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文档简介
1、 随星真题演练o (2017高考全国卷n)几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分,几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内,可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题:(1) 在进行基因工程操作时,若要从植物体中提取几丁质酶的mRNA,常选用嫩叶而不选用老叶作为实验材料,原因是 。提取RNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目的是 。(2) 以mRNA为材料可以获得 cDNA ,其原理是若要使目的基因在受体细胞中表达,需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入受体细胞,原因是(答出两点即可)。(4) 当几丁质酶基因和质粒载体连接时,DNA连接酶催化形成的化学键是 。(5) 若获得的
2、转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高,根据中心法则分析,其可能的原因是 。解析:(1)在进行基因工程操作时,若要从植物体中提取几丁质酶的mRNA ,常选用嫩叶而不选用老叶作为实验材料,原因是相对于老叶而言嫩叶组织细胞更容易被破碎。提取RNA时,提取液中需添加 RNA酶抑制剂,其目的是防止RNA降解。以mRNA为材料获得cDNA 的原理是在逆转录酶的作用下,以mRNA为模板按照碱基互补配对的原则可以合成cDNA 。(3) 若要使目的基因在受体细胞中表达,需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入受体细胞,原因是目的基因无复制原点且目的基因无表达所需启动子。(4)
3、DNA连接酶催化形成的化学键是磷酸二酯键。(5)若获得的转基因植株不具备所期望的性状表现,根据中心法则分析,其可能的原因是目的基因的转录或翻译异常。答案:嫩叶组织细胞易破碎防止RNA降解(2)在逆转录酶的作用下,以mRNA为模板按照碱基互补配对的原则可以合成cDNA (3)目的基因无复制原点;目的基因无表达所需启动子 磷酸二酯键(5)目的基因的转录或翻译异常& (2017高考全国卷 川)编码蛋白甲的DNA序列(序列甲)由A、B、C、D、E五个片段组成, 编码蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段组成,如图1所示。r.图2甲乙丙对 -5 一 -回答下列问题:(1) 现要通过基因工程的方法获得蛋白乙,
4、若在启动子的下游直接接上编码蛋白乙的DNA序列(TTCGCTTCTCAGGAAGGA),则所构建的表达载体转入宿主细胞后不能翻译出蛋白乙,原因是。某同学在用PCR技术获取DNA片段B或D的过程中,在PCR反应体系中加入了 DNA 聚合酶、引物等,还加入了序列甲作为 ,加入了 作为合成DNA的原料。(3)现通过基因工程方法获得了甲、乙、丙三种蛋白,要鉴定这三种蛋白是否具有刺激T淋巴细胞增殖的作用,某同学做了如下实验:将一定量的含T淋巴细胞的培养液平均分成四组,其中三组分别加入等量的蛋白甲、乙、丙,另一组作为对照,培养并定期检测T淋巴细胞浓度,结果如图 2。 由图2可知,当细胞浓度达到a时,添加蛋
5、白乙的培养液中T淋巴细胞浓度不再增加,此时若要使 T淋巴细胞继续增殖,可采用的方法是 。细胞培养过程中,培养箱中通常要维持一定的C02浓度,CO2的作用是 。 仅根据图1、图2可知,上述甲、乙、丙三种蛋白中,若缺少(填“A” “B” “C“D或“E)片段所编码的肽段,则会降低其刺激T淋巴细胞增殖的效果。解析:(1)若在启动子的下游直接接上编码蛋白乙的 DNA 序列(TTCGCTTCTCAGGAAGGA),则转录出的 mRNA上缺少起始密码子,故不能翻译出 蛋白乙。使用PCR技术获取DNA片段时,应在PCR反应体系中添加引物、耐高温的DNA聚合酶、模板、dNTP作为原料。(3)T淋巴细胞浓度之所
6、以不再增加 ,是因为细胞间 出现接触抑制,因此若要使T淋巴细胞继续增殖,需要对贴满瓶壁的细胞使用胰蛋白酶处 理,然后分瓶培养,即细胞传代培养。细胞培养过程中,培养箱中通常要维持一定的C02浓度,以维持培养液的pH。据图分析,蛋白丙与对照接近说明 B、D片段对于T淋巴细胞 增殖不是非常重要,蛋白甲和乙对 T淋巴细胞的增殖都有较大影响 ,甲、乙两种蛋白中共 同的片段是C,所以缺少C片段会降低其刺激 T淋巴细胞增殖的效果。答案:(1)编码乙的DNA序列起始端无 ATG ,转录出的mRNA无起始密码子 (2)模板 dNTP(3)进行细胞传代培养维持培养液的pH C (高考新课标全国卷I )阅读如下资料
7、:资料甲:科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵中,得到了体型巨大的 “超级小鼠”;科学家采用农杆菌转化法培育出转基因烟草。资料乙:T4溶菌酶在温度较高时易失去活性。科学家对编码T4溶菌酶的基因进行了改造,使其表达的T4溶菌酶第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸 ,在该半胱氨酸与第 97位的半胱氨酸 之间形成了一个二硫键,提高了 T4溶菌酶的耐热性。资料丙:兔甲和兔乙是同一物种的两个雌性个体,科学家将兔甲受精卵发育成的胚胎移植到兔乙体内,成功产出兔甲的后代,证实了同一物种的胚胎可在不同个体的体内发育。回答下列问题:(1) 资料甲属于基因工程的范畴。将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用法。构建基因表达载体
8、常用的工具酶是 和。在培育有些转基因植物时,常用农杆菌转化法,农杆菌的作用是 。(2) 资料乙中的技术属于 工程的范畴,该工程是指以分子生物学相关理论为基础,通过基因修饰或基因合成, 对进行改造,或制造一种 的技术。在该实例中,引起T4溶菌酶空间结构改变的原因是组成该酶肽链的 序列发生了改变。(3) 资料丙属于胚胎工程的范畴。胚胎移植是指将获得的早期胚胎移植到种的、生理状态相同的另一个雌性动物体内, 使之继续发育成新个体的技术。 在资料丙的实例中,兔甲 称为体,兔乙称为体。解析:(1)小鼠细胞为动物细胞,将基因表达载体导入动物细胞常用的方法是显微注射法;构建基因表达载体常用的工具酶是限制酶和D
9、NA连接酶;将基因表达载体导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法,农杆菌的作用是作为载体,将目的基因导入受体细胞。(2) 从资料乙中可以得出是对基因进行改造,结果是得到耐热性提高的蛋白质,因此属于蛋白质工程的范畴,该工程是指以分子生物学相关理论为基础,通过基因修饰或基因合成 ,对现有的蛋白质进行改造,或制造一种新蛋白质的技术。 对基因进行改造后,第3位的异亮氨 酸变为半胱氨酸,该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成二硫键,引起了空间结构的改变,所以最终是由于氨基酸序列的改变导致了空间结构的改变。(3) 胚胎工程中胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎,或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎,移植到同种的
10、、生理状态相同的其他雌性动物的体内 ,使之继续发育为新个体的技术。资料丙中甲兔提供受精卵,所以甲兔是供体;胚胎在乙兔子宫内发育,所以乙兔为受体。答案:(1)显微注射限制酶 DNA连接酶农杆菌可感染植物,将目的基因转移到受体细胞中(2)蛋白质现有的蛋白质 新蛋白质氨基酸 同供受课时作业1. DNA是丰富多彩的生命现象的“剧本”。现在人们借助生物科学技术可以对“剧本”进行“拷贝”或“改编”。据图回答下列问题:= 一=(1)催化过程的酶是经过程产生的 DNA片段末端的形式为(2)催化过程的酶是 强”或“较弱”)。与催化过程的酶相比较,该酶的专一性(填“较(3)催化过程的酶是实现该过程还可以采用的方法
11、是(4)催化过程的酶是 点。该过程体现了 DNA复制的特答案:限制酶 黏性末端DNA连接酶 较弱 (3)解旋酶 加热 DNA聚合酶半保留复制、边解旋边复制2. (2018辽宁五校协作体高三联考)白细胞介素是一类淋巴因子。研究人员将人白细胞介素的基因导入到酵母菌细胞中,使其分泌出有活性的白细胞介素。请据图回答下列问题:分祗型表达嚴怵白细胞介素基丙jEccjR I jEcoR 52 iEcoR 1EcR I -i- raR 52连接直组载休(1)为增加白细胞介素基因的数量,可使用 技术,但前提是必须知道基因的部分序列,目的是(2)在重组载体导入酵母菌细胞之前,需用 处理酵母菌,白细胞介素基因进入酵
12、母菌细胞内,并且在其细胞内维持稳定和表达的过程,称为 。在表达过程中,启动子需与识别和结合,从而驱动转录过程。(3)在体液免疫过程中,白细胞介素是由 细胞分泌的,为了能成功表达出白细胞介素,不使用细菌,而使用酵母菌细胞作为受体细胞,可能原因是(4)在分泌型表达载体和白细胞介素基因所在DNA分子上均有多个限制酶的酶切位点,图示过程获得有效表达的重组载体使用了EcoR I和EcoR 52两种限制酶,与使用单一的限制酶相比,其优点是 。解析:(1)基因工程中,扩增目的基因利用的是 PCR技术,但前提是要有一段已知目的基因 的核苷酸序列,以便设计引物。在重组载体导入酵母菌细胞之前,需用Ca2+处理酵母
13、菌, 使酵母菌细胞处于感受态,白细胞介素基因进入酵母菌细胞内,并且在其细胞内维持稳定和表达的过程称为转化。在表达过程中,启动子需与RNA聚合酶识别和结合,从而驱动转录过程。(3)在体液免疫过程中,白细胞介素是由T淋巴细胞分泌的;由于细菌属于原核生物,细胞中无内质网和高尔基体等加工白细胞介素的细胞器,因此为了能成功表达出白细胞介素,不使用细菌,而使用酵母菌细胞作为受体细胞。(4)在分泌型表达载体和白细胞介素基因所在的DNA分子上均有多个限制酶的酶切位点,图示过程获得有效表达的重组载体使用 了 EcoRI和EcoR 52两种限制酶,与使用单一的限制酶相比,其优点是能防止目的基因、 表达载体发生自身
14、环化或者目的基因反向接入分泌型表达载体中。答案:(1)PCR 设计引物Ca2+转化 RNA聚合酶 (3)T淋巴 细菌细胞中无内质网和高尔基体等加工白细胞介素的细胞器(4)能防止目的基因、表达载体发生自身环化或者目的基因反向接入分泌型表达载体中3. (2018德州高三调研)凡是具有抗原性、接种于机体可产生特异性免疫、可抵抗传染病的 发生和流行的物质均可称为疫苗。以下是三代乙肝疫苗的生产原理示意图,回答下列问题。(1)目前临床使用的乙肝疫苗是第二代疫苗。图中外衣壳蛋白基因A的大量扩增可通过技术,需要用到的一种重要酶是 和种引物。构建含基因 A的重 组质粒需要用到的工具酶是 。(2)据信息和所学知识
15、分析:第一代疫苗基本处于淘汰的原因是:。(3)结合图中第二代、第三代疫苗的化学本质,分析推测哪一代疫苗利于运输及其原因:处源DNA进入机体后,如果整合到人体基因组中可能会引起 和发生突变而导致机体癌变,这也是第三代疫苗可能存在的安全隐患,目前正在研究中。解析:(1)目的基因大量扩增可通过 PCR技术,该过程需要热稳定 DNA聚合酶。由于DNA 的结构特点是两条链反向平行 ,因此扩增过程需要 2种引物。构建基因表达载体需要用到的 工具酶是限制酶和 DNA连接酶。(2)第一代疫苗用的是减毒或灭活的病毒,病毒有可能恢复致病性或引起血源性疾病。(3)从图中分析,第三代疫苗要比第二代疫苗更有利于运输,因
16、为第三代疫苗本质是 DNA ,第二代疫苗本质是蛋白质 ,DNA的稳定性比蛋白质高。(4)细胞 癌变的原因是原癌基因和抑癌基因发生突变。答案:(1)PCR 热稳定DNA聚合酶(或Taq DNA聚合酶)2 限制酶与DNA连接酶 有引起血源性疾病的嫌疑(或病毒有可能恢复致病性)(3)第三代疫苗更有利于运输, 因为第 三代疫苗的本质是 DNA ,第二代疫苗的本质是蛋白质, DNA稳定性比蛋白质高 (4)原癌基 因抑癌基因4. (2016高考江苏卷)下表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点,其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题:限制酶BamH IBel IS
17、au3A IHi nd 川识别序列JJJ及切割位GGATCCTGATCAGATCAAGCTT占八、CCTAGGACTAGTCTAGTTCGAAEimH 1 引输FpHind IIII g-11 /Eel I引物丙 引物乙Sau3A I冃的基因图2用图中质粒和目的基因构建重组质粒,应选用 两种限制酶切割,酶切后的载体和目的基因片段,通过 酶作用后获得重组质粒。(2) 若BamH I酶切的DNA末端与Bel I酶切的DNA末端连接,连接部位的6个碱基对序列为,对于该部位,这两种酶 (填“都能”“都不能”或“只有一种能”)切开。(3) 若用Sau3A I切图1质粒最多可能获得 种大小不同的DNA片段
18、。解析:(1)选择的限制酶应在目的基因两端存在识别位点,但BamH I可能使质粒中标记基因丢失,因此只能选Bel I和Hind川。酶切后的载体和目的基因片段,通过DNA连接酶作用后获得重组质粒。根据BamH I和Bel I的酶切位点,BamH I酶切的 DNA末端与Bel I酶切的DNA末端连T GATC C G GATC A、接,在连接部位的6个碱基对序列为,与这两种酶的酶切位点均不A CTAG G C CTAG T J同。根据BamH I、Bcl I和Sau3A I的酶切位点,Sau3A I在质粒上有三个酶切位点 ,完全 酶切可得到记为 A、B、C三种片段,若部分位点被切开,可得到AB、A
19、C、BC、ABC四 种片段,所以用SaU3A I切图1质粒最多可能获得 7种大小不同的DNA片段。答案:(1)Bcl I和Hi nd川 DNA 连接T GATC C G GATC A + 十“都不能 (3)7A CTAG G C CTAG T5 下图表示科学家培育耐寒生物的过程,请回答下列问题:cDNA文库获取抗冻蛋白基因 丄更多抗冻蛋白基因 构建导受体细胞T耐寒生物(1) 从cDNA文库中获取的目的基因 (填“有”或“无”)启动子。实现过程常用技术,该技术的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便合成(2) 表示,其中标记基因的作用是(3) 转基因技术是否成功,需要对受体细胞进行分子水平的检测,首先是用DNA分子杂交技术检测受体细胞染色体上的DNA上是否插入目的基因,这种方法需要遵循 原则。(4) 若要培育抗冻能力强的转基因羊,可将鱼的抗冻蛋白基因导入羊的中,培育该转基因羊的最后一道“工序”是胚胎工程的 技术。解析:(1)用某种生物发育的某个时期的mRNA逆转录产生的多种互补DNA片段,与载体连接后储存在一个受体菌群中,这个受体菌群就叫这种生物的cDNA文库,启动子不能逆转录,由逆转录获得的cDNA中没有启动子。获得更多的目的基因的方法是PCR技术,该技术的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便合成引物。(2)表示基因表达载体,其中标记基因的作用是
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