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文档简介

1、专题,2,微生物的培养与应用,学习目标,1,简述纤维素酶的种类及作用,2,掌握从土壤中分离纤维素分解菌的操作技术,纤维素，一种由,葡萄糖,首尾相连而,成的高分子,多糖类,化合物,一、基础知识,1,某些微生物能分解纤维素，是因为它们,能够产生,纤维素酶,2,纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至,少包括三种组分，即,C1,酶,Cx,酶,和,葡,萄糖苷酶,纤维素,C,1,酶,C,x,酶,纤维二糖,葡萄糖苷,酶,葡萄糖,纤维素酶水解滤纸实,验,取二支,20mL,的试管,各加入一张滤纸条,分别加,11mL,10mL,0.1mol/L,的,PH,为,4.8,的醋酸醋酸钠缓,冲液,乙试管加入,1mL,纤维,素

2、酶,将试管放在,140r/min,的摇床上,振荡,1h,3,纤维素分解菌的筛选,1,方法,刚果红染色法,2,原理,纤维素,刚果红,纤维素酶,分解,红色复合物,纤维素,红色复合物消失,出现,以纤维素分解菌为中心,的透明圈,请根据实验流程图和提供的三个资料，思考有关问题,然后进行实验设计，并写出详细的实验方案。在小组内,进行交流,1,土壤取样的环境是怎样的？作出这种选择的理由是,什么,2,选择培养基培养基对微生物是如何进行选择的,3,选择培养用液体培养基还是固体培养基？为什么,4,刚果红染色法有几种方法？怎样操作？两种方法各,有哪些优缺点,土壤取样,选择,纤维素丰富,的环境，因为在富含,纤维素的环

3、境中,纤维素分解菌的含量相对,提高,选择培养,1,用什么样的培养基进行选择培养,以纤维素为唯一碳源的培养基,只有纤维素分,解菌能够生长繁殖，其他微生物生长受到抑制,2,用液体培养基还是固体培养基？为什么,液体培养基，因为可以获得更多菌体,而且进行稀释涂布操作更简单,梯度稀释,将样品涂布到鉴别纤维,素分解菌的培养基上,1,制备培养基,参照旁栏,中的比例,2,涂布平板：将稀释度,为,10,4,10,6,的菌悬液各,取,0.1ml,涂布在培养基上,30,倒置培养,挑选产生透,明圈的菌落,参照课本,刚果红染色法,挑选产生透,明圈的菌落，一般即为分解纤维素的菌落,刚果红,染色法,方法一,先培养微生物，再加入刚果红进,行颜色反应,方法二,在倒平板时就加入刚果红,思考：这两种方法各有哪些优点与不足,优点,缺点,方法一,显示出的颜色反应,操作繁琐，加入刚,基本上是纤维素分,果红溶液会使菌落,解菌的作用,之间发生混杂,能产生,

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