCT应用于多个临床科室,重症科ICU 脓毒症的诊断及治疗监测 急诊科 疑似感染及不明原因发热的鉴别诊断 血液科 不明原因发热及白细胞异常的鉴别诊断 儿科/新生儿科 疑似感染及不明原因发热的鉴别诊断 呼吸科 呼吸道感染的鉴别诊断、治疗监测及用药指导,外科 外科手术后的感染监测 内科 疑似感染及不明原因发热的鉴别诊断 肿瘤科 放化疗后的感染发热鉴别诊断 风湿免疫科 感染与自身免疫性疾病的鉴别诊断 老年科 不明原因发热的鉴别诊断 甲状腺髓样癌 .,吉林大学核医学2-体外分析技术,降钙素原水平升高可见于多种感染性疾病,Philipp Schuetz et al. Procalcitonin for diagnosis of infection and g