《细菌培养技术》PPT课件.ppt

1、细菌培养技术,南华大学预防医学与放射卫生实验教学中心,教学对象：高等医学院校卫生检验专业学生 实验课时：4学时 课程类型：专业实验课 课程要求：必修 每组人数：2人,实验目的和要求,掌握细菌的培养方法。 掌握平板划线法、斜面、液体和半固体培养基等各种接种方法。 熟悉接种工具、接种环境要求和无菌操作要领。 学会观察平板、斜面、液体、半固体培养基中细菌的生长现象,实验内容,常用细菌培养方法。 细菌的分离培养和接种技术。 细菌生长现象观察,一、常用细菌培养方法,需氧培养法（一般培养） 适用于需氧菌和兼性厌氧菌培养。 培养温度：37（采用恒温培养箱）。 培养时间：1824h。 二氧化碳培养法 适用于奈

2、瑟菌属和布鲁菌属等苛养菌培养。 可采用烛缸法、二氧化碳培养箱,一、常用细菌培养方法,微需氧培养法 适用于空肠弯曲菌、幽门螺杆菌等微需氧菌培养。 可采用抽气换气法。 厌氧培养法 适用于专性厌氧菌培养。 厌氧培养箱、厌氧袋、厌氧罐、疱肉培养法、硫乙醇酸盐法等,二、细菌的分离培养和接种技术,一)接种工具 接种针和接种环：由三部分组组成，即环（针）、金属柄和绝缘柄。接种前后都要过火灭菌。接种针用于穿刺接种细菌，接种环用于固体、液体培养基的细菌接种。 L型玻璃棒：用于琼脂平板涂布接种细菌,二）接种环境,操作需在接种罩、超净工作台或无菌室内进行,三）细菌接种的基本程序,灭菌接种环,沾取标本,接种,灭菌接种

3、环,杀灭接种环沾染的细菌，以免污染标本,杀灭接种环沾染的细菌，以免污染环境,细菌接种的基本程序,取菌种试管和待接种的斜面试管,灭菌接种环,沾取标本,接种,接种后灭菌接种环,四）接种方法,1.平板划线接种法： 目的：使混合的细菌呈单个分散生长，形成单个菌落，以便获得纯菌。 方法： 分区划线法：适用于含菌量较多的标本。 连续划线法：适用于含菌量较少的标本,分区划线法,第一区划线,灭菌接种环,第二区划线,灭菌接种环,第三区划线,灭菌接种环,连续划线法,四）接种方法,2.液体培养基接种法 可观察细菌在培养基中的生长现象或用作生化反应实验,四）接种方法,3.半固体培养基接种法： 穿刺接种法 ，用于保存菌

4、种或观察细菌动力,四）接种方法,4.斜面接种法： 用于鉴定和保存菌种,四）接种方法,5.涂布接种法： 用于测定标本中活菌数和药敏实验细菌接种,四）接种方法,6.倾注培养法：用于细菌计数,将上述已接种细菌的培养基置37恒温培养箱中孵育1824h，观察细菌的生长现象,三、细菌在培养基上的生长现象,1、细菌在固体培养基中的生长现象,菌落 定义：指单个细菌在平板培养基上生长繁殖，形成单一肉眼可见的细菌集团。 菌落特征：大小、形状、边缘、颜色、表面、透明度、湿润度、黏度、溶血性。 菌苔：指多个菌落融合在一起形成的细菌堆积物,菌落与菌苔,菌落,菌苔,2、细菌在液体培养基中的生长现象,混浊 沉淀：多见于链状排列的细菌。 菌膜：多见于厌氧菌,细菌在液体培养基中的生长现象,菌膜,菌沉淀,均匀浑浊,对照,3、细菌在半固体培养基中的生长现象,有鞭毛细菌： 在培养基中沿穿刺线并向